粪便抗原检测诊断幽门螺杆菌感染的检验学研究

刘甲辰 刘晓华 金 哲 鲍连勇

（中国医科大学辽阳中心医院检验科，辽宁 辽阳 111000）

粪便抗原检测诊断幽门螺杆菌感染的检验学研究

刘甲辰 刘晓华 金 哲 鲍连勇

（中国医科大学辽阳中心医院检验科，辽宁 辽阳 111000）

目的 评价幽门螺杆菌粪便抗原（幽门螺杆菌 SA）检测诊断幽门螺杆（幽门螺杆菌）感染的可靠性。方法 采用 ELISA 法检测 116例因上消化道症状接受胃镜检查患者的幽门螺杆菌 SA，以快速尿素酶试验、14C-尿素呼气试验联合检测作为诊断幽门螺杆菌感染的“金标准”。结果 “金标准”诊断幽门螺杆菌感染：阳性 78 例，阴性 38 例，“金标准”阳性 78 例中，幽门螺杆菌 SA 检测阳性为 74 例，阴性为 4 例；“金标准”阴性 38 例中，幽门螺杆菌 SA 检测阴性为 36 例，阳性为 2 例。幽门螺杆菌 SA 检测诊断幽门螺杆菌感染的敏感性94.9%（74/78），特异性 94.7（36/38），准确性 94.8%（110/176），阳性预测值 97.4%（74/76），阴性预测值 90.0%（36/40）。结论 幽门螺杆菌SA检测有较高的敏感性和特异性，是一种简便可靠、非侵入性的诊断幽门螺杆菌感染的方法。

粪便抗原；螺杆菌；幽门；诊断

幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori，HP）感染是慢性胃炎和消化性溃疡的主要原因，也是胃肿瘤发生的高危因素[1-3]。现阶段，检测幽门螺杆菌的方式包括侵入性及非侵入性两种，侵入式要采用胃镜进行检查，获得胃粘膜活检标本后开展包括尿素酶试验、组织染色及培养检查等检验，非侵入式则包括13C、14C-尿素呼气试验（14C-UBT）、15N尿素排泄试验、血清学试验学。然而，上述方式 都 存 在 其 优 劣 势[4-5]。 最近几年，西方有研究显示，有一种新型的非侵入性检查方式，即检测幽门螺杆菌粪便抗原（幽门螺杆菌 stool antigen，幽门螺杆菌SA）[6-7]，本研究以快速尿素酶试验、14C-尿素呼气试验作为诊断幽门螺杆菌感染的“金标准”，旨在评价该方法诊断幽门螺杆菌 感染的可靠性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取116例患者，其皆为由于出现各类上消化系症状，并接受胃镜检查者。其中60例为男性，56例为女性，年龄为17～66岁，平均年龄（42.8±4.1）岁。排除以下情况者：30d内服用过抗生素者，采用质子泵抑制剂，使用过H2受体阻滞剂及铋剂等对幽门螺杆菌造成影响者，胃部分切除术患者。

1.2 方法

上述患者都在空腹状态下，在使用胃镜检查中，选择胃窦部活检1块胃粘膜作快速尿素酶试验，同时行14C-UBT 和 幽门螺杆菌SA检查。

1.2.1 幽门螺杆菌诊断标准

快速尿素酶试验及14C-尿素呼气试验，上述两种检查都为阳性是诊断幽门螺杆菌感染的“金标准”，若两种试验结果都是阴性则可诊断为幽门螺杆菌阴性。

1.2.2 幽门螺杆菌粪便抗原检查

用无菌瓶采集样本，对患者当天早晨的粪便样本进行内镜检验，放在零下20℃的冰箱内备用。检测试剂盒为上海鑫乐生物有限公司生产，使用ELISA（酶联免疫吸附测定）双抗体夹心法进行检测，根据试剂盒操作步骤进行操作。具体操作流程为：挑取约100mg粪便置入0.4mL稀释液中进行稀释，重合混合后震荡30s，制成稀释标本。取0.1mL稀释液、阳性/阴性对照物放在板孔内，向孔内加入0.1mL酶标抗体，在室温环境中防止1h，将板冲洗干净，再向每孔内滴入0.1mL底物溶液，在室温环境内防止10min，直至阳性对照孔变为蓝色，滴入2滴终止液，并在15min内，采用酶联免疫仪，读取波长450mm处待测样本的吸光度（OD）。结果评判：若OD高于0.120则为阳性，若OD超过0.10单不足≤0.120则是可疑，若OD不足0.10则为阴性。

