罗非鱼对晶体蛋氨酸、包膜蛋氨酸利用的比较研究

冷向军田 娟陈丙爱李小勤文 华

(1.中国水产科学研究院长江水产研究所, 武汉430223; 2.上海海洋大学水产与生命学院, 上海201306; 3.农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306)

罗非鱼对晶体蛋氨酸、包膜蛋氨酸利用的比较研究

冷向军1,2,3田 娟1陈丙爱2李小勤2,3文 华1

(1.中国水产科学研究院长江水产研究所, 武汉430223; 2.上海海洋大学水产与生命学院, 上海201306; 3.农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306)

为比较罗非鱼对晶体蛋氨酸、包膜蛋氨酸的利用效果, 设计了鱼粉含量为9%的鱼粉饲料、鱼粉含量为0%的无鱼粉饲料(以豆粕等蛋白替代鱼粉), 在无鱼粉饲料基础上分别添加晶体蛋氨酸、包膜蛋氨酸, 使其蛋氨酸含量与鱼粉饲料一致, 共4种饲料, 饲喂平均体重为(1.22±0.07) g/尾的奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus × O.aureus) 8周。结果表明, 各组罗非鱼增重率分别为1642.7%、1250.3%、1362.0%、1451.7%, 饲料系数分别为1.08、1.45、1.30、1.21; 在无鱼粉饲料中添加晶体蛋氨酸、包膜蛋氨酸提高增重率8.9%、16.1% (P<0.05), 降低饲料系数10.34%、16.55% (P<0.05); 包膜蛋氨酸组较晶体蛋氨酸组具有更高增重率和更低饲料系数(P<0.05)。对摄食后不同时间点肝脏和血浆谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)活性变化的测定表明,鱼粉饲料组、无鱼粉饲料组肝脏GOT、GPT活性分别在摄食后第2、第4h出现高峰; 晶体蛋氨酸组在摄食后1h出现高峰, 较无鱼粉组提前; 包膜蛋氨酸组在摄食后第5h出现高峰, 较无鱼粉组滞后; 血浆GOT、GPT活性变化趋势与肝脏的基本一致。消化率试验表明, 鱼粉饲料组干物质、粗蛋白质消化率最高, 无鱼粉饲料组最低; 在无鱼粉饲料中添加晶体蛋氨酸、包膜蛋氨酸后, 干物质、粗蛋白质消化率均得到显著提高(P<0.05)。上述结果表明, 在蛋氨酸缺乏的实用饲料中补充晶体或包膜蛋氨酸, 均可显著提高罗非鱼生长性能和营养物质消化率, 包膜蛋氨酸较晶体蛋氨酸具有更高的利用效率和更好的促生长效果。

罗非鱼; 晶体蛋氨酸; 包膜蛋氨酸; 生长; 转氨酶

根据理想蛋白的理论, 在畜禽饲料中补充晶体氨基酸以平衡氨基酸组成、降低蛋白水平, 已经得到了普遍的应用; 但在水产饲料中, 添加晶体氨基酸的效果却因鱼类品种不同, 而呈现出很大差异。一般认为, 鲑鳟鱼类能有效利用晶体氨基酸[1,2]; 我国的主要淡水养殖鱼类鲤(Cyprinus carpio)[3]、鲫(Carassius auratus gibelio)[4]、草鱼(Ctenopharyngodon idellus)[5,6]等不能有效地利用外源性晶体氨基酸,其原因主要为晶体氨基酸在肠道吸收过快, 不能与来自饲料蛋白质的氨基酸同步, 从而导致利用效果不佳; 但这种理论似乎并不适用于罗非鱼。林仕梅等[7]在实用饲料中补充0.05%—0.15%晶体蛋氨酸,显著提高了奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus × O.aureus)增重率, 降低了饲料系数; 金胜洁等[8]、程成荣等[9]的试验, 也表明了罗非鱼能有效利用外源性晶体氨基酸。这些研究表明, 罗非鱼对晶体氨基酸的利用不同于鲤、鲫、草鱼等。对于鲤、鲫、草鱼等, 对晶体氨基酸进行缓释处理(包膜或微胶囊),可提高晶体氨基酸有效利用性, 那么, 罗非鱼对晶体氨基酸、包膜氨基酸的利用是否存在差别？为此,进行了本次试验, 以奥尼罗非鱼为研究对象, 以豆粕等蛋白取代鱼粉, 在饲料粗蛋白水平相等的情况下, 使蛋氨酸成为第一限制性氨基酸, 在此基础上,分别在无鱼粉饲料中补充晶体蛋氨酸、包膜蛋氨酸,考察其对鱼体生长性能、营养物质消化率、血浆和肝脏谷草转氨酶、谷丙转氨酶的影响, 以比较罗非鱼对晶体氨基酸、包膜氨基酸的利用效果, 为氨基酸在水产饲料中的合理应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计与饲料

