产蛋鸡群低致病性禽流感疑似病例综合诊断
2013-08-15刘恩昌张兆成山东省昌乐县畜牧兽医局262400
史 辉 刘恩昌 张兆成 (山东省昌乐县畜牧兽医局 262400)
禽流感是由正黏病毒科、流感病毒属、A型流感病毒引起的一种急性、高度接触性传染病,可分为高致病性和低致病性两种。低致病性禽流感虽不能造成鸡群的大量死亡,但是最近研究证明可以引起鸡群的免疫抑制,从而继发其他的疾病,产生巨大的经济损失。因此,做好低致病性禽流感的防控工作,有助于控制其他疾病的传播,提高生产效益、减少经济损失。
发病鸡群表现发病急、传播快,病情很快波及全群;临床表现体温升高,精神沉郁,叫声减小,缩颈,嗜睡,肿眼流泪,呼噜、甩鼻、尖叫,张口呼吸等呼吸道症状,病鸡采食量下降,拉白色稀粪或不消化的料粪,产蛋率下降,出现许多砂壳蛋、软壳蛋、畸形蛋、软皮蛋等,后期部分鸡只有神经症状,表现头颈后仰,抽搐,运动失调,瘫痪等,并有一定程度的死亡率。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 主要器材 切片机,切片刀,融水式电热恒温培养箱,熔蜡箱,包埋工具,微量加样器,超净工作台,玻璃研磨器,孵化箱,高速离心机,96孔V形反应板等。
1.1.2 病料 来自全省各地前到临床病理学实验室诊断的低致病性禽流感产蛋鸡疑似病例。
1.1.3 主要试剂 10%的福尔马林的固定液,二甲苯,梯度酒精(70%、80%、90%、95%、100%)液体蜡,苏木素,伊红,AIV(H5、H9)和ND单因子阳性血清,SPF鸡胚,PBS缓冲液。
1.2 方法
1.2.1 流行病学调查及临床症状观察 对前来诊断的病鸡仔细登记基本信息,向畜主详细询问发病情况、治疗情况及临床表现,对活着的病鸡仔细观察临床症状。
1.2.2 剖检病变观察 将病鸡放血致死,剖检病、死鸡,仔细观察各组织器官的病理变化并记录眼观病变。
1.2.3 病理组织学观察 剖检时取气管、肺脏、肾脏、胰腺、脑等器官组织,10%福尔马林溶液固定,常规石蜡切片、HE染色,光镜下观察组织病理学变化。
1.2.4 病毒分离鉴定 剖检病、死鸡时无菌采集气管、肺脏,低温冰箱保存,之后研磨病料,反复冻融3次之后,离心取上清液,将处理好的病料经尿囊腔接种鸡胚,取24h之后死亡的鸡胚,收取尿囊液,做交叉HA和HI试验,同时与NDV、AIV(H9、H5)单因子阳性血清做HI交叉抑制试验,记录结果。
2 结果
2.1 剖检病变观察
剖检发现眼结膜充血、出血,有许多浆液性渗出物;鼻腔充满黏液,喉头、气管黏膜充血、出血有许多黏液渗出;肾颜色变淡、肿胀,常见花斑肾病变;卵泡充血出血或液化破裂,输卵管黏膜表面有许多灰白色黏液,黏膜充血水肿;胃、肠黏膜充血、出血有较多黏液渗出。有些鸡群继发大肠杆菌感染,肝周炎、心包炎,有些鸡群发生卵黄破裂,形成卵黄性腹膜炎。有的则形成腹水。
2.2 病理组织学观察
病理组织学病变主要表现为:呼吸道黏膜上皮细胞脱落,黏膜固有层充血、出血,水肿、淋巴细胞浸润,呈卡他性或出血卡他性炎症;肺间质、肺房壁充血、出血、淋巴细胞浸润呈间质性肺炎病变;肾小管上皮细胞颗粒变性、水泡变性、坏死呈变质性肾炎病变;脑血管充血,周围少量淋巴细胞浸润,神经元变性坏死,周围见胶质细胞形成的卫星或噬神经现象,呈轻度病毒性脑炎病变;浆液纤维素性或纤维素性脓性炎症;胰腺上皮细胞的变性坏死;有的出现脾脏红髓充血,白髓淋巴组织颗粒、水泡变性,甚至表现坏死。
2.3 病毒分离的结果
保留有血凝性的尿囊液接种鸡胚之后,鸡胚全身出血。病毒液的血凝价为26与 NDV、AIV(H9和H5)等单因子阳性血清HI交叉抑制试验:分离毒仅与H9N2亚型AIV因子血清产生血凝抑制,HI效价为27~29与其它无反应,证实该分离毒为低致病性禽流感病毒。
3 治疗
对H9N2亚型禽流感,在严格隔离的条件下,使用抗病毒药物仍有一些早期预防、减轻症状和减少损失的作用。抗病毒药物,如盐酸金刚乙胺0.01%拌料连用5~7d,病毒唑0.005%~0.01%饮水,连用4~5d,也可以用些中草药来减轻症状,如板蓝根或是黄芪多糖等。抗菌药物如环丙沙星、氟甲砜霉素、强力霉素等0.008%~ 0.01%饮水,连用5~7d,以防止大肠杆菌、支原体等继发感染与 混合感染。同时可以在饲料水中增加0.18%的蛋氨酸、0.05%的赖氨酸、0.03%的VC或是多维素饮水,以抗应激,缓解症状,加快恢复体质。
4 结论
本研究结果表明,山东省各地绝大多数产蛋鸡群尤其是种鸡群的低致病性禽流感免疫状况良好,30份病鸡中有19份检测到H9为阳性,说明部分产蛋鸡已发生感染。由于本省产蛋鸡群均为多次免疫鸡群,产蛋鸡群发生的低致病性禽流感一般为非典型病例,只靠症状观察、剖检病变的临床诊断不能确定,确诊必须进行实验室诊断。