坦布苏病毒的最新研究进展

吕桂霞 （山东省东营市畜牧局 257091） 裴苹苹 （山东农业大学动物科技学院 山东 泰安）

自2010年春季以来，江苏、浙江、上海等地相继出现一种导致蛋鸭产蛋急剧下降的新发疾病，之后迅速波及福建、广东、广西、山东等全国多个省市的鸭场。到目前为止，全国大部分主要水禽养殖地区仍然受到该病的威胁。病鸭主要表现为高热、运动障碍、产蛋下降甚至停止，发病率高达100%，病死率在5%～10%之间。经研究证明该病的病原为鸭坦布苏病毒(DTMUV)[1]。

1 病原学

DTMUV属于黄病毒科，黄病毒属，蚊媒病毒类。DTMUV病毒粒子呈球形，直径多数为45～50nm，为不分节段的单股正链RNA病毒，有囊膜，囊膜内为20面体对称的核衣壳蛋白，表面有纤突[1-4,8-10]。其基因组大约10.5kb，编码3个结构蛋白：荚膜蛋白(C)、外膜蛋白(PrM and M)和囊膜蛋白(E)及7个非结构蛋白(NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B和NS5)[2,3,4]。通过和其他黄病毒属比较发现DTMUV与Bagaza病毒的亲缘关系最近。

DTMUV对乙醚、氯仿及去氧胆酸盐敏感[5～7]。该病毒不耐热，50℃以上加热60min就会失活[6]。

2 流行病学

DTMUV夏秋季节多发，蛋鸭与肉鸭均有发生，可自然感染多个品种，包括蛋鸭(绍兴鸭、缙云麻鸭、山麻鸭、金定鸭、康贝尔鸭、台湾白改鸭)、肉种鸭(樱桃谷鸭和北京鸭)及野鸭等[8]。该病发病率高，可达100%，但死淘率低，一般为5%～15%，有继发感染时的死淘率可达30%。10～25日龄的肉鸭和产蛋鸭更易感，此外，我国在种鸡、蛋鸡[9,10]、鹅[11]也发现有感染坦布苏病毒的报道。

DTMUV属蚊媒病毒类，可能会经蚊子传播。从发病鸭场死亡的麻雀体内检出DTMUV，提示病毒可经鸟类传播。病死鸭卵泡中可测得坦布苏病毒，推测DTMUV可经卵垂直传播。从泄殖腔可分离到病毒，表明该病毒能经粪便排毒，污染环境、饲料、饮水、器具、运输工具等而造成传播[12]。

3 症状

DTMUV发病突然，传播迅速。以鸭产蛋下降为主要特征，由高峰期的90%～95%下降至5%～10%。采食量大幅下降，较正常鸭采食下降约40%～50%。体温升高，精神沉郁，排绿色稀粪，部分鸭瘫痪。雏鸭和育成鸭以病毒性脑炎为主要特征，病鸭瘫痪，站立不稳，行走时双脚向外叉开，呈八字脚。走路时容易翻滚。病鸭腹泻，排白绿稀便，有的还排褐色粪便，脱水，蹼干燥。

4 病理变化

病鸭腺胃出血；心冠脂肪有出血点，心肌外观苍白，白色条纹状坏死，有的心肌内膜出血；肝脏肿大，淤血，表面有针尖状白色坏死点；脾脏肿大、出血，呈大理石样；严重的病理变化主要在卵巢，卵巢出血、破裂，卵泡膜充血、出血，卵泡充血、变性，卵黄变稀，卵黄囊膜出血，卵泡破裂，形成卵黄性腹膜炎；输卵管固有层水肿，有粘液性渗出。表现出神经症状的病鸭则出现脑膜出血、脑组织水肿。病理组织学变化主要有出血性卵巢炎、间质性肝炎、非化脓性脑炎[1,5,8,13,14]。

5 诊断

5.1 临床诊断 可以根据临床表现(产蛋量急剧下降)以及 病理变化(卵黄性腹膜炎)，采食量下降，偶见神经症状，可初步诊断为感染DTMUV。

5.2 实验室诊断 目前，DTMUV的实验室诊断主要是病毒分离和鉴定以及分子生物学检测方法。病毒分离和鉴定是DTMUV的传统检测方法。可从病鸭的卵泡膜、脑、脾脏、肝脏等病变组织中分离病毒，其中卵泡膜中最易分离和检测到病毒[14]。DTMUV的分子生物学检测方法主要有RT-PCR、TaqMan探针荧光定量PCR方法、半套式PCR检测方法、RT-LAMP、地高辛标记探针检测方法。其中，RT-PCR方法可直接检测鸭病变组织中的DTMUV，且敏感性高、特异性好[7,15,2]。颜丕熙等建立的套式RT-PCR方法较RT-PCR方法的灵敏度更高，且临床样品检出率高于病毒分离率[16]。TaqMan探针荧光定量PCR方法，灵敏度是常规PCR的100倍[17]。RT-LAMP检测法，灵敏度达10拷贝/μl，检测只需45min，较其他检测方法更直观、快速[18]。半套式PCR检测方法的敏感性比普通PCR高1000倍。地高辛标记探针检测方法特异性好，敏感度高，探针对DTMUV的最低检出量为100皮克。

目前，国际上通用的黄病毒属血清学检测方法有ELISA、AGP、血凝抑制试验(HI)、补体结合试验(CF)和中和实验(NT)等[19]。 间接ELISA是血清学诊断的常用方法，其优点是特异性强，灵敏度高及检测速度快。

6 防制

首先要做好DTMUV的预防工作，经实验室研究表明，DTMUV灭活疫苗对该病具有保护作用可在7～8日龄，50～60日龄以及开产前接种DTMUV灭活疫苗[20]。但目前还没有控制DTMUV的有效药物，发病后应注意对症治疗，防制继发感染。

7 展望

DTMUV是在我国首次发现的对水禽致病的新型黄病毒，传播迅速，对鸭鹅等水禽危害极大，应该引起世界范围内的重视。我国兽医工作者在DTMUV的研究领域也取得了重要进展，完成了DTMUV的分离与鉴定以及全基因组测序，另外建立了多项DTMUV的诊断方法。但是在DTMUV的致病机理、传播媒介以及特征性的症状与病变仍不明确，有效的治疗措施亦尚未确定。因此，尽快建立有效的防治措施，控制DTMUV的流行与传播亟待解决，意义重大[21]。

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