参考尼罗罗非鱼幼鱼饲料蛋氨酸需要量的研究结果[10,11], 本试验设计了4种等氮等脂饲料, 分别为鱼粉饲料(鱼粉含量9%, 含蛋氨酸0.55%)、无鱼粉饲料(鱼粉含量为0%, 用豆粕等蛋白替代鱼粉,含蛋氨酸0.46%), 晶体蛋氨酸饲料(在无鱼粉饲料基础上添加有效含量为98.5%晶体蛋氨酸0.10%)、包膜蛋氨酸饲料(在无鱼粉饲料基础上添加有效含量为49%包膜蛋氨酸0.20%), 其中晶体蛋氨酸饲料和包膜蛋氨酸饲料的蛋氨酸含量与鱼粉饲料一致。包膜蛋氨酸由本试验室试制[12]。在饲料中添加蛋氨酸后, 相应减少麸皮用量。饲料原料全部经粉碎过40目筛, 充分混合均匀后用软颗粒机加工成颗粒状饲料, 晾干后置于4℃冰箱备用。鱼粉饲料及无鱼粉饲料配方组成和营养指标(表1)。

1.2 试验用鱼与试验管理

试验用罗非鱼为奥尼罗非鱼, 平均体重(1.22± 0.07) g/尾。取回暂养2 周后, 饲养于自动充气循环玻璃钢水族箱(0.8 m×0.5 m×0.5 m), 共4个处理组,每个处理组设3重复, 每箱放养35尾, 共12口水族箱。每天投饲三次(8:00、12:00和16:00), 投饲率为5%左右, 并根据摄食情况作相应调整, 使其在投饲后10min内食完。各箱投饲量保持一致水平, 饲养周期为8周, 水温25—28℃, pH为7.1—7.8, 溶氧> 4.5 mg/L。

1.3 测定指标与方法

生长性能 养殖8周后, 饥饿鱼体24h, 对各箱鱼体称重, 并统计各箱鱼所摄食的饲料质量, 计算增重率、饲料系数、蛋白质效率和成活率。

增重率(WG, %)=100×[末均重(g)−初均重(g)]/初均重(g)

饲料系数(FCR)=摄食量(g)/[末体重(g)−初体重(g)]

蛋白质效率(PER, %)= 100×体重增重量/蛋白质摄取量

成活率(SR, %)=100×末尾数/初尾数

肌肉成分的测定 养殖试验结束, 每池随机取3尾鱼, 每组共9尾鱼, 取其肌肉测定肌肉粗蛋白(凯氏定氮法, KDN-04A型定氮仪)、粗脂肪(索氏抽提法)、粗灰分(550℃灼烧法)及水分(105℃烘干法)含量。

谷草转氨酶、谷丙转氨酶测定 养殖试验结束, 鱼体禁食1d, 每缸取3尾鱼, 经MS-222麻醉后,于尾静脉采血, 3000 r/min离心10min, 制得血浆,并剥离肝脏; 之后饱食投喂, 分别在摄食后1、2、3、4、5、6h从每缸中取3尾鱼采血制备血浆和采取肝脏, 所有样品均于−80℃冻存备测。其中肝脏粗酶液的制备为每尾鱼取0.2 g肝脏加入9倍体积4℃淡水鱼用生理盐水, 冰浴匀浆(10000 r/min, 10s/次, 连续4次), 3000 r/min离心10min, 取上清待测。谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)均采用比色法测定,测定试剂盒购自南京建成生物技术研究所。

表1 饲料组成及营养成分分析Tab.1 Diets formulation and approximate composition (%)

表观消化率试验 在养殖试验结束后, 进行消化率试验。在上述4种饲料中分别添加0.5% Cr2O3,每组3个重复, 共12个水族箱, 每箱放10尾鱼(均重19.2 g/尾)。以上述4组饲料分别投喂试验鱼1周,以适应环境和观察排便规律; 正式试验期间, 每天饱食投喂3次(8:00、12:00和16:00), 投喂0.5h后, 将残饵吸出, 在摄食后2h收集粪便(虹吸法), 取包膜完整者烘干保存备用, 粪便收集持续1周。

