苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元对早期断奶仔猪肠道pH值和消化酶活性的影响

2013-02-20孙晓磊王雪飞郭东清胡彦卿范琳琳

饲料工业 2013年10期

■孙晓磊杨英王雪飞郭东清胡彦卿范琳琳

（内蒙古农业大学兽医学院，内蒙古呼和浩特 010018）

近年来，世界各国意识到在动物饲料中添加抗生素的危害性。为了寻求代替品，世界卫生组织(WHO)、联合国粮农组织(FAO)及美、日等国极为重视抗生素替代物的研制。针对现代猪生产中早期断奶应激所引起的仔猪消化系统紊乱、严重腹泻、生长停滞甚至死亡等问题，开发安全、有机、高效、无残留、无公害的饲料添加剂是畜牧业发展的客观要求和必然结果。益生菌、益生素及合生元等微生态制剂有其独特的优势，前人没有将益生菌和益生素进行有机地整合制成一个微胶囊整体。本研究以中医药基础理论“扶正祛邪”为指导，将提取苦参碱后剩余的残渣——苦豆籽粕作为益生素，与具有良好生物学效应的双歧杆菌及仔猪肠道中固有的能够抑制致病菌（沙门氏菌、大肠杆菌）生长的优势乳酸菌作为益生菌，研制成苦豆籽粕与多重益生菌复合的微胶囊合生元，针对目前仔猪早期断奶应激过程中消化道内环境变化引起的生长迟缓等内容开展多途径、多层面的研究。

1 材料与方法

1.1 试验材料

苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元由内蒙古农业大学兽医学院中兽医实验室制备（活菌含量为1.98×108cfu/g）。

1.2 试验动物及饲养管理

60头(21±2)日龄的杜长大三元杂交仔猪，购于内蒙古鄂尔多斯市水镜湖猪场。

试验猪自由采食、饮水。进栏前对猪舍进行全面消毒，按猪场正常饲养管理进行饲养。

1.3 试验设计

试验采用单因素试验设计，选取60头体重接近的(21±2)日龄断奶仔猪随机分为4个处理，每个处理3个重复，每个重复5头仔猪。第1、2、3组在饲喂基础日粮的基础上分别添加0.5%、1.0%和2.0%的合生元，第4组(对照组)饲喂基础日粮(见表1)。预试期3 d，试验期为4周。

表1 试验分组及处理

1.4 基础日粮

试验基础日粮为内蒙古正大有限公司提供的“代乳宝”配合饲料。主要原料组成：玉米、豆粕、鱼粉、磷酸盐、石粉、食盐、复合预混料等，营养保证值见表2。

表2 试验基础日粮营养保证值

1.5 指标测定及方法

1.5.1 样品采集及处理

分别于28、35、42、49日龄各试验组每个重复组随机选取1头仔猪前腔静脉采血后，放血处死，迅速结扎幽门瓣、回盲瓣以防样品相互污染。取已结扎两端的十二指肠、空肠、回肠、盲肠3～5 cm各小肠段，立即浸入液氮后，于-80℃储存待测。

1.5.2 肠道内容物pH值的测定

取低温保存的十二指肠、空肠、回肠和盲肠各段4℃解冻，轻轻刮取内容物，蒸馏水10倍稀释，振荡均匀，用pH计测定。

1.5.3 肠道内消化酶活性的测定

取低温保存的十二指肠、空肠和回肠各段4℃解冻，轻轻刮取内容物，以生理盐水稀释后，冰浴条件下匀浆，收集匀浆液，4℃、2 500 r/min离心10 min，吸取上清液待测，采用南京建成生化工程研究所试剂盒测定脂肪酶和淀粉酶活性。

1.6 数据分析

采用SAS9.0软件对测得的数据进行分析，MEANS过程中的MENA和STD计算均值和标准差，使用ANOVA过程中的Duncan’s法进行多重区组检验。

2 结果与分析

2.1 苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元对早期断奶仔猪肠道pH值的影响（见表3）

由表3可知，饲喂合生元有降低消化道pH值的趋势，其中42日龄时2.0%合生元组空肠和盲肠内容物的pH值显著低于对照组（P＜0.05），49日龄时2.0%合生元组空肠和回肠内容物的pH值显著低于对照组（P＜0.05）。

2.2 苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元对早期断奶仔猪肠道脂肪酶活性的影响(见表4)

