顶空毛细管气相色谱法测定阿魏酸钠中有机溶剂残留量

黄宇玫，罗文艳

1南昌大学科学技术学院，南昌330029;2南昌大学第四附属医院药剂科，南昌330003

阿魏酸钠(sodium ferulate)是当归、川芎等中药材中的主要成分阿魏酸的钠盐，能抑制丙二醛及血栓素B2的产生，减轻心肌水肿及乳酸脱氢酶的释放，并能促进6-酮-前列腺F1a的产生，具有抗血小板聚集、舒展血管及心肌保护作用［1，2］。市场上的阿魏酸钠多为人工合成品，其在合成工艺中使用了乙醇、哌啶和吡啶三种有机溶剂，《中国药典》2010年版附录仅规定了这其中乙醇和吡啶的限度，对于阿魏酸钠中三种有机残留溶剂的色谱分析及残留量的测定尚未见文献报道。为了控制有机溶剂残留量，提高药品的安全性和可靠性，本文建立了顶空毛细管气相色谱法测定阿魏酸钠中有机溶剂残留量的方法。结果表明，所建立的方法简便、快捷、灵敏度高，结果准确可靠。

1 仪器与试药

Agilent6890N型气相色谱仪，氢火焰离子化检测器(FID)，7694E顶空进样器，Sartorius BP211D精密电子天平(德国赛多利斯股份公司)。

阿魏酸钠(丽珠集团利民制药厂，批号0908012、0911014、0912018);乙醇、哌啶、吡啶均为色谱纯。

2 方法与结果

2．1 溶液配制

供试品溶液:精密称取阿魏酸钠原药0．20 g，置20 mL顶空瓶中，精密加入水5 mL，密封，摇匀，作为供试品溶液。

对照品溶液:精密称取乙醇500 mg，哌啶和吡啶各20 mg，置100 mL量瓶中，加超纯水稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液;精密量取对照品贮备液2 mL，置50 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置20 mL顶空瓶中，密封，作为对照品溶液。

2．2 色谱条件

安捷伦色谱柱DB-624石英毛细管柱(0．53 mm×30m，3μm);程序升温，初始温度80℃，以8℃/min升至200℃，保持4 min;进样口温度200℃，检测器温度250℃;FID检测器。载气氮气，流速5．0 mL/min;氢气30 mL/min;空气400 mL/min;分流比10∶1;顶空瓶温度80℃;平衡时间30 min;定量环体积1．0 mL。

在上述色谱条件下，乙醇、哌啶与吡啶色谱峰的理论板数均不低于5000，各有机溶剂色谱峰分离度均大于2．0，空白溶剂无干扰，结果见图1。

图1 对照品溶液(A)和供试品溶液(B)的气相色谱图Fig.1 Gas chromatogram of control solution(A)and sample solution(B)

2．3 线性关系及检出限

精密量取对照品贮备液 0．2、0．5、1、2、5、10 mL，分别置50 mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。分别精密量取5 mL，置20 mL顶空瓶中，密封。按“2．2”项下色谱条件测定，以各自测得的峰面积为纵坐标(A)，浓度为横坐标(c)进行线性回归。取对照品溶液，采用逐步稀释法，按上述色谱条件测定，检测限以S/N=3计算。结果见表1。

表1 回归方程与线性范围Table 1 Regression equation and linear range

2．4 精密度试验

取“2．1”项下对照品溶液6份，照“2．2”项下色谱条件，分别进样，计算相对标准偏差(RSD)。结果乙醇、哌啶、吡啶的 RSD 分别为 0．8%、1．1%、1.4%。

2．5 回收率试验

精密称取阿魏酸钠原药0．20 g，置20 mL顶空瓶中，分别加入低(80%)、中(100%)、高(120%)浓度的对照品溶液5 mL，各3份，共9份，按“2．2”项下色谱条件，计算得乙醇、哌啶、吡啶的平均回收率分别为 99．3%、100．1%、99．5%;RSD分别为0.9%、0．5%、0．7%。

2．6 样品测定

分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各5 mL，置20 mL顶空瓶中，按“2．2”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，以外标法按峰面积计算各有机溶剂残留量。结果，批号0911014和0912018检出了乙醇，含量分别为0．04%和0．03%;批号0908012均未检出。

3 讨论

3．1 色谱柱选择

本品需控制的乙醇、哌啶、吡啶3种有机溶剂均为极性溶剂，按照相似相溶的原理，考察了DB-624、DB-WAX、DB-1、DB-1701不同极性毛细管色谱柱。结果显示，中等极性色谱柱DB-624对这3种有机溶剂峰形和分离效果均最佳。

3．2 柱温选择

通过对升温程序的比较发现，本实验采用程度升温时，对乙醇、哌啶、吡啶分离良好，峰形较好。

3．3 进样方式的选择

顶空进样方式较之液体样品直接进样具有诸多优点，尤其是它避免了大体积溶剂进入色谱柱导致的柱降解和共流出。

3．4 有机溶剂限度

乙醇、哌啶、吡啶均为合成过程中引入的有机溶剂。根据“药品注册的国际技术要求(ICH)［3］”和《中国药典》(2010年版二部)［4］关于药品中有机溶剂残留量指导原则的规定，乙醇为第三类溶剂，吡啶为第二类(应限制使用)溶剂，哌啶为管制毒性药品，应按药品生产品质量管理规范(GMP)或其他质量要求加以限制使用，即指导原则规定，乙醇限量应为0．5%，吡啶为0．02%。本次研究的样品中，仅检出了部分乙醇残留，但所测结果均在药典规定的范围内。

本实验方法简便、快捷，灵敏度高，结果准确。适用于阿魏酸钠中有机溶剂残留量的检测。

1 Ruan Q(阮琴)，He XX(何新霞)，Hu YY(胡燕月)，et al．Ferulic acid and ligustrazine from Rhizome of Szechuan Lovage effect on nervous system ofmice．Chin JHospital Pharm(中国医院药学杂志)，2007，27:1087-1090．

2 Zhang YP(张延萍)，Zhou DJ(周冬菊)，Wang XS(王新胜)，et al．Studies on ferulic acid effect component from Rhizome of Szechuan Lovage inhibiting tyrosinase activity．Chin JHospital Pharm(中国医院药学杂志)，2010，30:1111-1113．

3 Zhang HJ(周海钧)translate．The International Technical Requirements of Drug Registration·Quality Section(药品注册的国际技术要求·质量部分)．Beijing:People Hygiene Press，2001．343．

4 Chinese Pharmacopoeia Commission(国家药典委员会)．Pharmacopoeia of the People’s Republic of China(中华人民共和国药典)．Beijing:China Medical Science Press，2010．Vol II，Appendix 63．