样品中Cr2O3采用酸消化比色法测定, 粗蛋白测定采用凯氏定氮法(KDN-04A型—凯氏定氮仪)。饲料干物质、蛋白质表观消化率(ADC)计算公式如下:

干物质表观消化率=[1−B/B′]×100; 蛋白质表观消化率=[1−A/A′×B/B′]×100。式中A、B分别为饲料中的粗蛋白、Cr2O3含量, A′、B′分别为粪便中的粗蛋白、Cr2O3含量。

1.4 数据统计与分析

试验结果以平均值±标准差表示, 数据采用SPSS16.0进行统计分析, 用Duncan氏法进行多重比较, 差异显著水平为P<0.05。

2 结果

2.1 晶体、包膜蛋氨酸对罗非鱼生长和饲料利用的影响

经8周饲养后, 罗非鱼的生长情况(表2)。鱼粉饲料组具有最高增重率、蛋白质效率和最低饲料系数, 而无鱼粉饲料组的增重率和蛋白质效率最低,饲料系数最高; 在无鱼粉饲料中添加晶体蛋氨酸,提高增重率、蛋白质效率8.9%、11.2%(P<0.05), 降低饲料系数10.34%(P<0.05); 在无鱼粉饲料中添加包膜蛋氨酸, 增重率和蛋白质效率进一步提高, 达16.1%、19.4%(P<0.05), 降低饲料系数16.55% (P< 0.05); 与晶体氨基酸组相比, 包膜氨基酸组的鱼体增重率和蛋白质效率提高6.6%、7.4% (P<0.05), 饲料系数降低6.92% (P<0.05)。

2.2 晶体、包膜蛋氨酸对罗非鱼肌肉成分的影响

各组罗非鱼的肌肉组成(表3), 各组肌肉在灰分、蛋白质含量上均无显著差异(P>0.05); 无鱼粉饲料组鱼体肌肉具有最高的脂肪含量和最低的水分含量, 在无鱼粉饲料中添加晶体氨基酸、 包膜氨基酸,均显著降低了肌肉脂肪含量(P<0.05)。

2.3 晶体、包膜蛋氨酸对摄食后罗非鱼肝脏和血浆

GOT、GPT活性的影响

摄食后不同时间点的肝脏、血浆中GOT、GPT活性变化(图1—4)。由图1—4可知, 摄食不同饲料后, 各组罗非鱼血浆GOT、GPT活性与肝脏GOT、GPT活性变化趋势基本一致。鱼粉饲料组肝脏、血浆GOT、GPT在摄食后第2h出现高峰, 其后降低;无鱼粉饲料组的高峰值出现在第4h; 在饲料中添加晶体蛋氨酸后, 肝脏、血浆GOT、GPT活性峰值提前到摄食后1h, 其后逐渐降低, 在5h时出现回升现象, 但峰值较低; 包膜蛋氨酸组的血浆、肝脏GOT、GPT活性在摄食后逐渐上升, 高峰值出现在摄食后第5h。

从图1—4可以看出, 鱼粉饲料组的肝脏GOT、GPT在整体上高于无鱼粉饲料组, 但在血浆GPT、GOT上, 则是无鱼粉饲料组高于鱼粉饲料组; 在无鱼粉饲料基础上补充晶体或包膜蛋氨酸后, 不仅使GPT、GOT峰值在肝脏、血浆出现提前或滞后, 还使肝脏GPT、GOT数值升高, 但对血浆GPT、GOT数值影响不大。

表2 晶体、包膜蛋氨酸对罗非鱼生长和饲料利用的影响Tab.2 Effects of crystalline or coated methionine on growth and feed utilization

表3 晶体、包膜蛋氨酸对罗非鱼肌肉组成的影响Tab.3 Effects of crystalline or coated methionine on muscle composition

