孕酮对脑损伤后脑组织PGE2表达的影响

司道文　杨鹏　郭艳华　孙敬宇　赵金芝　罗晓燕　程勇　栗占营　李云

【摘要】目的：观察孕酮对大鼠脑损伤PGE2表达的影响。方法：雄性SD大鼠制作脑损伤模型，免疫组织化学法观察脑组织PGE2的表达变化。结果：脑损伤组大鼠皮质PGE2阳性细胞数显著增加，孕酮治疗组PGE2表达明显减少，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：孕酮可降低脑损伤后PGE2的表达。

【关键词】孕酮；脑损伤；前列腺素

【中图分类号】R453【文献标识码】A【文章编号】1004-4949（2013）09-217-01

孕酮（Progesterone，PROG）是一种妇科用药，近年来发现具有的脑保护药物[1-2]，但是作用机制尚不明确。由于脑损伤后炎症反应是引起继发性损伤的重要因素；而且炎症反应中环氧化酶（COX-2）代谢产物前列腺素（PGE2）是重要的炎症因子，孕酮对脑损伤后PGE2的表达变化报道较少。因此，本实验利用免疫组织化学方法检测大鼠脑组织PGE2表达，探讨孕酮对脑损伤的保护作用。

1 材料和方法

1.1 材料：健康雄性SD大鼠36只，体质量280～300g（购自北京维通利华实验动物技术有限公司），随机分为假手术组、脑损伤组和孕酮治疗组，每组12只。孕酮注射液（天津金耀氨基酸有限公司），兔抗人PGE2多克隆抗体（美国Cayman公司），免疫组织化学试剂盒 （福州迈新生物）。

1.2 方法

1.2.1 动物模型：采用Feeney's自由落体硬脑膜外撞击方法建立模型。大鼠10%水合氯醛腹腔麻醉，在矢状缝后1.5mm，中线旁2.5mm处打开一直径5mm骨窗，用40g的击锤从25cm 处自由坠落冲击撞杆造成脑损伤。假手术组开同样大小骨窗而不造成脑挫伤。孕酮治疗组伤后1h、6h腹腔注射孕酮16mg/kg。假手术组和脑损伤组在相同时相腹腔注射等量生理盐水。

1.2.2 免疫组织化学检测：于伤后24小时，对大鼠脑组织取材固定切片。免疫组化检测按照试剂盒说明进行操作。

1.3 统计学处理：所有数据用x±s表示，采用SPSS16.0统计软件进行数据统计处理，各组间比较采用方差分析，P< 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

假手术组大鼠皮质偶见PGE2表达（3.4±0.28）。脑损伤组伤灶周围皮质可见大量PGE2阳性细胞的表达（46.2±2.76）；而孕酮治疗组脑损伤周围皮质PGE2阳性细胞显著减少（31.5±2.17），与脑损伤组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。

3 讨论

脑损伤致残率和致死率高，而脑损伤后炎症反应对继发性损伤具有重要作用。脑损伤后，通过胶质细胞增生，巨噬细胞和中性粒细胞浸润，激活炎性因子如TNF-α、IL-6、iNOS和COX-2等释放，从而诱发和加重脑损伤。前期实验已经证实孕酮可以抑制脑损伤后炎性因子iNOS和COX-2的表达，减轻炎症反应过程[3]。本实验进一步检测COX-2的反应产物前列腺素PGE2在脑组织中的表达变化。结果显示，脑损伤24h脑组织中PGE2含量明显升高；孕酮干预后，明显减低脑组织PGE2的表达，提示孕酮可能通过抑制PGE2的表达降低脑内炎症反应。

在具体机制方面，孕酮通过减轻脑水肿、保护血脑屏障、抑制脂质过氧化反应、减少自由基的产生、减轻钙超载、抑制兴奋性神经递质的释放、抑制炎症反应等多种生物学作用，发挥神经保护作用[2]。而且，孕酮可保护发育的胎儿免遭氧化应激和免疫炎症的侵害，在神经元-胶质通讯和正常神经元发育中起关键性作用；因此可以设想孕酮在成人中枢神经元损伤修复中，许多过程实际重复了胚胎发育的关键步骤，从另一个角度提示孕酮脑保护作用[1]。本实验从孕酮抑制脑损伤后炎症反应方面，也证实了孕酮具有脑保护功能。另外，孕酮有较宽的治疗窗，能够迅速通过血脑屏障，具有使用方便、安全、价格低廉等特点，使得孕酮治疗脑损伤成为可能。

参考文献

[1] Stein DG. Progesterone exerts neuroprotective effects after brain injury. Brain Res Rev，2008，57（2）：386-97.

[2] Feeser VR，Loria RM. Modulation of traumatic brain injury using progesterone and the role of glial cells on its neuroprotective actions. J Neuroimmunol，2011，237（1-2）：4-12.

[3] 司道文，王茜，张廷才，等. 孕酮对大鼠脑损伤后大脑皮质及海马CA1区环氧合酶-2和诱导型一氧化氮合酶表达的影响[J]. 解剖学杂志，2010，33（4）：488-491.