由表4试验结果可知，合生元对十二指肠、空肠作用效果显著，而对回肠效果不显著，其中0.5%合生元组和2%合生元组效果较好。

28日龄时，十二指肠脂肪酶活性的比较中，合生元组相对于对照组，0.5%合生元组和2.0%合生元组升高了 19.67%(P＜0.05)和14%(P＜0.05)；空肠脂肪酶活性比较中，1.0%合生元组和2.0%合生元组高于对照组 14.68%(P＜0.01)和 5.59%(P＜0.05)。回肠脂肪酶活性比较中，0.5%合生元组高于对照组11.16%(P＞0.05)；35日龄时，2.0%合生元组空肠脂肪酶活性比对照组升高了40.30%(P＜0.01)。42日龄时，合生元组相对于对照组，差异不显著(P＞0.05)。49日龄时，十二指肠脂肪酶活性的比较中，合生元组相对于对照组，0.5%合生元组、1.0%合生元组和2.0%合生元组分别升高了22.84%(P＜0.05)、24.90%(P＜0.05)和52.75%(P＜0.01)；空肠脂肪酶活性比较中，合生元组相对于对照组，0.5%合生元组、1.0%合生元组和2.0%合生元组升高了23.39%(P＜0.05)、28.31.0%(P＜0.05)和79.45%(P＜0.01)。

2.3 苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元对早期断奶仔猪肠道淀粉酶活性的影响(见表5)

表3 肠道内容物pH值的测定结果

表4 脂肪酶活性测定结果(U/g prot.)

表5 淀粉酶活性测定结果(U/g prot.)

淀粉酶活性的比较结果表明，添加合生元对提高试验组仔猪消化道淀粉酶活性有着良好的作用，其中1.0%合生元组和2.0%合生元组效果较好。

28日龄时，十二指肠淀粉酶活性比较中，合生元组相对于对照组，0.5%合生元组和1.0%合生元组升高了73.68%(P＜0.01)和31.58%(P＜0.01)；空肠淀粉酶活性比较中，合生元组相对于对照组，0.5%合生元组和2%合生元组升高了333.33%(P＜0.01)和140%（P＜0.01）。35日龄时，空肠脂肪酶活性比较中，合生元组相对于对照组，1.0%合生元组和2.0%合生元组升高了55.01%(P＜0.01)和48.31%（P＜0.01）；回肠淀粉酶活性比较中，合生元组相对于对照组，0.5%合生元组和1.0%合生元组分别升高了24%(P＜0.01)和 56%(P＜0.01)。42 日龄时，十二指肠淀粉酶活性比较中，合生元组相对于对照组，0.5%合生元组和1.0%合生元组升高了15.94%(P＜0.05)和18.84%(P＜0.05)；回肠淀粉酶活性比较中，合生元组相对于对照组，0.5%合生元组和1.0%合生元组升高了 60%(P＜0.01)和 26.67%(P＜0.05)。49日龄时，回肠淀粉酶活性比较中，1.0%合生元组比对照组升高了83.72%(P＜0.01)。

3 讨论

3.1 苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元对早期断奶仔猪肠道pH值的影响

肠道各部位pH值的不同不仅对消化酶有着直接的影响，也是影响肠道微生态的重要因素。

辛娜等（2011）研究了芽孢杆菌制剂对断奶仔猪胃肠道pH值的影响，结果表明，芽孢杆菌制剂有降低胃肠道pH值的趋势，但效果不显著。刘传虎等（2012）证明了益生菌制剂对断奶仔猪各肠道组织内容物pH值具有降低的趋势，但差异不显著。本试验结果表明，试验仔猪消化道处于酸性环境中，合生元不仅可以提高消化酶的活性，也对病原菌的生长繁殖起到一定的抑制作用，苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元具有降低仔猪肠道pH值的趋势，这也与上述试验结果相似。

3.2 苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元对早期断奶仔猪肠道消化酶活性的影响

微生态制剂可以提高动物消化酶的活性，消化酶含量是由酶分泌和降解的动态平衡所反映的，而酶活性增加主要与酶分泌加大或酶降解减少有关。双歧杆菌、乳酸杆菌及其代谢产物能促进动物消化酶的分泌和肠道蠕动，肠内容物中酶活性是反映机体消化能力的良好指标。大量研究证明，仔猪受到断奶应激的影响时，体内消化酶活性都会低于断奶前的水平，但随着日龄和采食量的增加，体内消化酶活性也会恢复到正常水平。王志祥等(2006)研究了乳酸杆菌对断奶仔猪消化酶活性的影响，研究结果表明，添加乳酸杆菌能够极显著提高胰脏和十二指肠中脂肪酶和淀粉酶的活性(P＜0.01)。班慧（2010）研究表明，在饲料中添加苦豆籽粕-双歧杆菌合生元对鸡小肠不同部位的胰蛋白酶、淀粉酶等消化酶活性均有提高。陈国顺等（2012）研究了中草药饲料添加剂对断奶仔猪消化酶活性的影响，结果表明，中草药饲料添加剂对断奶仔猪空肠后段和回肠的消化酶活性有不同程度的提高。本试验研究结果表明，在日粮中添加苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元可使早期断奶仔猪小肠内脂肪酶和淀粉酶活性均有不同程度的提高。但脂肪酶活性的测定中，断奶初期（28日龄）脂肪酶活性为最高，分析原因可能与样品采集及处理有关。