图1 摄食后肝脏谷草转氨酶变化(图例下同)Fig.1 Change of liver GOT of tilapia after feed intaking

图2 摄食后肝脏谷丙转氨酶变化Fig.2 Change of liver GPT of tilapia after feed intaking

图3 摄食后血浆谷草转氨酶变化Fig.3 Change of plasma GOT of tilapia after feed intaking

图4 摄食后血浆谷草转氨酶变化Fig.4 Change of plasma GPT of tilapia after feed intaking

2.4 晶体、包膜蛋氨酸对罗非鱼营养物质表观消化率的影响

各组饲料的干物质ADC、蛋白质ADC(表4)。从表4中可见, 鱼粉组具有最高的干物质ADC和蛋白质ADC, 而无鱼粉组的干物质消化率和蛋白质ADC最低; 在无鱼粉饲料中添加晶体或包膜氨基酸后均显著提高了饲料干物质消化率和蛋白质ADC (P<0.05), 二者之间无显著差别(P>0.05), 但均低于鱼粉饲料组(P<0.05)。

3 讨论

3.1 晶体或包膜蛋氨酸对罗非鱼生长的影响

目前, 尚无关于奥尼罗非鱼蛋氨酸需要量研究的报道。Nguyen, et al.[10]、Santiago, et al.[11]的研究表明, 初始体重5.62 g和0.062 g尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)对蛋氨酸的需求量分别为0.49 %、0.75 %, 本试验在此基础上设计了鱼粉含量分别为9%(鱼粉饲料, 正对照组)、0%(无鱼粉饲料,负对照组)的两种饲料, 其蛋氨酸水平为0.55%、0.46%。从本次试验的养殖效果来看, 鱼粉饲料组的鱼体增重率为1642.7%, 饲料系数为1.08, 与养殖生产的效果一致, 可以认为该配方营养水平, 包括蛋氨酸水平, 已基本满足了鱼体的营养需求; 而无鱼粉饲料的鱼体增重率为1250.3%, 饲料系数为1.45,分别相当于鱼粉饲料组的76.09%、134.3%, 生产性能显著降低(P<0.05)。这表明, 以豆粕等蛋白代替鱼粉后, 尽管配方蛋白水平基本一致, 但由于豆粕的蛋氨酸含量低, 使得配方中蛋氨酸成为第一限制性氨基酸, 仅相当于鱼粉饲料组含量的83.6%, 不能满足罗非鱼的生长需求。

表4 晶体、包膜蛋氨酸对罗非鱼饲料干物质、蛋白质表观消化率的影响Tab.4 Influence of crystalline or coated methionine on dry matter and protein digestibilities

林仕梅等[7]在含0.45%蛋氨酸的基础饲料中添加晶体蛋氨酸0.05%、0.10%, 提高了奥尼罗非鱼瞬间生长率8.7%、13.4%; 降低了饲料系数9.04%、17.02%(P<0.05); 把饲料蛋白水平从34%降低至28%, 同时补充晶体赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸, 吉富罗非鱼的生长性能和饲料利用不受影响[8]; 在Nguyen, et al.[10]的试验中, 尼罗罗非鱼的增重率随着饲料中晶体蛋氨酸含量的增加而增加。本试验在无鱼粉饲料中添加0.10%第一限制性氨基酸—蛋氨酸(晶体形式), 罗非鱼增重率由1250.3%提高到1362.0%(P<0.05), 饲料系数由1.41下降至1.30 (P<0.05)。这表明在无鱼粉饲料中添加外源性氨基酸可以改善罗非鱼的生长性能, 晶体蛋氨酸能够被罗非鱼有效利用。在对晶体氨基酸的利用能力方面,罗非鱼显然优于鲤、鲫、草鱼等。在草鱼、鲤、鲫等无胃鲤科鱼类存在着晶体氨基酸与蛋白态氨基酸吸收不同步的问题, 在罗非鱼, 由于胃的存在, 对食物有一个储存和缓慢释放入肠的过程, 在一定程度上缓解了这种不同步吸收现象, 因而表现出了对晶体氨基酸利用的有效性。

