Cox-2和P-21蛋白在子宫内膜癌中的表达及意义

韦瑞红 伍丽群 任带娇

（深圳市福田人民医院妇产科，广东 深圳 518033）

Cox-2和P-21蛋白在子宫内膜癌中的表达及意义

韦瑞红 伍丽群 任带娇

（深圳市福田人民医院妇产科，广东 深圳 518033）

目的 探讨子宫内膜癌中P-21蛋白和环氧化酶-2 （Cyclooxygenase-2，COX-2）的表达和意义。方法 采用免疫组织化学中的SP法对对照组中20例正常的子宫内膜组织患者、非典型增生组中的7例子宫内膜出现非典型增生组织患者以及子宫内膜癌组中的55例子宫内膜癌组织患者中P-21蛋白及COX-2的表达情况进行检测。结果 与非典型增生组和子宫内膜癌组相比，对照组中患者P-21蛋白的阳性表达率显著较高（P＜0.05），而对照组中Cox-2的阳性表达率显著较非典型增生组和子宫内膜癌组低（P＜0.05）；在手术-病理分期和分化程度，以及淋巴结出现转移等宫内膜癌组织的相关方面，P-21蛋白的阳性率具有明显差异（P＜0.05）；Cox-2阳性率在子宫内膜癌组织的手术-病理分期、分化程度、肌层浸润方面差异有统计学意义（P＜0.05），子宫内膜癌组织P-21蛋白阳性表达率与Cox-2阳性呈负相关（r=-0.498，P=0.000）。结论 P-21蛋白和Cox-2异常表达可能在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用。

子宫内膜癌；P-21蛋白；Cox-2

在妇科，子宫内膜癌属于常见的恶性肿瘤之一，在女性全身的恶性肿瘤中约占7%，在女性生殖道的恶性肿瘤疾病中占20%～30%，其发病率近年来一直呈现出升高的趋势[1]。肿瘤的出现是多基因且多步骤的，其过程十分复杂，正常子的宫内膜细胞出现恶性转化，发生、发展成为子宫内膜癌可由多种因素早成，例如激活癌基因、细胞周期出现调节紊乱及抑癌基因的失活等[2-3]。近年研究发现，COX-2参与了多种肿瘤的细胞增殖、抗凋亡和血管生成，与肿瘤的发生、发展和预后密切相关[4]。P21蛋白与肿瘤的发生、发展及生物学行为密切相关，并且在基因治疗方面有着广阔的应用前景。因此本研究探讨环氧化酶-2 （Cyclooxygenase-2, COX-2）与P21蛋白表达在子宫内膜癌的发生、发展，对该病的治疗及其预后之间的相关性，其结果如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本文选择了自2001年10月至2011年10月来我院妇产科治疗的55例子宫内膜癌病人，将其作为子宫内膜癌组，其年龄为35～72 岁,平均为（52 ±8）岁，患者在术前未接受放、化疗和激素治疗，在术后经组织病理证实患有子宫内膜样腺癌。20例患者为高分化腺癌，21例患者为中分化腺癌，14例患者为低分化腺癌；在手术-病理分期方面，40例患者为Ⅰ～Ⅱ期，15例为Ⅲ～Ⅳ期；癌组织的肌层浸润深度：32例患者为肌层浸润≤1/2，23例患者为肌层浸润＞1/2。51例患者术中接受盆腔淋巴结清扫手术，42例未出现淋巴结转移，7例出现淋巴转移，未做盆腔淋巴清扫患者4例。选择同期门诊20 例正常子宫内膜行刮宫的患者作为对照组，其年龄为（50±5）岁；7例子宫内膜出现非典型增生患者作为非典型增生组，其平均年龄为（51±8）岁。本文中所选患者在年龄等其他相关因素方面存在的差异，不具有统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 对免疫组织的化学检测：本次研究中COX 2为即用型鼠抗人单克隆抗体、SP试剂盒以及鼠抗p21蛋白均由福州迈新生物技术开发公司提供，全部样品均用含量为10%的中性福尔马林进行固定，将常规脱水石蜡进行包埋切片4μm，将载玻片涂上多聚赖氨酸并将切片贴上，常规进行烘片脱蜡，并梯度乙醇直至蒸馏水化,用免疫组织的化学微波对切片予以修复，操作参考试剂盒说明。将已知的阳性切片作为阳性对照，用PBS替代一亢作为阴性对照。

