促排卵3号在小尾寒羊超排中的应用效果
2013-08-15冯亚杰王二耀施巧婷辛晓玲楚秋霞徐照学
冯亚杰,王二耀,吴 姣,施巧婷,辛晓玲,楚秋霞,徐照学
(1.河南农业科学院,河南 郑州 450002;2.河南农业大学,河南 郑州 450002)
获得大量、优质的卵母细胞,是开展胚胎工程各项研究的前提条件。目前在超数排卵技术日臻成熟的情况下,如何提高个体的排卵率非常重要。促排卵3号作为促黄体素释放激素的类似物,在动物繁殖中应用广泛。它作用于脑垂体,刺激促黄体生成素和促卵泡刺激素的分泌,提高受胎率和产仔数。为了验证其不同剂量在小尾寒羊超排中对排卵率的影响,我们进行了促排卵3号应用效果试验。
1 材料与方法
1.1 试验动物
1~3岁的小尾寒羊,膘情中等,体格健康,繁殖机能正常,圈舍饲养。试验动物来源于河南省焦作市。
1.2 超排药物
阴道埋植栓(新西兰生产);国产卵泡刺激素(中国科学院动物研究所生产,规格10 mg/瓶);前列腺素D-PG(上海计划生育研究所生产,规格0.15 mg/支);促排3号(宁波激素厂,规格25 μg/支);速眠新合剂(长春军需大学兽医研究所,规格1.5 mL/支)。
1.3 处理方法
埋置阴道栓的当天记为0 d,第10天递减注射促卵泡素共6次(总剂量6 mg),第5次注射促卵泡素的同时,撤出阴道栓并注射前列腺素0.15 mg。第1组发情开始时肌注促排3 号25 μg,第2 组注射促排3 号50 μg,对照组不注射促排3号。在发情后27~32 h进行输卵管采卵手术。供体手术前停食停水24 h。手术部位选在腹中线旁切口,在一侧乳房基部稍前方于腹白线旁2 cm处,由后向前切开6 cm左右的切口。在切开腹膜前,要彻底止血以防血液进入腹腔,引起腹内脏器尤其是子宫的粘连。用食指和中指寻找及显露子宫、输卵管及卵巢,记录卵巢状况及排卵点情况,采用输卵管上行冲洗法收集卵母细胞。观察记录所得卵子的形态。冲卵结束后按常规外科手术方法处理伤口。
2 结果
第1组共获得红体56个,获得卵33个,排卵率为58.92%。第2组共获得红体52个,获得卵48个,排卵率为92.3%。对照组共获得红体48个,获得卵18个,排卵率为37.5%。第2组的排卵率比第1组提高了33.38%,比对照组提高了54.8%。
3 讨论
LH可促使孕激素分泌增多,后者促使卵巢合成多种酶使卵泡壁溶解破裂,引起排卵。因此,排卵机制和LH密切相关。当优势卵泡成熟时会刺激垂体释放LH,使其破裂排卵,因此排卵前LH峰值和排卵率有密切的关系。Krishe[1]报道,对山羊注射促性腺激素释放激素后的排卵数明显高于未注射的,而且卵泡数比未注射的少。仲跻峰[2]报道,对超排的蒙古羊在发情后注射促性腺激素释放激素后的未排卵泡数明显减少,同时总获卵数也有升高。本次试验中也得到相似的结果。但有资料报道,绵羊垂体LH的含量较高,供体发情后内源性LH足以诱导大多数卵泡排出[3]。而本次试验在小尾寒羊发情后注射50 μg促排卵3号,排卵率达到92.3%,远高于对照组37.5%的排卵率。分析其原因,一方面可能是由于超排后卵巢上具备排卵能力的卵泡数量较多,内源性促性腺激素引发排卵的能力不足,而促排卵3号所诱导的LH则能弥补其不足,促使具备排卵能力的卵泡成熟排卵,从而提高排卵率[4,5]。一方面可能是个体差异造成的,对于某些自身LH分泌量不足和LH峰值与排卵时间相对异常的个体,促排卵3号所诱导的LH则能有效弥补其不足。因此,只要注射促排卵3号的时间、剂量得当,对提高小尾寒羊超排后排卵率是有益的。
[1] Krisher R L,Gwazdauskas F C,Page R L,et al.O-vulation rate,zygote recovery and follicular populations in FSH-superovulated goats treated with PGF2α and/or GnRH [J].Theriogenology,1994,41(2):491-498
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[3] 王光亚,段恩奎.山羊胚胎工程 [M].陕西.杨陵:天则出版社,1993.5
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