在鲤[3]、鲫[4]、草鱼[5,13]的研究表明, 晶体氨基酸经包膜或微胶囊化处理后, 能为这些鱼类有效利用, 显著改善其生长。目前尚未见在罗非鱼上晶体氨基酸与缓释型氨基酸对生长作用效果的比较研究。本试验在无鱼粉饲料中添加包膜蛋氨酸后, 与晶体蛋氨酸组相比, 罗非鱼增重率提高6.6% (P< 0.05), 饲料系数降低6.92%(P<0.05)。这表明, 包膜氨基酸比晶体氨基酸更能为罗非鱼有效利用。尽管罗非鱼的胃在一定程度上缓解了晶体氨基酸与蛋白态氨基酸吸收不同步的问题, 但这种不同步性依然存在。在与罗非鱼有着类似消化生理特点(具胃)的斑点叉尾的研究中, 摄食含晶体赖氨酸的饲料后,胃食糜中赖氨酸与指示剂(三氧化二铬)之比随食后时间延长而减少, 而摄食含蛋白态赖氨酸饲料后,该比值不随时间延长而改变, 这表明晶体赖氨酸具有更高吸收速度和更快的胃通过时间[14]。对晶体氨基酸包膜, 可延缓其吸收速度, 使这种不同步现象进一步得到改善。Segovia, et al.[15]以聚乙烯醇三棕榈酸甘油酯包膜S-35标记蛋氨酸, 发现摄食后3h内, S-35在胃和前肠组织的比放射性活度显著低于晶体氨基酸组, 表明了蛋氨酸经包膜后, 其吸收速度降低。这种缓释型氨基酸比晶体氨基酸更为有效的报道也见于牙鲆[16]。今后有必要进一步测定罗非鱼在摄食含晶体氨基酸、包膜氨基酸饲料后不同时间点上的血液氨基酸组成, 为这种理论提供更多的直接证据。

值得注意的是, 在无鱼粉饲料中补充晶体或包膜蛋氨酸后, 罗非鱼的生长性能得到显著改善, 但增重率仍显著低于鱼粉饲料组, 饲料系数显著高于鱼粉饲料组(表2), 这表明, 全植物蛋白饲料, 即便补充第一限制性氨基酸后, 在营养物质消化利用率方面与含鱼粉饲料相比, 依然具有一定差距(表4);此外, 在第一限制性氨基酸得到满足后, 还存在第二、第三限制性氨基酸, 这也在一定程度上影响了罗非鱼的生长。

3.2 添加蛋氨酸对罗非鱼饲料干物质、蛋白质消化率的影响

关于添加氨基酸对饲料消化率的影响的报道很少。在尼罗罗非鱼饲料中添加0.39% L-赖氨酸硫酸盐(赖氨酸为0.2%), 干物质和粗蛋白消化率分别提高了7.51% (P<0.05)和4.78% (P<0.05)[17]; 金胜洁等[8]在粗蛋白含量28%的基础饲料中补充0.37%DL-蛋氨酸、1.04%L-赖氨酸硫酸盐和0.31%L-苏氨酸后,罗非鱼对饲料干物质、粗蛋白和能量的消化率分别由53.38%、78.49%、60.31%提高到56.22%、80.02%、64.23%, 但未达显著水平(P>0.05)。本试验在无鱼粉饲料中添加蛋氨酸后, 饲料干物质和粗蛋白消化率得到了显著提高, 其原因可能是饲料中添加氨基酸后, 导致肠道中氨基酸量的增加, 氨基酸作为蛋白质消化的产物之一, 又刺激了消化酶的分泌, 从而提高了营养物的消化率, 这有待于在今后的研究中加以测定和证实。

本次试验采用Cr2O3作指示剂, 这是鱼类消化率实验中常用的方法[18]。尽管有研究表明, 以Cr2O3作指示剂, 会促进罗非鱼的糖代谢[19,20], 但在本试验中, 消化率实验是在生长试验结束后单独进行的,重点考察蛋白质和干物质消化率, 时间较短, 即便存在对糖代谢的影响, 也不大, 且不会影响各组饲料消化率变化和分布的基本规律。

3.3 添加蛋氨酸对罗非鱼转氨酶活性的影响

转氨酶是催化氨基酸氧化分解时将氨基转移到α-酮酸的酶。GOT、GPT为鱼体内最重要的两种转氨酶, 参与氨基酸的分解和合成, 主要存在于肝细胞内, 其活性升高, 表明氨基酸代谢旺盛, 蛋白质分解下降, 而合成代谢加强, 有利于氮在体内的蓄积[21]。