表1 3组 Cox-2和P21蛋白表达情况

表2 P21蛋白和Cox-2表达与子宫内膜癌的临床病理关系

1.2.2 结果判定：当肿瘤细胞浆呈现出棕黄色颗粒时，则COX 2为阳性，当细胞浆内和膜上呈现出棕黄色细颗粒时，p21蛋白染色为阳性。

1.3 统计学处理

研究中所得数据采用统计学软件包SPSS15.0进行统计学方面的分析，所有组间数据应用χ2检验，相关数据以均数标准差（）表示。以P＜0.05代表差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 3组 Cox-2和P21 蛋白的表达情况

本次研究显示，与非典型增生组和子宫内膜癌组相比，对照组中患者P-21蛋白的阳性表达率显著较高（P＜0.05），而对照组中Cox-2的阳性表达率显著较非典型增生组和子宫内膜癌组低（P＜0.05），如表1所示。

2.2 P21蛋白及Cox-2 表达与子宫内膜腺癌的临床病理关系

在手术-病理分期和分化程度，以及淋巴结出现转移等宫内膜癌组织的相关方面，P-21蛋白的阳性率具有明显差异（P＜0.05）；Cox-2阳性率在子宫内膜癌组织的手术-病理分期、分化程度、肌层浸润方面差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.3 P21 蛋白与 Cox-2关系

子宫内膜癌组P-21阳性中Cox-2蛋白表达阳性者为43%，P-21蛋白阴性中Cox-2表达阳性者92%，差异有统计学意义（P＜0.05）。P-21蛋白阳性表达率与Cox-2阳性表达率呈负相关（r=-0.498，P=000）。

3 讨 论

3.1 P21位于人6号染色体短臂上，均长约2.1kb，编码区共有495个核昔酸，系由164个氨基酸组成的相对分子质量为21KD的蛋白质，故又称P21基因，P21蛋白即为P21基因的表达产物。目前P21蛋白是临床已知的激酶抑制活性最为广泛的细胞周期性抑制蛋白，其主要是在细胞周期调节中起到参与作用，对异常细胞的增生起到抑制功效，协调细胞完成对DNA损伤的修复。有学者研究指出[5]P21表达在子宫内膜增生及在子宫内膜增生内会出现减少或不表达现象，罗雪慧等报道在正常外阴、外阴尖锐湿疣、外阴癌的P21表达分别为75%、27.5%、26.5%。[6]从本次研究中可看出，对照组中的P21 蛋白的阳性表达率显著较非典型增生组和子宫内膜癌组高，其差异具有统计学意义（P＜0.05），与以上学者的研究一致。由此表明在子宫内膜自良性到恶性的发展过程中，P21蛋白表达在非典型增生这一阶段很可能已出现了变化，如果是形态学意义上的非典型增生伴随P21蛋白表达减少，很可能就会发展成为子宫内膜癌。P21蛋白阳性率在子宫内膜癌组织的手术-病理分期、分化程度等方面差异有统计学意义（P＜0.05），但在肌层浸润方面的差异不具有统计学意义（P＞0.05）。腺癌的阳性表达率在患病早期和高分化时较高，但随着分期的提高和分化程度的不断降低，腺癌的阳性表达率随之下降。王琼书等[7]研究指出，子宫内膜癌的细胞分化和P21的表达具有密切关系，这说明基因表达减弱引起细胞增殖，进而失去了有效监控，使得肿瘤生长迅速。

