SPME-GCMS在药品分析中的应用研究

王晓宁，睢超霞

漯河医学高等专科学校 ，河南漯河 462002

目前，我国的对农药的使用最多的是有机磷农药，该农药具有毒性高的特点，由于其的广泛使用，使得近年来瓜果农药残留中毒事件发生的概率提高。在农产品中，对残留农药存在所受到的关注程度逐渐提高，对农药残留、使用加强管理势在必行，因此，建立灵敏、可靠、简便、快捷的监测手段是当务之急。

1 SPME-GCMS 简介

一般情况下，对有机磷污染物的测定首先要采用有机溶剂，或者超临界流体萃取等技术对污染样品进行处理，这种方法在分离净化的过程中存在一定的缺陷，如工作量大、步骤繁琐、成本高、好市场，且所用的有机溶剂对生态环境、人体健康都会产生负面影响。SPME，及固相微萃取技术是一种无溶剂、直接的固体萃取分离技术，该技术采用不同色谱固定相或者吸附剂，涂于一根熔融石英纤维上，制成萃取头，然后直接从样品中提取分离欲测组分，固相微萃取装置实质就是微量进样器，与气相色谱仪进样口相接，对待测物进行高温热解。SPME 最大的优势就是可以与GC 联用，集萃取、分离、进样、浓缩于一体，不需要有机溶剂，简单方便。采用SPME 方法对农产品中的农药残留进行测定目前还不常见。本文主要采用SPME 和GCMS 联用的方法，对蔬菜残留有机磷农药进行分析测定，建立一种先进可靠、实用有效的方法，为药品分析奠定理论基础。

2 仪器、材料及方法

2.1 仪器、材料

SPME 装置，气相色谱仪（HP5890II），聚二甲基硅氧烷萃取头（膜厚100μm），磁力搅拌台（nuvoaII），匀浆器（National）。

有机磷农药标准品，去离子水，茼蒿。

2.2 方法

1）蔬菜样品预处理。取新鲜茼蒿50g，置于匀浆器内剪碎，加入去离子水，越150g，搅拌匀浆5min，即得到蔬菜匀浆液，总体积为150mL，按实验需求，匀浆后加入4 种有机磷农药，与蔬菜组织混合；

2）SPME 萃取及GCMS 进样。去蔬菜匀浆液5mL 装于10mL 小容器瓶中，置于磁力搅拌台上，在常温下进行搅拌，转速为中等速度。然后在匀浆液中插入SPME 萃取头，一段时间后取出，然后放于去离子水中清洗，清洗不能超过5s，将残留在萃取头上的蔬菜碎屑除掉，将萃取头缩进SPME 装置针管内，插入气相色谱仪，推出萃取头，过5min 后抽出萃取头，拔出针管。萃取头每次用完以后，放置在GC 进样口处，在270℃高温及He 气体条件下处理二三十分钟，一般情况下，20min 后就可以保证萃取头上无农药残留；

3）气相色谱条件。检查室温度：290℃，气化室温度：270℃、载气：He，5mL/min；补充气：N2，15mL/min；升温：初温35℃，持续6min，然后按照30℃/min，上升到200℃，停止3min，再以10℃/min 上升到280℃，持续15min。此时，不分流进样，5min 后打开分流阀。

3 试验结果及讨论

3.1 解热时间

把萃取得到的附着在SPME 萃取头上的待测化合物插入气相色谱仪，气化室270℃高温目标进行解热，依靠流动相盗图色谱柱，这个环节是SPME 与GCMS 联用的重要步骤。在萃取等条件相同的基础上，萃取头的解热时间分别为1、2、···、6 分钟时，GCMS 影响无明显变化，四种有机磷农药相对标准偏差分别为：二嗪农4.75%、甲拌磷3.63%、乙硫磷7.65%、甲基对硫磷4.33%，因此可以知道，高温热解的时间可能较短，为了方便操作，使试验条件一直，本文所选定的解热时间均为5min。

3.2 样品匀浆处理

4 种有机磷农药都具有水溶性，不易挥发。对这些有机磷农药进行提取分离需要借助SPME 萃取头，先制备液态样品，反复试验，采用上文所述预处理步骤，得到的蔬菜匀浆液比较均匀，蔬菜颗粒较小，有利于萃取，最主要的是有机磷农药的损失少，稳定性好。

3.3 离子强度

溶液中的离子强度的增加可以在水样中添加氯化钠，从而有效的降低有机化合物的溶解，改善萃取的效率。为了检验SPME 萃取时是否收到浆液中离子强度增大的影响，设计实验进行检验：取3 份浆液，各5mL，个加入标准混合农药，再加入NaCl 分别为0g、0.5g 和1g，混合后进行萃取，然后进行GC 测定，测定结果为，除NaCl 含量不同，其余条件均相同，氯化钠含量越高，萃取的效率越低。因此可以肯定，加无机盐的方法提高萃取效率并不是适合每一种待测组分。

3.4 搅拌速度

在萃取过程中，对试样反复进行搅拌，使待测组分均匀，达到分配平衡。本文所进行的试验搅拌速度均为中等速度。如果分别采用不搅拌、低速搅拌、中速搅拌和高速搅拌，经过试验发现，对于一种农药组分而言，在其余条件均相同时，SPME 吸附量上不搅拌小于高速搅拌8%，低速搅拌和中速搅拌分别达到高速搅拌的83%和87%。可见不搅拌时的扩撒速度最慢，主要是因为固相表面有一层静止水膜。在搅拌时，水膜破坏掉，吸附量增大。虽然高速搅拌时吸附量最大，萃取装置中小磁转子不稳定，可能会出现不确定因素，因此选择中等搅拌速度。

3.5 其它因素

除上述几种影响因素之外，还有平衡时间、定量可行性分析等因素也会影响到试验的结果，在实际试验中，只要保持一段萃取 时间，就能保证实验结果，没有必要等到平衡。为了提高精密度及灵敏度，需要达到一定的萃取量。虽然固相微萃取技术是一种动态平衡技术，在一些相同条件下，采用外标法测量是可以的，主要是被测样品相同并且干净的影响。此外，如果存在适用的内标物，进行称重时加入，可以校正处理时的损失，使得样品处理和分析定量更加的准确。

[1]杨新磊，罗明标，唐毓萍.液相微萃取技术在生物样品药物检测中的应用[J].药物分析杂志，2007(12).

[2]屈颖.萃取技术在药物分析中的应用[J].天津药学，2009(1).

[3]陈军辉，杨佰娟，李文龙.加速溶剂萃取技术在中药有效成分分析中的应用[J].色谱，2007(5).

[4]黄星，马果花，王芳琳.液相微萃取技术及其在毒物分析中的应用[J].分析测试学报，2008(3).