通常, 鱼类在摄食后, 大量氨基酸、小肽等蛋白质消化产物被吸收进入体内, 氨基酸和蛋白质代谢加强, 因此, 在摄食后的一段时间里, 会导致机体转氨酶活性的显著增加。在本次试验中, 无论是鱼粉饲料, 还是无鱼粉饲料, 被罗非鱼摄食后, 均导致了肝GPT和GOT活性的显著增加, 只是二者出现峰值的时间有所不同: 前者高峰值出现在食后2h,后者出现在食后4h, 这反映了两种饲料可消化性的不同, 鱼粉饲料的消化率高, 被消化吸收的速度快,使得体内较早的出现了氨基酸代谢的高峰, 因而GPT和GOT活性的峰值出现较早; 在饲料中加入晶体蛋氨酸后, GPT和GOT活性峰值出现时间提前到食后1h, 这可能是晶体氨基酸的吸收速度更快, 机体更早进入了氨基酸代谢旺盛阶段; 晶体氨基酸经包膜后, 其吸收速度降低, 使得进入机体的速度减慢, 因此包膜蛋氨酸组的GPT和GOT活性峰值出现时间较迟(食后5 h), 甚至较无鱼粉饲料组滞后1h,这是否是由于包被缓释效果好, 低于正常饲料的消化吸收速度, 尚有待于进一步研究。

在饲料中加入氨基酸后, 不仅会使转氨酶活性峰值出现时间发生变化, 也会影响其活性大小。邓君明等[16]发现, 在饲料中添加晶体氨基酸显著提高了牙鲆血浆谷草转氨酶和谷丙转氨酶的活性; 在军曹鱼饲料中添加晶体蛋氨酸, 或棕榈酸甘油酯包被蛋氨酸, 也显著提高了肝脏谷草转氨酶活性, 但对谷丙转氨酶活性影响不大[22]。在本次试验中, 在无鱼粉饲料中添加晶体或包膜蛋氨酸, 均提高了罗非鱼肝脏GOT和GPT的活性, 这表明, 氨基酸的添加,促进了氨基酸的周转代谢。

在图1—4中所表现出来的无鱼粉饲料组血浆GPT、GOT高于鱼粉饲料组的现象, 是否意味着无鱼粉饲料组鱼体肝脏的损伤, 目前尚无法下此结论,有待于今后进一步研究。

4 结论

在无鱼粉饲料中添加晶体蛋氨酸或包膜蛋氨酸均可显著提高罗非鱼增重率和饲料干物质消化率、蛋白质消化率, 降低饲料系数; 晶体蛋氨酸使肝脏GPT和GOT活性峰值出现时间提前, 而包膜蛋氨酸使肝脏GPT和GOT活性峰值出现时间滞后; 包膜蛋氨酸较晶体蛋氨酸具有更好的促生长效果。

[1] Gaylord T G, Barrows F T．Multiple amino acid supplementations to reduce dietary protein in plant-based rainbow trout, Oncorhynchus mykiss’ feeds [J].Aquaculture, 2009, 287(1—2): 180-184

[2] Cheng Z J, Hardy R W, Usry J L.Plant protein ingredients with lysine supplementation reduce dietary protein level in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) diets, and reduce ammonia nitrogen and soluble phosphorus excretion [J].Aquaculture, 2003, 218(1—4): 553—565

[3] Leng X J, Luo Y X, Li X Q, et al.Effects of dietary supplementation of crystalline or micro-capsulated amino acids on growth performance of common carp (Cyprinus carpio) [J].Chinese Journal of Animal Nutrition, 2010, 22(6): 1599—1606 [冷向军, 罗运仙, 李小勤, 等.饲料中补充晶体或微囊氨基酸对鲤生长性能的影响.动物营养学报, 2010, 22(6): 1599—1606]

[4] Leng X J, Wang G, Li X Q, et al.Supplemental effects ofcrystalline or coated amino acids on growth performance and serum free amino acids of allogynogenetic crucian carp [J].Journal of Fisheries of China, 2007, 31(6): 743—748 [冷向军, 王冠, 李小勤, 等．饲料中添加晶体或包膜氨基酸对异育银鲫生长和血清游离氨基酸水平的影响.水产学报, 2007, 31(6): 743—748]

[5] Luo Y X, Xie J, Lü L Q, et al.Effect of dietary crystalline or microcapsuled lysine supplementation on growth and plasma total free amino acids of grass carp (Ctenopharyngodon idellus) [J].Journal of Fisheries of China, 2010, 34(3): 466—473 [罗运仙, 谢骏, 吕利群, 等.饲料中补充晶体或微囊赖氨酸对草鱼生长和血浆总游离氨基酸的影响.水产学报, 2010, 34(3): 466—473]

