毛细管气相色谱法测定武打将军酒中薄荷脑的含量

陈锡琨

广西壮族自治区南宁市食品药品检验所，广西 南宁 530001

毛细管气相色谱法测定武打将军酒中薄荷脑的含量

陈锡琨

广西壮族自治区南宁市食品药品检验所，广西 南宁 530001

目的：建立武打将军酒中薄荷脑含量测定方法。方法：采用毛细管气相色谱法，色谱柱为stabiwax－DA石英毛细管柱（30m×0.53 mm×0.25μm），载气为氮气，水杨酸甲酯为内标物，FID检测器，检测器温度为250℃，进样口的温度为250℃，柱温160℃，分流进样，分流比（10∶1）。结果：薄荷脑和水杨酸甲酯能达到良好分离；薄荷脑的线性范围0.20～1.20mg·ml－1（r＝0.9996）；薄荷脑的回收率98.28%。结论：方法简便、准确、重复性好，可用于武打将军酒的质量控制。

武打将军酒；薄荷脑；气相色谱法

武打将军酒为民族药，该药为虎杖、芒硝、龙血竭、莪术、徐长卿、川芎、骨碎补、荜茇、乳香、三七、飞龙掌血、豆豉姜、薄荷脑等中药加工而成的纯中药复方制剂，具有活血祛瘀、舒筋活络、消肿止痛等功效。用于跌打损伤，筋骨扭伤，风湿骨痛，类风湿关节痛，骨质增生性刺痛，神经痹痛，肌肉疼痛，牙痛，冻疮等症状。方中的薄荷脑具有清热疏风，消肿止痛。其能选择性地刺激皮肤或黏膜的冷觉感受器，引起皮肤黏膜血管收缩从而产生消炎、止痛、止痒等作用。薄荷脑为挥发类物质，沸点较低，对其含量测定方法多采用气相色谱法测定［1～3］。按目前标准［4］只对薄荷脑进行薄层鉴别，未对其含量进行控制。为了更好地控制该制剂质量，本文采用毛细管气相色谱法对武打将军酒中薄荷脑的含量测定。方法简便、准确、重复性好，可用于标准中薄荷脑的质量控制。

1 仪器和试药

2010气相色谱仪（日本岛津）；BP211D电子天平（瑞士梅特勒公司）。

薄荷脑对照品 （中国药品生物制品检验所，批号：110728－201008含量测定用）；水杨酸甲酯、无水乙醇均为分析纯；武打将军酒（批号：20120306 20120408 20120525 20121023 20121103）及阴性样品（缺薄荷脑）均由广西壮族自治区壮医医院制剂室提供。

2 实验方法和结果

2.1 内标溶液的制备 取水杨酸甲酯适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为内标溶液。

2.2 对照品溶液的制备

2.2.1 取薄荷脑对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品储备溶液。

2.2.2 精密量取内标溶液、对照品储备溶液各2m l，置同一10ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 取本品3瓶，混匀，精密量取1ml，置10m l量瓶中，精密加入内标溶液2ml，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得。

2.4 阴性样品溶液制备 按处方比例制成不含薄荷脑的阴性样品溶液。精密量取阴性样品溶液1ml，置10m l量瓶中，精密加入内标溶液2ml，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得。2.5 色谱条件 采用2010GC气相色谱仪，色谱柱为stabiwax－DA石英毛细管柱（30 m×0.53 mm×0.25μm）；载气为氮气；水杨酸甲酯为内标物；FID检测器；检测器和进样口的温度均为250℃；柱温160℃；分流进样，分流比（10∶1）。N2流速3ml·min－1；H2流速30ml·min－1；空气流速400ml·min－1；尾吹气N2流速30m l·min－1；进样量为1μL，结果见图1。

2.6 工作曲线的绘制 分别精密吸取对照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0ml置10mL量瓶中，分别加入内标溶液2.0ml，加无水乙醇稀释并至刻度，摇匀。依次进样1μl，测定峰面积，以对照品与内标物峰面积的比作为纵坐标，对照品浓度为横坐标，进行线性回归，得到回归方程：Y＝0.0443X＋0.0198，r：0.9996。

2.7 精密度试验 取同一对照品溶液，连续进样6次，按“2.5”项下的色谱条件进行测定，求出薄荷脑的峰面积和

内标物的峰面积的比值，结果RSD为0.56%。实验表明其精密度良好。

2.8 重复性试验 取同一批号供试品，按“2.3”项下的方法分别配制9份，按 “2.5“项下的色谱条件进行测定，求出薄荷脑的含量，结果RSD为0.41%。实验表明其重复性良好。

