青霉素钠和头孢唑林钠与脂肪乳配伍时的含量测定＊

李颖华 ，马玉樊 ，王 荧 ，张志刚 ，张 宏 ，卢婷利 ，陈 涛 ，3

(1.西北工业大学明德学院，陕西 西安 710124;2.西北工业大学生命学院，陕西 西安 710072;3.陕西脂质体工程技术研究中心，陕西 西安 710075)

青霉素钠、头孢唑林钠是临床常用的抗生素，使用时大多以葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液等溶剂进行溶解，且以葡萄糖注射液为主，因其除起溶剂作用外还能为患者提供能量。但一些危重患者对葡糖糖的代谢机能受损，持续滴注葡糖糖注射液会造成高血糖症，甚至酸中毒[1]。脂肪乳注射液是一种胃肠外能量补给剂，具有良好的生物相容性，且对于危重患者能被优先吸收利用[2]。它以大豆油为主要成分，以精制卵磷脂为乳化剂、甘油为等渗剂，经高压均质而成[3]，临床上广泛用于危重患者手术前后的能量供给、营养支持及改善肿瘤患者对化学治疗、放射治疗的耐受性[4－6]。基于脂肪乳的诸多临床优点，若其可与抗生素配伍使用，则既具有效兼顾治疗和防治感染又能提供身体恢复所需营养和能量的双重功效，更好地满足临床上一些危重患者的需求。因此，本试验中模拟临床用法，建立了检则这两种常用抗生素分别与10%，20%，30%脂肪乳配伍时含量的方法，同时考察了配伍后24 h内两种抗生素的含量变化，结果其配伍后稳定性良好，粒径、电位与pH均不发生改变，对体内外抑菌效果也无影响[7－8]，现报道如下。

1 仪器与试药

Waters 2695型高效液相色谱仪;Waters 2996型紫外检测器;Waters 717型自动进样器;Waters Millennium色谱工作站;TG16A－WS型台式高速离心机;德国Sartorius pH计。注射用青霉素钠(华北制药有限公司，批号为S0911316);注射用头孢唑林钠(石药集团中诺药业＜石家庄＞有限公司，批号为100208018);10%，20%，30%脂肪乳(西安力邦制药有限公司，批号分别为1003171，1003083，0910093);乙腈为色谱纯，磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、枸橼酸均为分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

青霉素钠:色谱柱为Agilent HC C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相为 0.1 moL/L 磷酸二氢钾溶液(pH=2.5)－乙腈(70 ∶30)，流速 1.0 mL/min，检测波长为 225 nm，柱温为 25 ℃，进样量为 20 μL。

头孢唑林钠:色谱柱为Agilent HC C18柱(250 mm ×4.6 mm，5μm)，流动相国磷酸氢二钠－枸橼酸水溶液(各3.8×10－3mol/L)－乙腈(88 ∶12)，流速为 1.0 mL/min;检测波长为 254 nm，柱温为25 ℃，进样量为 10 μL。

2.2 干扰试验

青霉素钠:将注射用青霉素钠按拟订的流动相稀释成质量浓度为0.2 g/mL的供试品溶液，用0.22 μm的滤膜过滤后待用。分别精密吸取10%，20%，30%脂肪乳注射液100 μL，置1 mL的离心管中，加流动相至刻度，摇匀后置离心机中8000 r/min离心30 min，取下层澄清溶液用0.22 μm滤膜过滤，备用。将注射用青霉素钠分别与10%，20%，30%的脂肪乳配伍，质量浓度为1 g/L。将配伍后的溶液各精密吸取100 μL，置1 mL的离心管中，加流动相至刻度，摇匀后置离心机中8 000 r/min下离心30 min，取下层澄清溶液用0.22 μm滤膜过滤，备用。将上述待测液按拟订色谱条件进样，结果青霉素钠分别与10%，20%，30%脂肪乳配伍后的色谱图相同;10%、，20%，30%脂肪乳的色谱图相同。其中青霉素钠、10%脂肪乳及青霉素钠与10%脂肪乳配伍后的色谱图见图1。可见，10%，20%，30%脂肪乳对脂肪乳中青霉素钠的检测无干扰。

