牛膝多糖对草鱼免疫和抗氧化功能的影响

王红权唐德约赵玉蓉王小娜金柏涛张 凯肖调义

(1.湖南农业大学动物科学技术学院, 长沙 410128; 2.大通湖天泓渔业股份有限公司, 益阳 413207)

牛膝多糖对草鱼免疫和抗氧化功能的影响

王红权1唐德约1赵玉蓉1王小娜1金柏涛1张 凯2肖调义1

(1.湖南农业大学动物科学技术学院, 长沙 410128; 2.大通湖天泓渔业股份有限公司, 益阳 413207)

为探讨在饲料中添加牛膝多糖(ABP)对草鱼免疫和抗氧化功能的影响, 选取平均体重(88.13±0.76) g的健康草鱼375尾, 随机分成5个处理, 即基础饲料组、0.05 %、0.10 %、0.20 %、0.40 % ABP添加组, 每个处理3个重复, 每个重复25尾鱼, 饲养65 d。结果表明, 在饲料中添加ABP对草鱼头肾体指数影响不显著(P>0.05), 对脾体指数影响显著(P<0.05), 与对照组相比, 0.05 %、0.10 %、0.20 %和0.40%添加组脾体指数分别增加6.29% (P>0.05)、28.00% (P<0.05)、9.14%(P>0.05)和13.14% (P>0.05); 血液中NBT阳性细胞数随着ABP添加量的增加呈增加的趋势, 但各组间差异不显著(P>0.05); 在饲料中添加ABP对草鱼血清白蛋白、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)含量和过氧化氢酶活影响不显著(P>0.05), 显著影响草鱼血清总蛋白(TP)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LZM)、α-肿瘤坏死因子(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量(P<0.05)。与对照组相比, 0.40%添加组的TP和AKP分别增加24.64% (P<0.05)和33.56% (P<0.05); 0.20 %、0.40 %添加组的LZM活力分别增加34.97% (P<0.05)和31.21% (P<0.05), SOD活力分别增加27.28% (P<0.05)和22.41% (P<0.05); 饲料中随着ABP添加剂量的增加, 各组血清ACP活性先增加后缓慢下降, MDA含量先下降后上升。与对照组相比, 0.20%、0.40 %添加组ACP活性分别增加15.33% (P<0.05)和11.10% (P<0.05), 0.05%、0.10 %、0.20 %及0.40%添加组MDA含量分别下降11.97% (P>0.05)、21.33% (P<0.05)、32.37% (P<0.05)和2.53% (P>0.05)。饲料中随着ABP添加量的增加, 各组草鱼血清TNF-α含量变化规律不明显, 但与对照组相比, 0.20%添加组TNF-α含量显著增加(P<0.05)。综上所述, 在草鱼基础日粮中添加适量牛膝多糖可以提高草鱼的免疫和抗氧化能力, 建议添加量为0.20%。

草鱼; 牛膝多糖; 免疫功能; 抗氧化功能

现代高密度集约化养殖模式和生态环境的日趋恶化导致水产养殖动物病害滋生、养殖效益下降,严重阻碍了水产养殖业的健康发展, 通过提高水产动物免疫力来抵抗疾病的发生已成为目前研究的热点。牛膝多糖(Achyranthes bidentata polysaccharide, ABP)是从苋科植物牛膝根中提取出的一种水溶性多糖。目前的研究结果显示, ABP具有提高仔猪生长性能, 改善猪肉品质, 提高机体免疫功能[1,2], 抗肿瘤[3]、降糖和保护肾脏[4,5]、抗炎[6]、抗凝血[7]、保肝[8]、治疗哮喘[9]、抗衰老、抗氧化[10]、调节肠道微生态[11]等生理活性, 但这些研究主要集中在小鼠等试验动物、畜禽或体外, 在水产动物营养与免疫领域的研究尚属空白。因此, 本试验以草鱼为研究对象, 在其基础日粮中添加不同质量的ABP, 以期探讨ABP对草鱼免疫和抗氧化功能的影响, 为其在水产饲料中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