3.2 环氧化酶-2（COX-2）是炎症过程中催化前列腺素合成的一个关键诱导酶。是前列腺素合成过程中的重要限速酶。COX-2在大多数正常组织中不表达，但在细胞受到各种刺激如炎症因子、生长因子、促癌剂等的诱导下迅速合成，参与炎症过程和肿瘤的发生，对照组中Cox-2的阳性表达率显著较非典型增生组和子宫内膜癌组低（P＜0.05），这说明COX-2可能参与肿瘤发生的起始阶段。Lambropoulou等[8]的研究发现，COX-2在子宫内膜癌中的表达与FIGO分期密切相关，Ⅲ、Ⅳ期显着高于Ⅰ、Ⅱ期；中低分化者显着高于高分化者，伴有深肌层浸润者显着高于无肌层浸润或仅浅肌层浸润者。本次研究结果指出，在手术-病理分期和分化程度，以及淋巴结出现转移等宫内膜癌组织的相关方面，COX-2的阳性率具有明显差异（P＜0.05）；与文献相符。有淋巴结转移与无淋巴结转移者相比稍高，差异无统计学意义，（P＞0.05），也不能完全排除与淋巴结转移阳性的病例数较少有关。本次研究结果显示，P21蛋白和COX-2的表达出现异常和子宫内膜腺癌的产生关系密切，并在发展过程中始终存在。P21蛋白和COX-2的表达存在相关性，呈现出负相关的关系，P21蛋白表达低的患者COX-2的表达高，并且细胞增殖的能力也高；这说明肿瘤细胞的增殖能力较强，这可能是和缺少P21蛋白有关，后者经直接或是间接作用提高了癌细胞具有的增殖活性。所以对P21蛋白与COX-2表达的联合检测对掌握子宫内膜癌所具有的生物学行为和对预后的判断具有重要的参考价值。

[1] 乐杰.妇产科学 [M].7版.北京:人民卫生出版社,2008:272.

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[3] 姜展红,杨丽,崔娣,等.癌相关基因蛋白在子宫内膜癌中表达[J].中华实用诊断与治疗杂志,2010,24(6):569-571.

[4] Moran EM. Epidemiological and clinical aspects of nonsteroidal antiinflammatory drugs and cancer risks [J].J Environ Pathol Toxicol Oncol,2002 ,21(2):193-220.

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[7] 王琼书,杜鹃,史玉霞,等.子宫内膜癌中p21Cipi/Wafl和PCNA蛋白表达及意义[J ].华南国防医学杂志,2004,18(6):3-5.

[8] Lambropoulou M, Alexiadis G, Limberis V, et al. Clinicopathologic and prognostic significance of cyclooxygenase-2 expression in endometrial carcinoma[J]. HistolHistopathol, 2005,20(3):753-759.

Expression and significance of Cyclooxygenase-2 and p-21 protein in endometrial cancer

WEI Rui-hong, WU Li-qun, REN Dai-jiao
(Department of Obstetrics and Gynecology, Futian People’s Hospital, Shenzhan 518033, China)

Objective To explore the expression and significance of p-21 and Cyclooxygenase-2 protein in endometrial cancer. Methods Immunohistoche mical SP method was used to detect the expressions of p-21 and Cox-2 protein in 20 cases of normal endometrium (control group ), 9 cases of endometrial atypical hyperplasia (atypical hyperplasia group) and 57 cases of endometrial carcinoma (endometrial cancer group) Results The positive rate of p-21 protein was obviously higher in control group than that in the other group(P＜0.05). The positive rate of Cox-2 protein in control group was obviously lower than that in the other groups(P＜0.05).The positive rate of p-21 protein was significantly different in operation stage ,pathology stage, differentiation degree and lymph metastasis(P＜0.05).The positive rate of Cox-2 protein was significantly different in operation stage, pathology stage, differentiation degree and Myometrial invasion(P＜0.05)In endometrial carcinoma group, the positive rate of p-21 protein was negatively correlated with the high proliferation rate of Cox-2 (r=-0.498, P=0.000) Conclusion The abnormal expressions of p-21 and Cox-2 protein may play an important role in carcinogenesis and development of endometrial cancer.

Endometrial cancer ; p-21 protein ; Cyclooxygenase-2

R737.33

B

1671-8194（2013）22-0046-03