1.2.3 14C-UBT

在胃镜检查后，立即口服一粒含37Kpq （ lu-Ci）14C-尿素胶囊（解放军第二医药大学），患者静坐0.5h后采用导管吹气进含二氧化碳吸收剂的液闪瓶，直至吸收剂颜色从红色变成无色，停止吹气，往闪瓶例加进4.5mL的稀释闪烁液，在液体闪烁计数仪（贝克曼库尔特商贸（中国）有限公司）上检测，获取DPM（每分钟的衰变数），DPM≥200为阳性，100≤DPM≤199为可疑阳性，DPM＜100为阴性。

1.2.4 快速尿素酶试验（RUT）

在胃镜检查过程中，在胃窦离幽门40mm左右处取一块活检组织，置入一分钟尿素酶检测试剂（东乐自然基因生命科学公司）瓶内，经5min，若组织块周边的液体呈红色则是阳性，否则是阴性。

1.3 数据统计处理

检验“金标准”是快速尿素酶试验及14C-尿素呼气试验结果，根据诊断试验的相关评价方式，使用四格表进行分析，得出特异性、敏感性、准确性、阳性/阴性预测值。

2 结 果

在116例患者中，参考诊断“金标准”对幽门螺杆菌感染进行分析。结果为：78例患者为阳性，38例患者为阴性。“金标准”显示的78例为阳性患者内，有74例患者的幽门螺杆菌SA检测结果为阳性，另4例为阴性；“金标准”显示的38例阴性患者内，36例为幽门螺杆菌SA检测结果为阴性，另2例为阳性。详见表1。和“金标准”检测结果相比，幽门螺杆菌SA诊断幽门螺杆菌感染的敏感性为94.87%（74/78），特异性为94.74%（18/19），准确性为94.83%（110/116），阳性预测值为97.37%（74/76），阴性检验的预测值为90.00%（36/40）。

表1 幽门螺杆菌SA检测与金标准检查结果比较（例）

3 讨 论

随着幽门螺杆菌感染与胃肠道疾病之间的研究的不断深入，检测幽门螺杆菌感染的方法在临床上应用也日益普遍。RUT法目前作为单独的临床诊断方法，具有较高的准确性，然而，活检标本内的细菌密度决定了该反应的结果，而“灶性”分布也对取材有着重要的影响；若患者最近使用国抗幽门螺杆菌药物，则其阳性率会显著降低，其假阴性率明显提高[8]。由于该方法需通过胃镜检查，因此有一定创伤性，且操作较繁琐，患者的依从性差，且极易导致交叉感染，从而大大增加了对幽门螺杆菌根治及随访的难度。作为一种重要的非侵入性检测方式，有研究已证实尿素呼气试验的敏感性及特异性较高，并可以反映幽门螺杆菌的活动性感染，在判断根治幽门螺杆菌的效果中具有积极的价值。然而，14C-尿素呼气试验有着一定的放射性，从而受限其应用范围；13C-尿素呼气试验没有放射性，然而价格较高，且另需的红外能谱仪和气体质谱仪，其价格也相当高，从而大大限制了其基层医疗单位的应用。近年来，一种新的非侵入性检查方法——幽门螺杆菌SA，就是采用纯化免抗人多克隆抗体、酶标抗体双抗体夹心酶免疫对幽门螺杆菌SA进行测定的方式，该法的检测原理是，当胃粘膜的上皮细胞更新脱落时，在其表面定植的幽门螺杆菌也会随粪便被排出，采用ELISA法对粪便内的幽门螺杆菌SA进行检测。笔者应用此方法检测了116例患者幽门螺杆菌SA，与“金标准”比较，初步发现此法具有较高的敏感性（94.9%）、特异性（94.7%）、准确性（94.8%），与国外报道基本一致[9-10]。所以，若只是了确定当前胃内是否存在幽门螺杆菌感染，对抗幽门螺杆菌药物的效果和抗幽门螺杆菌治疗后复发、再感染情况进行观察，对幽门螺杆菌SA进行检测是一种较为理想的方法。另外，幽门螺杆菌SA检测与其他幽门螺杆菌检测方法相比，还有着简便、价廉、可靠、安全等优点；同时标本来源方便，特别适合于儿童、孕妇、老人及其他不宜做胃镜检查的患者；且其试剂抗干扰能力强，不受粪便中其他细菌、病毒的干扰，故该方法适合在基层医院推广使用。

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