牛膝多糖(是牛膝根的醇沉水提物, 经测定多糖含量为50%), 购自南京泽朗医药科技有限公司。

草鱼, 由大通湖天泓渔业股份有限公司渔场提供。

试验饲料, 根据草鱼配合饲料营养标准(SC/T 1024-1997)配制基础饲料, 其配方及营养成分见表1。试验饲料为分别在基础饲料中添加0%、0.05 %、0.10 %、0.20 %、0.40 %的牛膝多糖。所有饲料原料先粉碎至全部通过0.43 mm的筛, 然后按配方混合均匀, 制成直径为2.0 mm的硬颗粒。

1.2 试验设计

采用单因子试验设计, 根据日粮处理因素不同,设5个处理, 即基础饲料组、0.05 %、0.10 %、0.20 %、0.40 % ABP添加组。选取平均体重(88.13±0.76) g的健康草鱼375尾, 随机分入5个处理, 每个处理设三个重复, 每个重复放养25尾鱼。

1.3 饲养管理

试验前, 将所有试验用鱼集中驯养10d, 待其适应试验环境和试验饲料。试验开始时将鱼称重分组, 根据体重调整至各组间差异不显著(P>0.05),分别饲养于1 m×1 m×1 m网箱中, 为期65d。分别于每日上午8: 00和下午4: 00进行投喂, 日投喂量为鱼体重的2%—4%, 观察并记录试验鱼的摄食及活动状况。试验期间, 不定期对网箱进行清洗, 尽量排除外界因素对试验结果的干扰。

1.4 样品采集和指标测定

饲养试验结束后, 停食24 h, 以网箱为单位称重, 然后每箱随机取接近平均体重的鱼3尾, 丁香油麻醉后尾静脉采血。血液分为两部分, 一部分用肝素钠抗凝, 用于四唑氮蓝(Nitroblue tetrazolium, NBT)阳性细胞数的测定; 另一部分4℃冰箱静置2 h, 3 000 r/min离心30 min, 吸取上层血清于−80℃冰箱保存备用。然后分别于冰盘上解剖, 分离其脾脏、头肾, 用4℃、0.65%生理盐水洗去血液, 滤纸吸干水分, 称重, 计算头肾体指数和脾体指数。

头肾体指数(Head Kidney Somatic Index, HKSI) (‰)=(头肾湿重/鱼体重)×1000

脾体指数(Spleen Somatic Index, SSI)(‰)=(脾脏湿重/鱼体重)×1000

NBT阳性细胞数的测定, 参照Anderson, et al.[12]的方法: 每尾鱼观察计数6个视野, 取其平均值作为结果, 每处理检测6尾鱼。

溶菌酶 (Lysozyme, LZM) 活力的测定, 参见吴旋[13]的测定方法。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)活性采用邻苯三酚自氧化法测定、丙二醛(Malondialdehyde, MDA)含量采用硫代巴比妥酸法测定、过氧化氢酶(Catalase, CAT)活性采用紫外吸收法测定、酸性磷酸酶(Acid phosphatase, ACP)活性采用化学比色法测定, 其试剂盒均购自南京建成生物工程研究所; 总蛋白(Total protein, TP)、白蛋白(Albumin, ALB)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AKP)试剂盒购自深圳迈瑞生化试剂公司,借助BS-200全自动生化分析仪测定; α-肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素-1(Interleukin-1, IL-1)、白介素-6(Interleukin-6, IL-6)放射免疫分析药盒购自北京华英生物研究所, 用GC-1200γ放射免疫计数器测定。

1.5 数据统计分析

采用SAS(V8)统计软件进行单因子方差分析,经单因子方差分析差异显著的再利用LSD法进行多重比较, 所有数据均以“平均值±标准差”表示。

表1 基础饲料配方及营养成分(风干基础, %)Tab.1 Formulation and nutrition composition of the basal diet(Air-dry basis, %)

2 结果

2.1 牛膝多糖对草鱼头肾和脾脏体指数的影响

统计分析结果表明(表2), 在饲料中添加牛膝多糖对草鱼头肾体指数影响不显著(P>0.05), 对草鱼脾体指数有显著的影响(P<0.05), 与对照组相比, 0.05 %、0.10 %、0.20 %、0.40 % ABP添加组草鱼的脾体指数分别增加6.29%(P>0.05)、28.00%(P< 0.05)、9.14%(P>0.05)和13.14%(P>0.05)。

