星毛冠盖藤不同药用部位的高效液相色谱分析

李咏梅　余朋桂　肖冰梅

【摘要】 目的：建立星毛冠盖藤药用部位高效液相等度洗脱方法，比较不同药用部位的差异性。方法：星毛冠盖藤不同药用部位70%乙醇提取，使用不同比例甲醇和乙腈系统等度洗脱，C18色谱柱（4.6mm x250mm，5μm）；流速：0.8ml/min；进样量：10μl；检测波长：254nm；柱温：25℃。结果：甲醇-水（40：60）系统对药用各部位均具有较好的分离效果；不同药用部位化学成分差异性较大。仅茎枝含有芦丁。结论：芦丁的分布部位与民间习惯应用星毛冠盖藤地上部分较为相符。为其活性成分的进一步研究和临床用药提供了科学依据。

【关键词】 星毛冠盖藤；药用部位；高效液相

【中图分类号】R282.5 【文献标志码】A 【文章编号】1007—8517（2013）18—0017—03

星毛冠盖藤（Pileostegia tomentella Hand.Mazz）是土家族常用药，全年可采。具有祛风除湿，散瘀止痛，接骨的功效，临床常应于腰腿酸痛、风湿麻木，外用治跌打损伤、骨折、外伤出血。浙江、江西、湖南、湖北、四川、贵州、广东、台湾等地分布较广，资源蕴藏量丰富。但其在应用时随意性较强，根、茎、花和叶可分别入药，亦可全株入药，直接影响到疗效的可靠性与稳定性。应用HPLC法对星毛冠盖藤不同药用部位进行分析，以期了解其不同药用部位化学成分的差异性，从而为临床用药选择位及其化学成分研究提供可靠的实验依据。

1 仪器与材料

Lc-10AT液相色谱（日本岛津）；C18色谱柱4.6mm×250mm，51μm（依利特）。甲醇、乙腈为色谱纯；水为纯净水，其余试剂为分析纯。芦丁购自上海源叶生物科技有限公司。星毛冠盖藤采自湖南怀化，经笔者鉴定为虎耳草科冠盖藤属星毛冠盖藤Pileostegia tomentella Hand.Mazz。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备取过50目筛的各药用部位粉末10g，置于100ml的圆底烧瓶中。依次加入70%的乙醇100ml、50ml，在90℃恒温水浴分别回流1.5h、1h。过滤，合并虑液。精密移取滤液1ml，用70%乙醇定容于10ml容量瓶中。微孔滤膜过滤，滤液为样品溶液。精密称取芦丁，配制成浓度为0.1mg/ml对照品溶液。

2.2 黄酮类化合物鉴别取过50目筛的药材全株粉末。按“2.1”项下方法提取后过滤。滤液与盐酸-镁粉反应颜色泡沫处呈紫红色，与醋酸铅反应生成浅黄色沉淀，与NaOH溶液反应呈黄色，加盐酸后颜色褪去。

2.3 色谱条件 分别以甲醇-水（10：90）、甲醇-水（20：80）、甲醇-水（30：70）、甲醇-水（40：60）、甲醇-水（50：50）、乙腈-水（10：90）、乙腈-水（20：80）为流动相。在流速为O.8mL/min，波长为254nm，进样量为10μl，柱温为室温条件下洗脱90min。乙腈-水系统得到的色谱图谱出峰数目少且保留时间短，不适合于星毛冠盖藤。甲醇-水系统以甲醇-水（40：60）的分离效果较好，出峰数目较多。在保留时间33min后无峰再出现。

因此选择甲醇-水（40：60）作为本实验的流动相，洗脱时间为40min。在此条件下根、茎、叶和枝的高效液相图谱见图15；芦丁与各部分峰的数目、保留时间、峰面积和峰面积百分比见表1-5所示。

3 分析与讨论

在进行高效液相等度洗脱分析时，甲醇-水（40：60）对药用各部位均具有较好的分离效果。在色谱条件下，根有四个峰，茎有十二个峰，枝有六个峰，叶有六个峰。茎和叶在29.541min与29.542min处各有一个峰保留时间接近，可视为同一类物质，但对峰面积及其百分比相比较，该物质在茎和叶的含量和所占比重有很大差异。枝和根在此保留时间附近内无峰出现，说明不含有此成分。从各部分峰的保留时间间隔分析，根、茎较枝、叶均匀，表明枝与叶所含化合物的物理或化学性质差异性较大，可能和根、茎與枝、叶之间新陈代谢的差异性有关系。各药用部位在6.500-6.550min、7.217-7.285min两区间均有且只有一个峰出现。反映了各药用部位化学成分的个性与共性关系，亦为在临床使用时是否区分药用部位研究提供了可靠的实验基础。

黄酮类化合物是中药中常见的一类有效成分，具有多种生物活性。如葛根总酮、葛根素和银杏叶总黄酮等具有扩张冠状血管的作用，临床用于治疗冠心病。芦丁、橙皮苷等具有降低毛细血管脆性和异常通透性作用，可用做毛细血管出血的止血药和治疗高血压的辅助药。实验证实，星毛冠盖藤中含有黄酮类化合物，茎与枝含有芦丁，为后续的开发利用及活性成分的深入研究提供科学的参考依据。

参考文献

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[2]赵运林，喻勋林，傅晓华.湖南药用植物资源[M].长沙：湖南科学技术出版社，2009：446—447.

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（收稿日期：2013.07.13）