昆仑雪菊黄酮类成分研究

赵 军，孙玉华，徐 芳，李晨阳，胡梦颖，张兰兰，庞市宾

新疆维吾尔自治区药物研究所维吾尔药重点实验室，乌鲁木齐 830004

昆仑雪菊，又名血菊、高山寒菊、金鸡菊，维吾尔语“古丽恰尔”，为菊科金鸡菊属一年生草本植物两色金鸡菊Coreopsis tinctoria Nutt的干燥花蕾，主产于我国新疆和田地区［1］。昆仑雪菊具有清热解毒、活血化瘀之功效，维吾尔族人民将其用于高血压、痢疾、心慌等病症的治疗［2］。现代药理研究表明该药材具有明显的抗氧化、降血压和降血脂等多种生物活性［2，3］，然而其化学成分的研究鲜有文献报道。因此，为了开发利用这一植物资源，本文作者对其进行了化学成分的研究，从中分离得到了7个黄酮类化合物，分别为异奥卡宁7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、栎草亭-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、马里苷(3)、奥卡宁(4)、木犀草素(5)、槲皮素(6)和 8-羟基黄颜木素(7)。其中化合物2、5、6和7为首次从该植物中分离得到。

1 仪器与材料

RT-3型熔点测定仪(天津新天光分析仪器有限公司);INOVA-600型超导核磁共振仪(美国VARIAN公司);WHF-203B暗箱式紫外分析仪(上海精科实业有限公司);AB-8型大孔吸附树脂(天津南开大学);柱色谱及薄层色谱用硅胶(青岛海洋化工厂);Sephadex LH-20(Amersham Pharmacia Biotech AB公司)，所用试剂均为国产分析纯。

昆仑雪菊药材采自新疆南疆皮山县，由新疆药物研究所杨伟俊副研究员鉴定为两色金鸡菊Coreopsis basalis的干燥花蕾，样品储存于新疆药物研究所。

2 提取与分离

昆仑雪菊药材1.0 kg，以95%乙醇回流提取三次，减压浓缩至浸膏;浸膏以水混悬后上大孔吸附树脂，分别以水、30%、50%、70%和95%乙醇洗脱。取50%乙醇洗脱部位10.00 g，以甲醇溶解得到甲醇溶解物1.92 g。甲醇溶解物减压浓缩后上ODS RP-18 柱，再以水:甲醇(1∶0→0∶1)梯度洗脱，其中20%甲醇部分再经反复Sephadex LH-20纯化得到化合物1(93 mg)和2(20 mg);30%甲醇部分再经反复Sephadex LH-20纯化得到化合物3(11 mg)、4(72 mg)、5(8 mg);40%甲醇部分再经反复Sephadex LH-20纯化得到化合物6(5 mg)和7(6 mg)。

3 结构鉴定

化合物1 白色粉末(甲醇)，mp.240～242℃;1%三氯化铁溶液显色呈黄绿色，10%硫酸乙醇溶液显色呈黄色;1H NMR(DMSO-d6，600 MHz)δ:9.01(1H，s，4'-OH)，9.05(1H，s，8-OH)，8.52(1H，s，3'-OH)，7.23(1H，dd，J=8.4 Hz，H-5)，6.86(1H，d，J=8.4 Hz，H-6)，6.91(1H，d，J=1.8 Hz，H-2')，6.78(1H，d，J=7.8，1.8 Hz，H-6')，6.74(1H，d，J=7.8 Hz，H-5')，5.39(1H，dd，J=12.6，3.0 Hz，H-2)，2.68(1H，dd，J=16.8，3.6 Hz，H-3α)，3.11(1H，dd，J=16.8，12.6 Hz，H-3β)，4.81(1H，d，J=7.8 Hz，H-1'');13C NMR(DMSO-d6，150 MHz)δ:79.2(C-2)，43.4(C-3)，191.1(C-4)，118.0(C-5)，109.0(C-6)，150.7(C-7)，135.1(C-8)，150.5(C-9)，114.5(C-10)，129.9(C-2')，115.2(C-2')，145.1(C-3')，145.2(C-4')，116.5(C-5')，116.5(C-6')，101.5(C-1'')，73.2(C-2'')，77.3(C-3'')，69.5(C-4'')，75.7(C-5'')，60.6(C-6'')。以上理化性质与波谱数据与文献［4］报道一致，故推断该化合物为异奥卡宁 7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Isookanin 7-O-β-D-glucopyranoside，又名黄诺马甙flavanomarein)。

化合物2 淡黄色粉末(甲醇)，mp.217～220℃;1%三氯化铁溶液显色呈黄绿色，10%硫酸乙醇溶液显色呈黄色;1H NMR(DMSO-d6，600 MHz)δ:12.22(1H，s，5-OH)，9.34(1H，s，4-OH)，9.28(1H，s，3-OH)，8.42(1H，s，6-OH)，7.70(1H，d，J=1.8 Hz，H-2')，7.52(1H，d，J=1.8，8.0 Hz，H-6')，6.89(1H，d，J=8.0 Hz，H-5')，6.92(1H，s，H-3)，5.01(1H，d，J=7.2 Hz，H-1'');13C NMR(DMSO-d6，150 MHz)δ:147.4(C-2)，135.6(C-3)，176.1(C-4)，151.5(C-5)，129.8(C-6)，148.1(C-7)，93.6(C-8)，147.7(C-9)，105.8(C-10)，122.0(C-1')，115.3(C-2')，145.0(C-3')，145.3(C-4')，115.5(C-5')，119.9(C-6')，100.9(C-1'')，73.2(C-2'')，77.2(C-3'')，69.8(C-4'')，75.8(C-5'')，60.6(C-6'')，以上理化性质及波谱数据与文献［5］报道一致，故推断该化合物为栎草亭-7-O-β-D-葡萄糖苷 (Quercetagetin-7-O-β-D-glucopyranoside)。