2.2 牛膝多糖对草鱼血液NBT阳性细胞数的影响

统计分析结果表明(表3), 草鱼血液中NBT阳性细胞数随着牛膝多糖添加量的增加呈增加的趋势,但各组间差异不显著(P>0.05)。

2.3 牛膝多糖对草鱼血清免疫指标和抗氧化指标的影响

统计分析结果表明(表4), 饲料中添加ABP对草鱼血清白蛋白、IL-1、IL-6含量和过氧化氢酶活影响不显著(P>0.05), 对草鱼血清TP、AKP、ACP、LZM、TNF-α、SOD及MDA含量影响显著(P<0.05)。与对照组相比, 0.40 %添加组的TP和AKP显著升高(P<0.05), 分别增加24.64%和33.56%; 饲料中随着ABP添加剂量的增加, 各组血清ACP活性先增加后缓慢下降, 与对照组相比, 0.20%、0.40%添加组的ACP分别增加15.33%(P<0.05)和11.10%(P<0.05);饲料中添加0.20%、0.40%ABP显著增加草鱼血清LZM和SOD活力(P<0.05), 与对照组相比, LZM活力分别增加34.97%(P<0.05)和31.21(P<0.05), SOD活力分别增加27.28%(P<0.05)和22.41%(P<0.05);随着饲料中ABP添加量的增加, 各组血清MDA含量先下降后上升, 与对照组相比, 0.05%、0.10%、0.20%及0.40%添加组草鱼血清MDA含量分别下降11.97%(P>0.05)、21.33%(P<0.05)、32.37%(P<0.05)和2.53%(P>0.05)。随着饲料中ABP添加量的增加, 各组草鱼血清TNF-α含量变化规律不明显, 但0.20%添加组TNF-α含量显著高于对照组(P<0.05), 比对照组增加20.62%, 其他各组间TNF-α含量差异不显著。

表2 牛膝多糖对草鱼免疫器官指数的影响Tab.2 Effects of ABP on immune organs index of grass carp (‰)

表3 牛膝多糖对草鱼血液NBT阳性细胞数量的影响Tab.3 Effects of ABP on NBT positive-cells in blood of grass carp

表4 牛膝多糖对草鱼血清免疫指标和抗氧化指标的影响Tab.4 Effects of ABP on serum immune and antioxidant indexes of grass carp

3 讨论

头肾和脾脏是水产动物重要的免疫器官, 在免疫细胞生成和免疫应答反应中起重要作用。朴香淑等[14]研究认为中草药免疫促进剂可以加速免疫组织细胞的增殖、分化和成熟, 从而升高鱼类或其他动物的免疫器官重量, 增强机体免疫能力。刘红柏等[15]研究表明, 茯苓多糖能显著增加鲤鱼的脾体指数;林旋等[16]在基础日粮中添加黄芪多糖, 结果显示鱼体免疫器官指数都有相应程度地提高。本试验结果表明, 饲料中添加牛膝多糖对草鱼的头肾体指数影响不显著(P>0.05), 但能增加其脾体指数, 并且在0.10%添加时达到显著水平(P<0.05)。这说明饲料中添加适量的牛膝多糖可以促进草鱼免疫器官的生长发育, 从而增强其机体的免疫能力。

血液学指标是动物体生理学、病理学以及毒理学的重要指标, 常用来评价鱼类健康、营养及对环境的适应。血清中的ALB和TP含量是机体吸收、合成及分解蛋白质营养状况的标志性反映, 也是机体免疫水平的反映[17]。溶菌酶在引发和维持机体防御免疫的过程中起着重要的作用, 在机体免疫过程中除了溶解细菌细胞壁外, 还可诱导和调节其他免疫因子的合成与分泌[18]。酸性磷酸酶是溶酶体酶系的标志酶, 直接作用于磷酸基团的转移, 参与能量转化和信号传导等, 有利于磷酸二腺苷和磷酸三腺苷的合成, 进而提高机体非特异性免疫水平和营养代谢水平[19]; 碱性磷酸酶是一种在碱性条件下具有较高活力的膜结合酶, 也是溶酶体的一部分, 在碱性介质中可通过水解作用将表面带有磷酸酯的异物破坏降解, 其活力高低与动物的生长速度与生产性能密切相关[20]。本研究结果表明, 在草鱼饲料中添加适量的牛膝多糖, 可以有效地提高草鱼血清TP含量和LZM、ACP、AKP活力, 其中TP含量在牛膝多糖添加量为0.40%时最高; LZM活力在牛膝多糖添加量为0.20%和0.40%时显著高于对照组; ACP活力在牛膝多糖添加量为0.20%时效果最为显著, AKP活力在添加量为0.40%时效果最为显著。陈清华[1]研究也表明, 断奶仔猪日粮中添加适宜水平的牛膝多糖能显著提高仔猪血清AKP活力。这说明适宜的牛膝多糖可以通过显著升高草鱼血清TP含量,提高草鱼血清LZM、ACP、AKP活力来提高其非特异性免疫能力。

