斑嘴鸭采精技术及精液品质研究

韩卫杰　黄晓凤　刘晓华

摘要：以人工养殖的斑嘴鸭（Anas poecilorhyncha）为研究对象，建立适于斑嘴鸭的人工采精技术，通过感官评定和显微镜镜检，对斑嘴鸭精液品质进行评价，并对其精液稀释液进行筛选。结果表明，斑嘴鸭的人工采精可采用背腹式按摩法，采精成功率可达80%以上。斑嘴鸭精液呈乳白色，采精量约0.08 mL，精子密度约8.0亿个/mL，活力0.7。1号稀释液的精子有效存活时间、生存指数及总存活时间优于其他稀释液（P<0.05）。

关键词：斑嘴鸭（Anas poecilorhyncha）；人工采精；精液品质

中图分类号：S864.3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）07-1610-03

斑嘴鸭（Anas poecilorhyncha）又名谷鸭、黄嘴尖鸭、火燎鸭，属雁形目鸭科鸭属，其肉质鲜美、营养丰富、野味浓郁，且有一定的保健功效，受到广大消费者的青睐，是集食用、保健和观赏于一体的经济鸟类。2000年斑嘴鸭被中国列入“三有”动物名录。近年来，由于过度猎取，加之生境条件恶化，野生斑嘴鸭种群数量日趋减少[1]。为了缓减野生斑嘴鸭的保护压力、开辟农村致富新途径，斑嘴鸭人工养殖得到政府的扶持，在中国快速发展起来，已成为农村产业结构调整、农民快速致富的重要途径之一。

目前，斑嘴鸭的人工养殖管理粗放、培育程度低，所养殖群体的优良性状需要进一步选育。另外，由于斑嘴鸭是家鸭的祖先之一[2，3]，可利用其脂肪沉积少、肉质细嫩、抗病力强等特点对家鸭品种进行改良[4]。但斑嘴鸭与家鸭体型差异过大、自然交配存在一定困难是制约其杂交利用的技术瓶颈。为充分发挥优秀斑嘴鸭个体的遗传优势，加快斑嘴鸭良种选育及杂交利用，本试验对斑嘴鸭人工采精技术及精液稀释液进行研究，以期为斑嘴鸭优良性状基因利用奠定技术基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物及日粮 10只成年健康雄性斑嘴鸭由江西省林业科学院野生动物驯养繁育基地提供，平均体重1 100 g。供试斑嘴鸭采取地面平养，与雌性隔离；自由采食、饮水；日粮采用全价颗粒饲料，含粗蛋白16%，消化能10.8 MJ/kg。

1.1.2 试验仪器及试剂 生物显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、试管、精密试纸（pH 5.5～9.0）、血球计数器、移液器、纱布、氯化钠、葡萄糖、果糖、谷氨酸钠、醋酸钠、柠檬酸钠、氯化镁、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠。

1.2 方法

1.2.1 斑嘴鸭人工采精 根据目前禽类常用的人工采精技术，在电刺激采精法和背腹式按摩采精法的基础上探索适合斑嘴鸭的采精技术和方法。

1.2.2 精液品质检测评定方法 采用感官评定和显微镜检查对精液品质进行评定。感官评定指标主要有采精量、色泽、气味等。显微镜检查主要确定精子活力和精子密度，精子活力检查方法采用0～1.0的10级评分法，即滴1滴精液于载玻片上，盖上盖玻片置于显微镜下，观察做直线运动的精子所占的比例，确定活力。精子密度评定方法为取10 μL精液缓慢注入含1.99 mL 3%NaCl的溶液中，摇匀，静置2 h以杀死精子，随后取1滴稀释均匀的精液于血细胞计数板的计数室边缘静置2 min后镜检，统计精子数，计算精子密度。精液pH用精密试纸测定。

1.2.3 精液稀释液筛选试验 采用已报道的家禽精液常用稀释液配方[5-7]，将不同稀释液与精液按2∶1比例稀释，在室温下保存，每2 h进行一次镜检，记录精子总存活时间、有效存活时间并计算精子生存指数。所用稀释液的配方见表1。

有效存活时间：精子活力在0.5以上的维持时间[8]。

精子生存指数=t1×[（m1+m2）/2]+t2×[（m2+m3）/2]+…+tn×[（mn+mn+1）/2]，式中t为2次检查的间隔时间，m为检查时精子活力。

1.3 数据处理与统计分析

数据分析处理采用SPSS 16.0进行单因素方差分析，利用LSD法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 斑嘴鸭采精技术

进行人工采精的斑嘴鸭应具备体格健壮、羽毛鲜亮整洁、性反射良好等特征，与雌性斑嘴鸭隔离饲养。采精前2 h应停止喂食，并清除泄殖腔附近的羽毛，以防止污染精液。

采精过程由一人完成。采精时，采精员坐在凳子上，将公鸭放于膝上，头向下，用双腿对公鸭进行固定，用右手固定公鸭双脚，右手中指与无名指之间夹住集精管，管口向外。左手掌心向下紧贴公鸭背腰部，并向尾部方向抚摸20～30次，同时用右手轻轻挤压其腹部。公鸭泄殖腔出现性反射，生殖器将要外翻时，左手向外压尾羽，用食指和拇指挤压泄殖腔基部；同时也用右手食指和拇指挤压泄殖腔基部，使生殖器外翻。再挤压数次后可见乳白色精液流出，此时用右手所夹的集精管收集精液。采精完成后将斑嘴鸭放回。

