冷沉淀制备技术在血液成分制备中的临床应用效果浅析

王万仲 张雪 王艳

冷沉淀是一种白色絮状物血液成分，广泛应用于血友病患者、低血容量性休克并发DIC和先天性或获得性凝血因子VIII缺乏症和纤维蛋白原缺乏症的治疗中。是由新鲜冰冻血浆在2℃～6℃条件下制备而成，主成分主要含有凝血因子Ⅷ、纤维蛋白原和血管性血友病因子、纤维结合蛋白、凝血因ⅹIII等。随着医疗技术的不断发展，冷沉淀制备技术在临床应用中表现出越来越重要的作用。冷沉淀在零下30℃以下冰冻保存，从采血之日起有效期为一年，笔者对我州近年来的冷沉淀制备技术与冷沉淀的临床应用效果分析如下。

1 冷沉淀的制备与质量

1.1 冷沉淀的制备 选取街头采集的全血300～400 ml，在6～8 h内分离出新鲜冰冻血浆，在零下50℃平板速冻机中冰冻成块状，再储存于零下30℃的冰箱中保存。在制备冷沉淀时，将保存的新鲜冰冻血浆放置在4℃的环境下分离出白色絮状物即为冷沉淀。其制备方法主要有改良快速融化离心法和水浴虹吸法两种方法。改良快速融化离心法是把新鲜冰冻血浆放入到4℃的水浴箱内，等到血浆融化超过二分之一后将还没有融化的血浆捏碎成碎冰块，加速血浆的溶解，约1 h后，将还存有少许的血浆冰块取出，在零度、离心力3000 g的条件下离心10 min。在100级净化台上分离出上层血浆，剩下的下层血浆和白色沉淀物就是冷沉淀。水浴虹吸法是把新鲜冰冻血浆放在4℃的恒温循环水浴箱中，将另外一个与新鲜冰冻血浆相连通的空转移袋悬空在水溶箱外并低于新鲜冰冻血浆袋的高度，两个袋子之间产生一定的落差，融化的血浆通过虹吸原理缓慢流入空袋中，剩余的约40～50 ml血浆块就是冷沉淀[1]。整个过程要检测水的温度并进行调节。两种方法在制备的时间上相差不大。改良快速融化法虽然需要离心10 min，但是在血浆融化的过程中加入了捏碎步骤，减少了血浆融化的时间。但改良快速融化离心法在整个操作过程中，受到人为影响较多，操作过程也比较复杂。而水浴虹吸法受人为因素影响较小，所需的仪器也比较简单。所以，近来水浴虹吸法在冷沉淀制备中越来越受欢迎。

1.2 冷沉淀的质量 冷沉淀的质量主要是受到温度和时间的影响，在制备的过程中需要控制室温、掌握时间。有实验证明，经过亚甲蓝杀除病毒的血浆制备的冷沉淀和原血浆制备的冷对比，发现FVIII的活性下降了28%，而血管性血友病引子的活性下降了12%，纤维蛋白原的浓度也下降了45%[2]。另一个实验是在4℃的环境下保存18 h的血液的FVIII和在6℃下保存了8 h的相比下降了25%[3]，这也说明冷沉淀制备受到温度的影响。新鲜冰冻血浆一旦融化，FVIII的活性在12 h之内下降了42%，到了24 h之后，则下降了44%，FVIII的活性随着时间的延长而下降[4]。这些都说明冷沉淀的质量主要是受温度和时间的影响。因此，在制备冷沉淀的时候，一定要注重对时间和温度的控制。只有控制好时间和温度，才能制备出高质量的冷沉淀。

2 冷沉淀的临床应用和效果

2.1 冷沉淀的临床应用 冷沉淀主要应用于补充凝血因子VIII、vWF、纤维蛋白原、因子ⅩⅢ等。冷沉淀通过形成纤维蛋白膜对溃疡创面形成机械性牵拉作用，从而收缩创口[5]，而大量的I、VIII等凝血因子又可以使患者体内的凝血因子迅速上升，促进患者的凝血功能。因而冷沉淀可以用于体内凝血因子活性降低或者丧失的凝血因子缺乏症以及外科手术和肝脏移植手术中[6]。在外科手术中，可以一次注射冷沉淀15～20 U。在Fg缺乏症的治疗中，使用量通常低于1.0 U一次。如果心脏手术后出现凝血功能障碍，出现出血、渗血的情况，可以使用FVII。FVII可以减少输血的计量而且凝血功能也会得到改善。冷沉淀中富含FVII、FVIII和纤维蛋白原、因子ⅩⅢ等。输入体内有助于凝血酶的形成，有利于患者止血功能的形成。手术中需要大量输血的患者术后风险较高，由于术后患者的肝功能很差，容易发生胃肠道并发症。根据临床资料显示，在手术中使用冷沉淀，可以减少术后的不良反应，提高了手术的成功率。失血性休克患者在输血时会引起微血管出血并发休克，对患者输入冷沉淀之后，凝血指标明显得到改善，在24 h之内有效止血率高达84%。冷沉淀制剂不仅具有良好的单独使用效果，和红细胞、血小板联合使用之后也可以发挥出良好的治疗效果。冷沉淀在外科手术和整形外科的手术中应用较多，不仅可以控制出血，在术后的抗感染和消炎作用也十分的明显。

2.2 冷沉淀的应用效果 冷沉淀具有十分良好的凝血功能，他可以粘附结构蛋白，加固细胞间的结合，防止肿瘤细胞的扩散[7]。对于肝癌和肝脏移植手术的患者来说，冷沉淀的合理使用可以有效的较少在手术中的出血量，促进术后伤口的愈合。对于Fg缺乏症患者来说，冷沉淀明显要比普通的Fg浓缩制剂的效果良好，并且可以快速提高Fg的浓度。在对200名肾炎患者进行冷沉淀输入之后，大部分患者的炎症发展停滞，体内循环再次建立。但是87%使用标准治疗方法的肾炎患者，都出现了病情恶化，甚至出现并发症的情况。由此可见，冷沉淀大大提高了外科手术的治疗效果，对缩短疗程、提高疗效具有重要的作用。肝脏患者在手术中容易发生凝血功能紊乱的现象，这也是因为肝病本身造成的凝血因子减少的原因。冷沉淀可以补充各种凝血因子，坚守术中出血和术后感染的几率[8]。部分血友病患者在进行血液制品治疗之后产生FVIII的抑制物。这种抑制物在患者免疫较低的情况下发生率较高。但是，通过注射冷沉淀可以使细胞建立对抑制物的免疫能力[9]。这说明使用冷沉淀可以减少血友病患者在治疗过程中产生的不良反应。但是单独使用冷沉淀不能形成持久的免疫能力，对于滴注量高、反应高的抑制物患者的治疗效果不佳。而且研究表明，年龄越小的患者越容易产生抑制物。所以在对不到一周岁的血友病患儿的治疗中尽量不要输入冷沉淀等含有FVIII的制品。

冷沉淀制备技术在血液成分制备中的应用，可以更好地满足临床治疗，满足对于成分血的要求，为手术患者、DIC患者、血友病患者、纤维蛋白原缺乏症等患者提供了治疗保证。正确使用冷沉淀，可以缩短疗程，提高疗效，对临床治疗中具有重大的意义。但是我们也不能盲目使用冷沉淀，应该根据患者自身的情况酌量使用。

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