TNF-α是一种重要的免疫调节因子, 主要由淋巴细胞和巨噬细胞分泌, 能激活巨噬细胞与中性粒细胞, 促进抗原活化和T、B淋巴细胞增殖分化, 促进某些细胞产生白细胞介素、干扰素以及TNF-α等细胞因子, 发挥重要的免疫促进作用[21]。IL-1和IL-6形成于免疫反应早期, 在机体免疫应激中起主导作用[22]。研究表明: 牛膝多糖及其衍生物能够显著诱导小鼠脾淋巴细胞产生IL-2和TNF-α, 极大地发挥其免疫促进作用[23]; 显著诱导单核巨噬细胞TNF-α和IL-6的表达[24]; 显著诱导断奶仔猪外周血及脾淋巴细胞TNF-α、IL-1β和IL-6的表达, 显著增加断奶仔猪血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量[25]。本研究结果表明, 在草鱼日粮中添加牛膝多糖并没有显著影响其血清中IL-1和IL-6的含量, 但饲料中ABP添加量为0.20%时, 受试草鱼血清TNF-α含量显著高于对照组。这说明饲料中添加适宜的牛膝多糖可通过促进动物细胞因子的表达来提高机体的特异性免疫, 从而增强机体的抗感染和抗病能力。

动物机体内存在一套完整有力的抗氧化系统,其中包括酶类和非酶类清除机制。酶类系统主要包括SOD, GSH-Px(谷胱甘肽过氧化物酶)和CAT等。SOD是机体内重要的抗氧化酶之一, 在清除自由基(如O2−、-OH 等)、防止生物分子损伤等方面具有十分重要的作用[26]。本研究结果表明, 饲料中牛膝多糖的添加量为0.20%和0.40%时, 草鱼血清的SOD总活力显著升高, 并且以0.20%添加时作用效果最为显著; 饲料中随着牛膝多糖添加水平的增加, 草鱼血清过氧化氢酶活力先增加后下降, 与对照组相比, 添加量为0.20%时效果达显著水平。MDA是脂质过氧化物反应的最终产物, 其含量的变化能准确地反映出机体抗氧化能力的变化, 且在一定程度内呈负相关[27]。本研究结果显示, 随着饲料中ABP添加量的增加, 各组草鱼血清MDA含量先下降后上升。与对照组相比, 添加量为0.20%时, 草鱼血清MDA含量降低的效果最为显著。这说明草鱼饲料中添加适宜水平的ABP可以提高草鱼的抗氧化功能,减轻自由基对机体的损伤。

4 结论

本研究结果表明, 在草鱼基础饲料中添加适量

的牛膝多糖, 可以促进草鱼免疫器官的生长发育,提高草鱼血清TP、TNF-α含量和AKP、ACP、LSZ、SOD及CAT酶活, 从而提高草鱼的免疫功能和抗氧化功能。推荐草鱼饲料中ABP的适宜添加水平为0.2%。

[1] Chen Q H.Study on the mechanism of nutrition and immunomodultion of Achyranthes bidentata polysaccharide in pigs [D].Thesis for Doctor of Agriculture.Hunan Agriculture University, Changsha.2000 [陈清华.牛膝多糖对猪的营养效应和免疫调控机理研究.博士学位论文, 湖南农业大学, 长沙.2008]

[2] Zhao Y R, Chen Q H, He J H, et al.The effect of Achyranthes bidentata polysaccharides on protegrin-1mRNA expression in weaned piglets [J].Chinese Journal of Animal Nutrition, 2008, 20(l): 80—84 [赵玉蓉, 陈清华, 贺建华, 等.牛膝多糖对断奶仔猪抗菌肽Protegrin-l mRNA表达的影响.动物营养学报, 2008, 20(l): 80—84]

