抗流感中药冰香散提取工艺的正交实验研究

刘抗伦 丁伟 向燕 徐培平

冰香散是国家自然科学基金课题(81072948）中运用中药预防流感所研制的纯中药制剂。它是由广藿香、野菊花、小茴香、冰片等中药提取的挥发油制剂。广藿香为唇形科植物广藿香的干燥地上部分。辛，微温。具有芳香化浊、和中止呕、发表解暑作用。野菊花为菊科植物野菊的干燥头状花序。苦、辛、微寒。具有清热解毒、泻火平肝作用。小茴香为伞形科植物茴香的干燥成熟果实。辛、温。具有散寒止痛、理气和胃作用。艾叶为菊科植物艾的干燥叶。辛、苦、温，具有温经止血、散寒止痛作用。冰片辛、苦、微寒，具有开窍醒神、清热止痛作用［1］。经实验表明，冰香散体外对甲Ⅰ型流感病毒有预防作用和直接抑制作用［2］。

课题组以冰香散挥发油得率为指标，采用共水蒸馏法，用L9(34)正交试验优选提取条件，选取冰香散的颗粒粒度、加水量、提取时间、提取次数4个因素，每个因素设3个水平，筛选冰香散的最佳提取工艺，为冰香散的药物制备和质量控制提供依据。

1 材料和仪器

1.1 药材

冰香散处方为广藿香15 g、野菊花15 g、艾草10 g、茴香10 g、冰片1 g，购自广州中医药大学第一附属医院。

1.2 仪器

TC-15套式恒温器(海宁市新华医疗器械厂);挥发油测定器(上海玻璃仪器厂);BS224S型电子分析天平(德国Sartorius公司);KQ5200E型超声仪(昆山市超声仪器有限公司)。

2 方法与结果

2.1 正交试验设计

根据预试验及冰香散中所含有中药材的挥发油提取工艺研究文献［3-5］，综合考虑影响挥发油的提取因素，选择冰香散颗粒粒度(A)、加水倍量(B)、浸泡时间(C)、蒸馏时间(D)4项为考察因素，每个因素设3个水平，以挥发油提取率作为考察指标，设计L9(34)正交试验。采用共水蒸馏法，所得挥发油收集在挥发油测定器中，精确读取挥发油得油量。冰香散提取因素水平表见表1。

表1 冰香散提取工艺因素水平

2.2 挥发油提取

以冰香散处方准确称取50 g冰香散药材，按照中国药典2010版标准制成粗粉、中粉、细粉，放置于2000 ml圆底烧瓶中，采用L9(34)正交表安排实验，按《中国药典》2010年版一部附录XD甲法挥发油测定法，提取挥发油，放置2小时，精确读取挥发油量，平行实验3次，计算挥发油得油率。公式为:得油率(%)=(得油量×挥发油密度/冰香散重量)× 100%［3］。

正交试验结果见表2，各因素组合的极差分别为:颗粒粒度(RA)0.15，加水量(RB)0.18，浸泡时间(RC)0.12，蒸馏时间(RD)0.39，它们之间的关系是RD＞RB＞RA＞RC，极差分析结果表明，4个因素的影响大小依次为:蒸馏时间(D)＞加水量(B)＞颗粒粒度(A)＞浸泡时间(C)，浸泡时间对得油率的影响最小，所以将此列作为误差列进行方差分析。

表2 正交试验结果

2.3 方差分析

为进一步确定各因素对结果的影响大小，对试验结果进行了方差分析。见表3。方差分析结果表明，颗粒粒度(A)、加水量(B)、浸泡时间(C)、蒸馏时间(D)四个影响因素的P值都大于0.05，即这4个因素对实验结果均无显著影响。根据正交试验结果，得出的最佳提取工艺组合为A2B1C2D3，即将药材粉碎成中粉，加10倍量水，浸泡1.5小时，提取6小时。

表3 方差分析表

3 结论与讨论

采用正交试验，运用方差分析，对影响共水蒸馏法提取冰香散挥发油的主要因素进行分析，本实验以得油率为考察指标，对冰香散挥发油的最佳提取工艺进行了优选。结果表明，冰香散挥发油的最佳提取工艺条件为选用冰香散药材粉碎成中粉，加10倍量水，浸泡1.5小时，提取6小时。

本实验中，由极差RD＞RB＞RA＞RC，由此可知提取时间是影响挥发油得率的重要因素，提取时间越长，得油率越高，表明随着提取时间的延长，提取越来越充分。提示提取冰香散挥发油时需要重视提取时间的选择。一般认为，药材颗粒粒度与有效成分提取率正相关，但含挥发油类药材要在一定的粒度下，才能提取出最多的油量。粉末过细，在蒸馏提取过程中容易吸附挥发油，使挥发油不能随水蒸气蒸出［6］。而且挥发油提取装置中所用的圆底烧瓶的容积也影响挥发油的得率，烧瓶内容物超过其容积的50% 以上，提取时容易爆沸，从而使药材粗粉随水流入收集装置，这也是试验中需要注意的问题［7］。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010.

［2］丁伟，赵昉，许秀妮，等.冰香散挥发油对甲Ⅰ型流感病毒体外作用研究［J］.中药材，35(8):1298-1300.

［3］鲁争，鲁雨，左杰，等.艾叶挥发油提取工艺研究［J］.时珍国医国药，2011，22(2):389-390.

［4］陈秋实，吴杰，翁涛，等.野菊花挥发油的提取工艺研究［J］.武汉生物工程学院学报，2008，4(3):140-142.

［5］王允忠，陈妍，乌莉娅·沙依提.正交试验法优选小茴香中挥发油的提取工艺［J］.新疆中医药，2008，26(1):12-13.

［6］崔红花，赵英日，沈志滨.砂仁中挥发油成分的多指标均匀设计提取工艺分析［J］.时珍国医国药，2010，21(7):1816.

［7］魏运姣，赵熠.降香挥发油提取工艺的正交设计法优选［J］.时珍国医国药，2012，23(12):3155-3156.