[6] Liu Y J, Tian L X, Liu D H, et al.Influence of practical diet supplementation with free or coated lysine on the growth, plasma free amino acids and protein synthesis rates in the muscle of Ctenopharyngodon idellus [J].Journal of Fisheries of China, 2002, 26(3): 252—258 [刘永坚, 田丽霞, 刘栋辉, 等.实用饲料补充结晶或包膜赖氨酸对草鱼生长、血清游离氨基酸和肌肉蛋白质合成率的影响.水产学报, 2002, 26(3): 252—258]

[7] Lin S M, Mai K S, Tan B P.Influence of practical diet supplementation with free D-Methionine on the growth and body composition tilapia Oreochromis niloticus [J].Acta Hydrobiologica Sinica, 2008, 32(5): 741—745 [林仕梅, 麦康森, 谭北平.实用饲料中添加结晶蛋氨酸对罗非鱼生长、体组成的影响.水生生物学报, 2008, 32(5): 741—745]

[8] Jin S J, Liu Y J, Tian L X, et al.Evaluation of protein reduction and amino acids supplementation of practical diets for Nile tilapia (Oreochromis niloticus) [J].Journal of Fisheries of China, 2010, 34(9): 1429—1438 [金胜洁, 刘永坚, 田丽霞, 等.不同蛋白水平下添加晶体氨基酸对罗非鱼生长和饲料利用的影响.水产学报, 2010, 34(9): 1429—1438]

[9] Cheng C R, Wen X B, Wang W Q, et al.The use of exogenous crystal amino acid for optimization feed amino acid levels in GIFT tilapia in the pond [J].Feed Industry, 2011, 32(18): 30—34 [程成荣, 温小波, 汪文庆, 等.利用外源晶体氨基酸优化吉富罗非鱼饲料氨基酸水平的池塘试验.饲料工业, 2011, 32(18): 30—34]

[10] Nguyen T N, Allen D D.Methionine requirement in practical diets of juvenile Nile tilapia, Oreochromis niloticus [J].Journal of the World Aquaculture Society, 2009, 40(3): 410—416

[11] Santiago C B, Lovell R T.Amino acid requirements for growth of Nile tilapia [J].The Journal of Nutrition, 1988, 118(12): 1540—1546

[12] Chen B A, Leng X J, Li X Q, et al.Study of the effect of crystalline or coated amino acids for Cyprinus carpio [J].Acta Hydrobiologica sinica, 2008, 32(5): 774—778 [陈丙爱,冷向军, 李小勤, 等.晶体或包膜氨基酸对鲤鱼的作用效果研究.水生生物学报, 2008, 32(5): 774—778]

[13] Tan F F, Ye Y T, Xiao S Y, et al.Effects of microcapsule lysine and methionine supplementation on growth performance of grass carp (Ctenopharyngodon idellus) [J].Chinese Journal of Animal Nutrition, 2010, 22(3): 804—810 [谭芳芳,叶元土, 肖顺应, 等.补充微囊赖氨酸和蛋氨酸对草鱼生长性能的影响.动物营养学报, 2010, 22(3): 804—810]

[14] Zarate D D, Lovell R T, Payne M.Effects of feeding frequency and rate of stomach evacuation on utilization of dietary free and protein-bound lysine for growth by channel catfish Ictalurus punctatus [J].Aquaculture Nutrition, 1999, 5(1): 17—22

[15] Segovia M A, Reigh R C.Coating crystalline methionine with tripalmitin-polyvinyl alcohol slows its absorption in the intestine of Nile tilapia [J].Aquaculture, 2004, 238(1—4): 355—367

[16] Deng J M, Mai K S, Ai Q H, et al.Effects of crystalline amino acids coated with various materials on growth performance and plasma biochemistry indexes of Japanese flounder (Paralichthys olivaceus) [J].Chinese Journal of Animal Nutrition, 2007, 19(6): 706—713 [邓君明, 麦康森,艾庆辉, 等.不同氨基酸包被方法对牙鲆生长及血浆生化指标的影响.动物营养学报, 2007, 19(6): 706—713]

[17] Yao Z T, Cai Y J, Du K Y, et al.Effect of supplementation sulphate L-lysine on growth and digestibility of Nile tilapia [J].Feed Industry, 2006, 27(18): 29—31 [姚志通, 蔡亚军,杜克镛, 等.L-赖氨酸硫酸盐对尼罗罗非鱼生长和消化的影响.饲料工业, 2006, 27(18): 29—31]

[18] Bureau D P , Kaushik A J , Cho C Y.Bioenergetics [A] .In: Halver H E, Hardy R W (Eds.), Fish.Nutrition [C].San Diego: Academic Press.2002, 14