[3] Ding J L.Studies on antiumor effect of Achyranthes bidentata polysaccharides [J].Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy, 2009, (13): 46—47, 115 [丁杰龙.川牛膝多糖的抗肿瘤作用初探.中国民族民间医药, 2009, (13): 46—47, 115]

[4] Luan H Y, Gao Y H, Zhao X L, et al.Protective effect of Achyranthes bidentata polysaccharides on diabetic kidney [J].Heilongjiang Medicine and Pharmac, 2008, 31(1): 56—57 [栾海燕, 高艳华, 赵晓莲, 等.牛膝多糖对糖尿病肾脏保护作用的研究.黑龙江医药学, 2008, 31(1): 56—57]

[5] Li J G, Yu A K, Liu X Z, et al.Protective effect of Achyranthes bidentata polysaccharides on diabetic mice induced by streptozocin [J].Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology, 2010, 24(1): 1—7

[6] Liu Y L, Guo G L, Wu Z F, et al.Effects of Achyranthes bidentata polysaccharide supplementation on blood biochemical parameters and white blood cell differential counts of weaned pigs after Escherichia coli lipopolysacchaeide challenge [J].China Feed, 2010, (2): 35—38, 41 [刘玉兰, 郭广伦, 吴志锋, 等.牛膝多糖对脂多糖免疫应激仔猪血液生化指标和白细胞分类计数的影响.中国饲料, 2010, (2): 35—38, 41]

[7] Mao P, Xia H L, Yuan X R, et al.The Experimental research on anticoagulant function of polysaccharides in Achyranthes bidentata [J].Lishizhen Medicine and Materia, 2000, 11(12): 1075—1077 [毛平, 夏卉莉, 袁秀荣, 等.怀牛膝多糖抗凝血作用实验研究.时珍国医国药, 2000, 11(12): 1075—1077]

[8] Xu X Y, Zhang Z X, Xin X M, et al.The protection of Achyranthes bidentata polysaccharides on immunological liver injury in mice [J].Journal of Taishan Medical College, 2010, 31(2): 97—99 [徐晓燕, 张志港, 辛晓明, 等.牛膝多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用.泰山医学院学报, 2010, 31(2): 97—99]

[9] Li C C, Ye L P , Su M S, et al.Effect of Achyranthes bidentata polysaccharides(ABPS) on signal transducer and activator of transcription 6 and its mRNA in a rat model of asthma [J].Chinese Journal of Applied Physiology, 2006, 22(2): 210—214 [李昌崇, 叶乐平, 苏苗赏, 等.牛膝多糖对哮喘大鼠信号转导子和转录激活子6表达的影响.中国应用生理学杂志, 2006, 22(2): 210—214]

[10] Liang Y X, Zhang W, Li D D, et al.The effects of Lycium barbarum polysaccharide and Achyranthes bidentata polysaccharide on cell senescence of 2BS induced by H2O2[J].Chinese Journal of New Drugs, 2004, 13(7): 599—602 [梁越欣, 张伟, 李电东, 等.枸杞多糖、牛膝多糖对H2O2诱导2BS细胞衰老的影响.中国新药杂志, 2004, 13(7): 599—602]

[11] Chen Q H, He J H, Liu Z Y.The effect of Achyranthes bidentata polysaccharides on intestinal microflora and mucous membrane of weaning piglets [J].Journal of Hunan Agricultural University (Natural Science), 2007, 33(6): 556—559 [陈清华, 贺建华, 刘祝英.牛膝多糖对仔猪肠道微生物及小肠黏膜形态的影响.湖南农业大学学报(自然科学版), 2007, 33(6): 556—559]

[12] Anderson D P, Morita Mo T, Grooth R.Neutrophil, glassadhere, nitroblue tetrazolium assay give early indication of immunization effectiveness in rainbow trout [J].Veterinary Immunology and Immunopatholog, 1992, 30(4): 419—429

[13] Wu X.Effects of four kinds of Chinese herbal polysaccharides on the growth performance, body composition, and part of physiological and biochemical indicator in yellow catfish (Pelteobagrus fulvidraco) [D].Thesis for Master of Agriculture.Tianjin Agriculture University, Tianjin.2011 [吴旋.四种中草药多糖对黄颡鱼生长、体成分及部分生理生化指标的影响.硕士学位论文, 天津农学院, 天津.2011]