斑嘴鸭经2周人工采精的调教能够形成良好的性反射。利用上述采精技术，可一个人完成斑嘴鸭采精过程，每次采精用时大约3 min左右，采精成功率达80%以上，大大提高了工作效率。采精后斑嘴鸭恢复良好，未见异常反应。采精频率以2次/周为宜，每次间隔3～4 d。

2.2 斑嘴鸭精液感官评定和精液生理指标

2012年4月中旬至5月中旬，对10只斑嘴鸭进行了总计60次的背腹式按摩法采精，每只每次采精时间约2～3 min，采精成功率达80%以上。斑嘴鸭精液呈乳白色，采精量介于0.05～0.12 mL之间，平均为0.08 mL。精子密度为6.0亿～10.0亿个/mL，平均为8.0亿个/mL，活力0.7级以上。精液pH为6～7，偏酸性。

2.3 斑嘴鸭精液稀释液的筛选结果

将经过镜检精子活力在0.9以上的斑嘴鸭精液与稀释液按1∶2比例稀释，常温保存。记录精液被不同稀释液处理后的有效存活时间、生存指数及总存活时间，结果见表2。由表2可见，经不同稀释液稀释处理后的精子有效存活时间、总存活时间和生存指数也不尽相同。1号稀释液在有效存活时间、生存指数和总存活时间方面优于其他稀释液；6号稀释液处理效果次之，其他稀释液只能在短时间内保存精液。

3 讨论

3.1 斑嘴鸭采精技术

鸟类的人工授精是从家禽养殖业发展起来的。家禽的人工授精技术经改进后在金雕、鸵鸟、草原隼、苍鹰、波斑鸨、角雉、褐马鸡等非家禽鸟类得到广泛应用。目前，鸟类的人工采精方法主要有按摩法、电刺激法、假阴道法和顺应法，其中按摩法最为常用[9]。

关于斑嘴鸭人工授精技术的研究迄今尚未见相关报道。本研究尝试使用电刺激法和人工按摩法对斑嘴鸭进行人工采精。成年雄性斑嘴鸭个体较小，体重约1 kg左右。采用电刺激法时，需要将电极棒由泄殖腔插入，但由于其生殖器相对较小，插入的电极棒对生殖器充血外翻有一定的阻碍作用，致使采精效果不理想。在采用按摩法采精时，由于斑嘴鸭个体较小，采精人员容易固定，采精成功率较高。人工养殖的雄性经2周左右调教后，可形成良好的性反射，采精成功率可达80%以上。另外，由于鸟类的尿酸呈白色，在采精时要注意与精液区分，防止污染。

3.2 斑嘴鸭精液稀释液的筛选

精液稀释液主要用于扩大精液容量和为精子提供营养物质。精液稀释液的种类很多，不同的稀释液保存精子的效果也不尽相同。配制精液稀释液常用的试剂有氯化钠、葡萄糖、蔗糖、果糖、谷氨酸钠、柠檬酸钠等[10]。

本试验以已报道的家禽精液稀释液作为参考，配制了6种精液稀释液，进行斑嘴鸭精液保存试验。在精子活力和有效存活时间方面，1号稀释液最好，6号次之。这与稀释液的组成成分有较大关系。1号和6号稀释液中含有葡萄糖和果糖等营养成分，可为精子活动提供能量；并且其中的缓冲成分可有效缓解因精子进行无氧酵解引起的pH变化，维持总体环境稳定，有利于精子存活。2号稀释液同样包含营养和缓冲物质，但配制后经高压高温消毒易出现颜色变黄，溶质改变，精液保存效果不理想。其他稀释液因溶质种类使用较少，易于配制，可用于短时间内的精液保存。

参考文献：

[1] 韩卫杰，刘晓华，黄晓凤，等.斑嘴鸭生长规律研究[J].黑龙江畜牧兽医，2011（12）：4-6.

[2] 苏 瑛，刘 宁，曹五七，等.鸭mtDNA控制区遗传变异与进化研究[J].中国家禽，2008，30（23）：29-32.

[3] 李慧芳，朱文奇，杨 宁，等.家鸭、媒鸭和野鸭mtDNA D-loop区的遗传变异[J].畜牧兽医学报，2011，42（9）：1213-1219.

[4] 李助南，唐登华，程泽信.绿头野鸭与樱桃谷鸭杂交效果的观测[J].湖北农业科学，2007，46（2）：276-278.

[5] 张兆旺，张进邦.鸡精液稀释液筛选试验[J].甘肃农业大学学报，1992，27（4）：333-338.

[6] 陈元明，廖纪朝，黄美玉，等.鸡精液稀释保存技术的研究[J].中国农业科学，1987，20（6）：52-57.

[7] 黄仁术.低温下基于Lakes液的皖西白鹅精液稀释液研究[J].畜牧与兽医，2009，41（3）：62-64.

[8] 安芳兰，杨保田，张兆旺，等.磁场对低温保存鸡精液品质的影响[J].安徽农业科学，2009，37（6）：2504-2505.

[9] 张雁云.鸟类的人工授精[A].中国鸟类学研究—第四届海峡两岸鸟类学术研讨会文集[C]，昆明：中国动物学会，2000.

[10] 权 凯，黄炎坤.鸡精液稀释液研究进展[J].养禽与禽病防治，2006（2）：4-5.