[19] Shiau S Y, Chen M J.Carbohydrate utilization by tilapia Oreochromis niloticus×O.aureus as influenced by different chromium sources [J].The Journal of Nutrition, 1993, 123(10): 1747—1753

[20] Shiau S Y, Liang H S.Carbohydrate utilization and digestibility by tilapia, Oreochromis niloticus×O.aureus, are affected by chromic oxide inclusion in the diet [J].The Journal of Nutrition, 1995, 125(4): 976—982

[21] Deng J M.Effects of animal and plant protein Sources on feed intake, growth and protein and Iipid metabolism of Japanese flounder, Paralichthys olivaceus [D].Thesis for Doctor of Science.Ocean University of China, Qingdao.2006 [邓君明.动植物蛋白源对牙鲆摄食、生长和蛋白质及脂肪代谢的影响.博士学位论文, 中国海洋大学, 青岛.2006]

[22] Chi S Y, Tan B P, Dong X H, et al.Effect of supplementation microcapsule or crystalline m ethionine in diets on related enzyme activity of cobia (Rachycentron canadum) [J].Journal of Fishery Sciences of China, 2011, 18(1): 110—118 [迟淑艳, 谭北平, 董晓慧, 等.微胶囊蛋氨酸或晶体蛋氨酸对军曹鱼幼鱼相关酶活性的影响.中国水产科学, 2011, 18(1): 110—118]

COMPARISON STUDY ON UTILIZING CRYSTALLINE OR COATED METHIONINE BY TILAPIA (OREOCHROMIS NILOTICUS ×O.AUREUS)

LENG Xiang-Jun1,2,3, TIAN Juan1, CHEN Bing-Ai2, LI Xiao-Qin2,3and WEN Hua1
(1.Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Wuhan 430223, China; 2.College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China; 3.Key laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Ministry of Agriculture, Shanghai 201306, China)

The present study was conducted to compare the ability of utilizing crystalline and coated methionine (Met) in diet of tilapia (Oreochromis niloticus × O.aureus).Four diets with iso-lipid and iso-nitrogen were designed as fish meal diet (FMD, 9% fish meal), non-fish meal diet (NFMD, 0% fish meal), crystalline Met diet (Cr-Met) and coated Met diet (Co-Met) with crystalline Met or coated Met addition in NFMD to obtain the same Met level as FMD.Tilapia with initial body weight of (1.22 ± 0.07) g was fed the four diets for 8 weeks.The results showed that weight gain (WG) of the four groups were 1642.7%, 1250.3%, 1362.0% and 1451.7%, feed conversion rate (FCR) were 1.08, 1.45, 1.30 and 1.21, respectively.Compared with NFMD group, WG increased by 8.9% and 16.1% (P<0.05), and FCR decreased by 10.34% and 16.55% (P<0.05) by the addition of crystalline or coated Met in diet.Liver glutamic-pyruvic transaminase (GPT), glutamic-oxaloacetic transaminase (GOT) activity peak appeared at 2h and 4h after ingesting for fish in FMD and NFMD groups, which was advanced to 1h after ingesting for Cr-Met group, and delayed to 5h after ingesting for Co-Met group.The Plasma GOT, GPT activity had a similar variation trend to that of liver’s.The digestive trial showed that fish of fed FMD had the highest, and which of fed NFMD had the lowest digestibilities of dry matter (DM) and crude protein (CP).Compared with NFMD group, DM and CP digestibilities were significantly improved by the addition of crystalline Met and coated Met in diet.These results showed that the growth and nutrients digestibility of tilapia could be improved by adding crystalline Met and coated Met in practical diet deficient in Met.Tilapia can utilize coated Met more efficiently than crystalline Met.

Tilapia; Crystalline methionine; Coated methionine; Growth; Transaminase

S963.73

A

1000-3207(2013)02-0235-08

10.7541/2013.10

2012-03-12;

2012-11-29

上海市重点学科建设项目(Y1101); 罗非鱼现代产业技术体系建设经费(CARS-49); 2010年公益性行业(农业)科研专项经费(201003020)资助

冷向军(1972—), 男, 博士, 教授; 主要从事水产动物营养与饲料研究。Email: xjleng@shou.edu.cn

文华(1965—), 男, 博士, 研究员; 主要从事鱼类营养与饲料研究。E-mail: wenhua.hb@163.com