[14] Piao X S, Shi B L, Li D F, et al.Effects of Powermix on growth microflora and immunity of broilers [J].China Feed, 2004, 2(11): 24—26 [朴香淑, 史彬林, 李德发, 等.保尔福对肉仔鸡生长、微生物菌群及免疫功能的影响.中国饲料, 2004, 2(11): 24—26]

[15] Liu H B, Zhang Y, Lu T Y, et al.Effects of five kinds of Chinese herbal medicine on the immunity of common carp Cyprynus carpio as additive in feed [J].Journal of Jimei University (Natural Science), 2004, 9(4): 317—321 [刘红柏,张颖, 卢彤岩, 等.饲料中添加中草药对鲤鱼免疫功能的影响.集美大学学报(自然科学版), 2004, 9(4): 317—321]

[16] Lin X, Zhang W N, Wang S K, et al.Effect of astragalus polysaccharide on leukocyte phagocytic capacity and immune organ weights of tilapia [A].In: Pan H P (Eds.), Assembly Documents of Disease prevention and Control Professional Committee of Fisheries Society in Fujian Province(1)[C].Beijing: Ocean Press.2011, 111—119 [林旋,张伟妮, 王寿昆, 等.黄芪多糖对罗非鱼白细胞吞噬能力和免疫器官重量的影响.攀海平主编.福建省水产学会病害防控专业委员会论文集(1).北京: 海洋出版社, 2011, 111—119]

[17] Gao S Z, Ge C R, Tian Y B, et al.Effect of Chinese herb feed additives on the biological and biochemical index of blood in growing and finishing Pigs [J].Journal of Yunnan Agricultural University, 2002, 17(2): 164—169 [高士争, 葛长荣, 田允波, 等.中草药添加剂对生长肥育猪血液生理生化指标的影响.云南农业大学学报, 2002, 17(2): 164—169]

[18] Xiang X, Chen J, Zhou X H, et al.Effect of astragalus polysaccharides on growth, body composition and immune indexin Schizothorax prenanti [J].Acta Hydrobiologica Sinica, 2011, 35(2): 291—299[向枭, 陈建, 周兴华, 等.黄芪多糖对齐口裂腹鱼生长、体组成和免疫指标的影响.水生生物学报, 2011, 35(2): 291—299]

[19] Liu H L, Chen Z W, Hu T J, et al.Effects of sargassum polysaccharide on the growth performance, blood biochemical indicators and immune regulation of tilapia Oreochromis aureus ♂× Oreochromis niloticus [J].Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2009, 37(29): 14215—14217 [刘洪丽,陈忠伟, 胡庭俊, 等.马尾藻多糖对奥尼罗非鱼生长性能、血清生化指标和免疫调节的影响.安徽农业科学, 2009, 37(29): 14215—14217]

[20] Zhang Z H.Effects of Chinese herbal compound on growth performance and non-specific immune function of tilapia (Oreochromis niloticus × O.aureus) and Ctenopharyngodon idellus [D].Thesis for Master of Agriculture.University of Agriculture and Forestry in Fujian, Fuzhou.2011 [张照红.复方中草药对罗非鱼、草鱼生长性能和非特异性免疫功能的影响.硕士学位论文, 福建农林大学, 福州.2011]

[21] Li Y Z.Drug Microbial Technology [M].Beijing: Chemical Industry Press.2004, 127—129 [李越中.药物微生物技术.北京: 化学工业出版社.2004, 127—129]

[22] Guo G L.Study on Astragalus polysaccharide and Achyranthes bidentata polysaccharide as an anti-immunological agent and their interaction on weaned pigs subjected to an immunological stress [D].Thesis for Master of Agriculture.Wuhan University of Technology, Wuhan.2008 [郭广伦.黄芪多糖和牛膝多糖对断奶仔猪抗免疫应激的作用及其互作效应.硕士学位论文, 武汉工业学院, 武汉.2008]

[23] Jin L Q, Xue S X, Lu J X, et al.Effect of derivatives of Achyranthes bidentata polysaccharides on lymphocyte proliferation and induction of IL-2 and TNF-α [J].Chinese Journal of Biochemical Phamaceutics, 2008, 29(5): 312—314 [金丽琴, 薛胜霞, 吕建新, 等.牛膝多糖衍生物对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IL-2和TNF-α的影响.中国生化药物杂志, 2008, 29(5): 312—314]