图1 青霉素钠干扰试验高效液相色谱图

头孢唑林钠:将注射用头孢唑林钠按拟订的流动相稀释成质量浓度为0.1 g/L的供试品溶液，0.22 μm滤膜过滤后待用。分别精密吸取10%，20%，30%脂肪乳注射液100 μL，置1 mL的离心管中，加2.1.2项下的流动相至刻度，摇匀后置离心机中8 000 r/min离心30 min，取下层澄清溶液用0.22 μm滤膜过滤，备用。将注射用头孢唑林钠分别与10%，20%，30%脂肪乳配伍，质量浓度为1 g/L。将配伍后的溶液各精密吸取100 μL，置1 mL的离心管中，加拟订的流动相至刻度，摇匀后置离心机中8 000 r/min离心30 min，取下层澄清溶液用0.22 μm滤膜过滤，备用。将上述待测液按拟订色谱条件进样，结果头孢唑林钠分别与10%，20%，30%脂肪乳配伍后的色谱图相同;10%，20%，30%脂肪乳的色谱图相同。其中头孢唑林钠、10%脂肪乳及头孢唑林钠与10%脂肪乳配伍后的色谱图见图2。可见，10%，20%，30%脂肪乳对头孢唑林钠的检测无干扰。

图2 头孢唑林钠干扰试验高效液相色谱图

2.3 线性关系考察

青霉素钠:精密称取注射用青霉素钠9.6 mg，用流动相溶解并制成质量浓度为 9.6，4.8，2.4，1.2，0.6，0.3，0.15，0.07 5，0.037 5，0.018 7 g/L 的溶液，进样测定，将峰面积(A)与药物浓度(C)进行线性回归，得回归方程 A=177 490 C+11 142，r=0.999 8。结果表明，青霉素钠质量浓度在 0.075 ～4.8 g/L 范围与峰面积呈良好线性关系。

头孢唑林钠:精密称取头孢唑林钠16 mg，用流动相溶解并制成质量浓度为 16，8，4，2，1，0.5，0.25，0.125，0.062 5，0.031 3，0.015 6，0.007 8，0.003 9，0.001 9 g/L 的溶液，进样测定，将峰面积(A)与药物质量浓度(C)进行线性回归，得回归方程为 A=1×106C －98 555，r=0.999 8。结果表明，头孢唑林钠质量浓度在0.007 8～8.0 g/L范围内与峰面积呈良好线性关系。

2.4 加样回收试验

精密量取已知含量的各配伍液，准确加入高、中、低3种不同质量浓度的各溶液，测定峰面积(A)，分别代人各自回归方程计算含量。结果见表1和表2。结果表明，青霉素钠及头孢唑林钠的检测方法准确可靠。

2.5 精密度试验

分别取1.0 g/L青霉素钠溶液及1.0 g/L头孢唑林钠溶液，按拟订色谱条件和方法，连续重复进样6次，以峰面积考察进样精密度。结果青霉素钠平均峰面积为188 412，头孢唑林钠平均峰面积为1 432，表明进样精密度良好。

青霉素钠:取青霉素钠分别与10%，20%，30%脂肪乳的配伍液，在 4 ℃和 25 ℃条件下，分别于 0，2，4，6，24 h 时取样，按拟订项下色谱条件检测并记录峰面积，代入标准曲线计算青霉素钠的含量，其含量及随时间变化情况见表3。经SPSS 17.0统计分析，这些含量间的变化差异无统计学意义。

表1 青霉素钠加样回收试验结果(n=6)

表2 头孢唑林钠加样回收试验结果(n=6)

表3 青霉素钠与脂肪乳配伍后24 h内的含量变化(%)

头孢唑林钠:取头孢唑林钠分别与10%，20%，30%脂肪乳的配伍液，在 4℃和 25℃条件下，分别于 0，2，4，6，24 h时取样，按拟订色谱条件检测并记录峰面积，代入标准曲线计算头孢唑林钠的含量，其含量及随时间变化情况见表4。经SPSS 17.0统计分析，这些含量间的变化并差异无统计学意义。

表4 头孢唑林钠与脂肪乳配伍后24 h内的含量变化(%)

3 讨论

注射用青霉素钠、注射用头孢唑林钠分别与10%，20%，30%脂肪乳配伍后24 h内配伍液的外观、pH及粒径均无明显变化，表明青霉素钠、注射用头孢唑林钠与脂肪乳配伍不会引起脂肪乳变性，配伍后24 h内未出现漂油和破乳现象。经高效液相色谱法检测药物含量没有因为与脂肪乳配伍而产生变化，并未出现其他吸收峰，表明抗生素没有发生降解。配伍后脂肪乳和药物都非常稳定。体外抑菌试验结果表明，青霉素钠与头孢唑林钠分别与10%，20%，30%脂肪乳配伍后对药物的抑菌作用均无影响[7－8]。

本研究为脂肪乳的应用提供了一个新思路，其既保持了本身的补充营养功能又能用作抗生素的溶剂。这样，既可避免葡萄糖注射液溶解抗生素用于危重患者所带来的副作用，还可为患者提供足够的营养支持，改善患者的淋巴细胞活性，有助于患者康复。

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