2.9 稳定性试验 取同一批号的供试品溶液，在室温下放置，分别在0、2、6、8、12、18、24小时按“2.5“项下的色谱条件进行测定，结果薄荷脑含量的RSD为0.78%。表明供试品溶液在24小时内稳定。

2.10 加样回收试验 在已知含量的供试品溶液中加入一定量的对照品溶液和内标物溶液，按 “2.5”项下的色谱条件进行测定。结果回收率为98.28%，见表1。

表1 加样回收率试验结果（n＝9）

2.11 供试品中薄荷脑的含量测定 按“2.5”项下的方法，分别对5个批号的武打将军洒中薄荷脑含量分别进行测定，结果见表2。

表2 样品测定结果（n＝5）

3 讨论

本方法曾参照文献［5～7］方法制备样品溶液试验，结果采用直接取样定溶测出的含量和回收率均较为理想。故此，采用直按取样法，方法快速、简单。

本方法在实验过程中，曾选用萘、水杨酸甲酯和环已酮作内标物试验，均能获得较好的实验效果。通过实验结果相比较，选用水杨酸甲酯作为内标物效果更为理想。

本实验曾考察了3根不同商品规格的色谱柱（stabiwax－DA石英毛细管柱，phenomenex ZB－Wax石英毛细管柱及Agilent DB－17石英毛细管柱）并探索不同的进样口温度和不同检测器的温度；色谱柱温为程序升温和色谱柱为恒温等条件作实验比较。实验结果表明3根不同商品规格的色谱柱均能达到实验目的，而stabiwax－DA石英毛细管柱在检测器温度为250℃；进样口的温度为250℃；柱温160℃；分流进样，分流比（10∶1）的条件下能使实验中的薄荷脑和内标物质水杨酸甲酯在短时间（10min）内完全分离（峰分离度均大于1.5）；理论塔板数不低于10000；色谱基线平稳，符合 《中国药典》要求，故选用之。

样品中薄荷脑的含量在3.6023mg·m l－1～3.9831 mg· ml－1之间；但处方中薄荷脑是挥发性物质，在生产、包装、储存过程中，如果操作方法不当或高温存放，很容易造成薄荷脑含量偏低，从而影响药品的处方比例组成，进而影响药品的疗效。因此，笔者认为，制定武打将军酒测定薄荷脑含量标准时，产品在有效期内薄荷脑含量应得不少于3.60 mg·ml－1，这样才能保证药品的疗效。

［1］李彦超，李宜鲜，宋汉敏等.GC法同时测定安阳精制膏中薄荷脑、冰片和水杨酯甲酯的含量［J］.中医研究，2011，24（2）：25～26.

［2］蔡冰，李坚.气相色谱法对正骨水中樟脑、薄荷脑的含量测定 ［J］.河北医药，2008，30（6）：879.

［3］张晓霞，陈安家，张一鸣，等.毛细管气相色谱测定消肿止痛酊中樟脑与薄荷脑的含量［J］.时珍国医国药，2009，20（7）：1645～1646.

［4］广西壮族自治区壮医医院标准［S］.2002：29.

［5］杨宗辉，惠涛.GC法测定川贝枇杷露中薄荷脑的含量 ［J］.西北药学杂志，2008，23（5）：262～263.

［6］邓祖磊，张青云.气相色谱测定复方桑菊感冒冲剂中薄荷脑的含量［J］.海峡药学，2010，22（10）：46～47.

［7］中国药典［S］.2010年版.一部.528.

Capillary gas chromatography determination of menthol in Wudajianjun liquor

Chen Xi kun
Nanning Institute for Food and Drug Control，Nanning，guangxi530001，China

Objective：To establish a method for the determination of menthol in Wudajianjun lquor.Methods：Using capillary gas chromatography，column was stabiwax－DA fused silica capillary column（30 m×0.53 mm×0.25μm），contained gas was nitrogen，methyl salicylate as an internal standard and FID detector，the detector temperature 250℃，inlet temperature of250℃，column temperature 160°C，split injection，split ratio（10：1）.Results：Menthol and methyl salicylate can achieve good separation；the menthol linear range 0.20～1.20mg.ml－1（r＝0.9996）；menthol recovery was98.28%.Conclusion：The method is simple，accurate，reproducible and can be used for Wudajianjun liquor quality control.

capillary gas chromatography；Wudajianjun liquor；menthol

R284

A

1007－8517（2013）09－0020－02

2013.03.07）