[24] Ning Y, Yao C P, Wang Y X, et al.Activated effect of Achyranthes bidentata polysaccharides on human monocytes [J].Acta Medicinae Universitatis Scientiae et Technologiae Huazhong, 2005, 34(4): 413—415[宁勇, 姚彩萍, 王宇学,等.牛膝多糖对外周血单核细胞的激活作用.华中科技大学学报(医学版), 2005, 34(4): 413—415]

[25] Chen Q H, Liu Z Y, He J H.Effects of Achyranthes bidentate polysaccharide on the proliferation of lymphocytes and concentrations of cytokine in peripheral blood mononuclear cells of piglets [J].Chinese Journal of Animal Nutrition, 2008, 20(6): 712—717 [陈清华, 刘祝英, 贺建华.牛膝多糖对仔猪淋巴细胞增殖作用和细胞因子分泌量的影响.动物营养学报, 2008, 20(6): 712—717]

[26] Jian J C, Ye J M, Wu Z H.Influence of lipopolysaccharide from Vibrio alginolyticus on immunological function of Epinephelus skaara [J].Acta Hydrobiologica Sinca, 2004, 28(1): 103—105 [简纪常, 叶剑敏, 吴灶和.溶藻弧菌脂多糖对石斑鱼免疫功能的影响.水生生物学报, 2004, 28(1): 103—105]

[27] Chen Q H, Liu Z Y, He J H.Achyranthes bidentata polysaccharide enhances immune response in weaned piglets [J].Immunoparmacology and Immunotoxicology, 2009, 31(2): 253—260

EFFECTS OF DIETARY ACHYRANTHES BIDENTATA POLYSACCHARIDE ON IMMUNITY AND ANTIOXIDANT FUNCTION OF GRASS CARP CTENOPHARYNGODON IDELLUS

WANG Hong-Quan1, TANG De-Yue1, ZHAO Yu-Rong1, WANG Xiao-Na1, JIN Bo-Tao1, ZHANG Kai2and XIAO Tiao-Yi1
(1.College of Animal Science and Technology, Hunan Agriculture University, Changsha 410128, China; 2.Datonghu Tianhong Aquatic Products Co., Ltd., Yiyang 413207, China)

To investigate effects ofAchyranthes bidentatapolysaccharide (ABP) on immunity and antioxidant function of grass carps, five test groups were used, which consisted of control group, 0.05%, 0.10 %, 0.20 % and 0.40 % ABP addition group.375 grass carps with similar body weight (88.13±0.76) g were randomly allotted to five groups with three replicates and with 25 grass carps in each replicate and were fed for 65d.The results showed as follows: compared with the control group, 0.20% ABP addition significantly increased the contents of serum tumor necrosis factor-α (TNF-α), the activities of serum superoxide dismutase (SOD), acid phosphatase (ACP) and lysozyme (LZM) (P<0.05), significantly decreased the contents of serum malondialdehyde (P<0.05).0.40% ABP addition significantly increased the contents of serum total protein (TP) and the activities of serum alkaline phosphatase (AKP).0.10% ABP addition significantly increased spleen somatic index of grass carp.However, the number of Nitroblue tetrazolium (NBT) positive cells, the contents of serum albumin (ALB), interleukin 1(IL-1) and interleukin 6 (IL-6) were not significantly affected by ABP supplementation (P>0.05).These results indicate that dietary appropriate ABP can significantly promote immunity and antioxidant function of grass carps.We suggest that the appropriate ABP content was 0.20 % in feed of grass carp.

Grass carp; Achyranthes bidentata polysaccharide; Immunity; Antioxidant function

S965.1

A

1000-3207(2013)02-0351-07

10.7541/2013.26

2012-11-19;

2012-12-28

湖南省自然科学基金(09038); 国家农业部现代农业产业技术体系国家大宗淡水鱼类产业技术体系常德综合试验站(CARS-46-42)资助

王红权(1971—), 男, 湖南湘阴县人; 博士; 研究方向为水生动物健康养殖。Email: whq1078@yahoo.com.cn

赵玉蓉, 研究方向为水产动物营养与饲料。Email: zyr36@yahoo.com.cn; 肖调义, E-mail: tyx1128@yahoo.com.cn