化合物3 桔黄色粉末(甲醇)，mp.197～200℃;1%三氯化铁溶液显色呈黄绿色，10%硫酸乙醇溶液显色呈黄色;1H NMR(DMSO-d6，600 MHz)δ:13.21(1H，s，2'-OH)，9.81(1H，s，4-OH)，9.11(1H，s，3-OH)，8.48(1H，s，3'-OH)，7.78(1H，d，J=8.0 Hz，H-6')，7.70(1H，d，H-β)，7.70(1H，d，H-α)，7.29(1H，brs，H-2)，7.24(1H，dd，J=8.4 Hz，H-6)，6.82(1H，d，J=8.4 Hz，H-5)，6.76(1H，d，J=8.0 Hz，H-5')，4.92(1H，d，J=6.0 Hz，H-1'');13C NMR(DMSO-d6，150 MHz)δ:126.2(C-1)，116.0(C-2)，145.6(C-3)，149.1(C-4)，115.8(C-5)，122.6(C-6)，192.7(C=O)，145.3(C-β)，118.7(C-α)，115.7(C-1')，152.5(C-2')，134.5(C-3')，150.6(C-4')，106.5(C-5')，121.6(C-6')，100.9(C-1'')，73.2(C-2'')，77.4(C-3'')，69.8(C-4'')，75.9(C-5'')，60.7(C-6'')。以上理化性质及波谱数据与文献［6］报道一致，故推断该化合物为马里苷(marein，奥卡宁 4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 Okanin 4'-O-β-D-glucopyranoside)。

化合物4 桔红色粉末(甲醇)，mp.225～227℃;1%三氯化铁溶液显色呈黄绿色，10%硫酸乙醇溶液显色呈黄色;1H NMR(DMSO-d6，600 MHz)δ:7.68(1H，d，J=8.4 Hz，H-6')，7.65(H，d，H-β)，7.65(1H，d，H-α)，7.27(1H，dd，J=1.8 Hz，H-2)，7.20(1H，J=1.8，8.4 Hz，H-6)，6.81(1H，d，J=8.4 Hz，H-5)，6.43(1H，d，J=8.4 Hz，H-5');13C NMR(DMSO-d6，150 MHz)δ:126.1(C-1)，115.7(C-2)，145.5(C-3)，148.9(C-4)，115.6(C-5)，122.2(C-6)，191.9(C=O)，144.4(C-β)，118.7(C-α)，113.2(C-1')，153.4(C-2')，132.3(C-3')，152.5(C-4')，107.6(C-5')，117.3(C-6')。以上数据与文献［7］报道一致，故鉴定为奥卡宁(okanin)。

化合物5 灰黄色粉末(甲醇)，1%三氯化铁溶液显色呈黄绿色，10%硫酸乙醇溶液显色呈黄色;1H NMR(DMSO-d6，600 MHz)δ:12.97(1H，s，5-OH)，10.82(1H，s，7-OH)，9.91(1H，s，4'-OH)，9.41(1H，s，3'-OH)，7.39(1H，d，J=2.4 Hz，H-2')，7.42(1H，d，J=8.0，2.4 Hz，H-6')，6.89(1H，d，J=8.0 Hz，H-5')，6.67(1H，s，H-3)，6.44(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，6.19(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)。以上波谱数据与文献［8］报道一致，并与木犀草素对照品共薄层，Rf一致，故推断该化合物为木犀草素(luteolin)。

化合物6 淡黄色粉末(甲醇)，1%三氯化铁溶液显色呈黄绿色，10%硫酸乙醇溶液显色呈黄色;1H NMR(DMSO-d6，600 MHz)δ:12.49(1H，s，5-OH)，7.67(1H，d，J=2.4 Hz，H-2')，7.53(1H，d，J=8.4，2.4 Hz，H-6')，6.88(1H，d，J=8.4 Hz，H-5')，6.39(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，6.18(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)。以上波谱数据与文献［9］报道一致，并与槲皮素对照品共薄层，Rf一致，故推断该化合物为槲皮素(quercetin)。

化合物7 灰白色粉末(甲醇)，1%三氯化铁溶液显色呈黄绿色，10%硫酸乙醇溶液显色呈黄色;1H NMR(DMSO-d6，600 MHz)δ:7.17(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.51(1H，d，J=8.0 Hz，H-6)，6.92(1H，d，J=1.8 Hz，H-2')，6.78(1H，d，J=7.8，1.8 Hz，H-6')，6.74(1H，d，J=7.8 Hz，H-5')，5.37(1H，dd，H-3)，3.02(1H，dd，H-2α)，2.65(1H，dd，H-2β);13C NMR(DMSO-d6，150 MHz)δ:78.9(C-2)，43.4(C-3)，190.5(C-4)，117.8(C-5)，109.5(C-6)，152.3(C-7)，132.8(C-8)，151.0(C-9)，114.2(C-10)，130.0(C-1')，114.3(C-2')，145.0(C-3')，145.4(C-4')，117.2(C-5')，115.1(C-6')。以上理化性质及波谱数据与文献［10］报道一致，故推断该化合物为8-羟基黄颜木素(8-Hydroxyfustin，2S-3'，4'，7，8-tetrahydroxyflavanone)。

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