糖尿病肾病早期诊断中尿微量蛋白和Ⅳ型胶原检测的应用研究

张维超

（江苏淮安市洪泽县唯康诊所 江苏 洪泽 223100）

糖尿病是我国国民比较关心的疾病之一，因为主要其是由于我国生活水平的提高导致的一种“富贵病”，糖尿病最可怕的不是其本身，而是其并发症，糖尿病肾病就是其中一种严重慢性并发症，常常会导致患者死亡，因此及早对其进行诊断可以大大减少患者的死亡率，提高预后，通常在早期肾活检会发现组织学改变但是患者临床上却无症状另外尿常规以及肾功能的检查可正常。目前实验室诊断多以尿微量蛋白以及肌酐等来进行诊断指标［1］，不过这些指标对于早期肾病变也不易发现，目前主要采用尿微量蛋白和Ⅳ型胶原检测进行早期诊断，现将其报道如下：

1 资料和方法

1.1 一般资料：选自我院自2007年3月－2009年4月期间收治的糖尿病患者50例，其中男27例，女23例，年龄34岁－67岁之间，平均年龄54.2岁，以上患者无其他原因导致肾脏问题，符合WHO诊断标准：空腹血糖≥7.8mmol／L或是2h餐后血糖≥11.1mmol／L。另选50例健康人进行对照检测，其中男26例，女24例，年龄32岁－65岁之间，平均年龄53.8岁。

1.2 方法：对以上所有患者以及健康人群采用免疫比浊法来测定尿微量蛋白，进行尿RBP、TRF的测定以及尿IV－C的测定。

1.3 观察指标：患者m ALB／Cr，RBP／Cr，TRF／Cr以及IV－C进行比较。

1.4 统计学方法：数据均用专业的统计分析软件进行处理。计量数据采用t检验，所有计数数据然后采用χ2进行检验，并且P＜0.05为对比差异有统计学意义。

2 结果

通过上述研究，我们得出以下结果：根据尿微量蛋白排泄率的比较，我们将糖尿病组患者分为无肾病组其中16人，尿微量蛋白排泄率＜30mg／h，初期肾病组16人，尿微量蛋白排泄率30－300mg／h，临床肾病组18人，尿微量蛋白排泄率＞300mg／h，健康组m ALB／Cr为1.91mmol／L，RBP／Cr为2.15 mmol／L，TRF／Cr为1.79mmol／L以及IV－C为45.78mmol／L；无肾病组患者m ALB／Cr为5.98mmol／L，RBP／Cr为15.31 mmol／L，TRF／Cr为5.95mmol／L以及IV－C为91.34mmol／L；初期肾病组m ALB／Cr为27.31mmol／L，RBP／Cr为29.21 mmol／L，TRF／Cr为19.89mmol／L以及IV－C为149.21mmol／L；临床肾病组m ALB／Cr为53.26mmol／L，RBP／Cr为44.89 mmol／L，TRF／Cr为36.41mmol／L以及IV－C为261.65mmol／L，详细可以参考表1，糖尿病组根据尿微量蛋白排泄率分组以及表2，健康组与糖尿病组各个分组的尿微量蛋白与IV型胶原蛋白比较（人，mmol／L）。

3 讨论

肾脏作为重要的排泄器官之一，其器质性损伤或功能性减退可引起多个系统的紊乱和重要脏器的损伤。肾小球滤过膜，肾小管的结构以及重吸收功能易受各种致病因子的作用，导致尿中蛋白含量增加，蛋白尿形成。然而目前医院常用的实验室常检查很难发现早期的肾损伤。糖尿病体内血糖长期处于高水平，使体内非酶糖酰化速率提高，引起组织缺氧和血液粘滞度升高；并且血管内皮细胞释放CO，内皮素等活性因子使肾小球毛细血管扩张，肾小球滤过率长期升高，导致肾脏损伤。糖尿病DM患者的肾小球滤过膜上的硫酸乙酰肝素减少，使肾小球滤过膜两侧的极性减弱进而破环电荷选择的屏障作用，导致尿液中m A1b、TF浓度升高。糖尿病肾病是糖尿病的晚期并发症，治疗困难，重在早预防，早诊断，早治疗。所以，应将尿微量列为常规实验室检查项目，提高糖尿病肾病的早期诊断机率。有糖尿病肾病并发症患者的死亡率高出没有糖尿病肾病的糖尿病患者近30倍，目前临床上仍缺乏有效的治疗手段来遏制其病情发展，因此早期的诊断对其预后同样尤其重要。但糖尿病肾病早期与肾病相关的症状少且不明显，微量蛋白尿也不容易引起注意，这样很多糖尿病肾病患者都是在尿蛋白明显身高的情况下被发现，而此时的病情发展一般已经无法逆转［2］。

表1 糖尿病组根据尿微量蛋白排泄率分组

表2 健康组与糖尿病组各个分组的尿微量蛋白与IV型胶原蛋白比较（人，mmol／L）

TF是糖尿病肾病最敏感、最早的诊断指标。TF比血清蛋白的分子量稍大，是Fe3＋的主要转运蛋白，所以其带有的负电荷量较少，而蛋白所带负电荷越少越容易通过肾小球的电荷屏障。在肾小球滤过膜的功能正常时，TF基本无法从血液中滤出进入源尿，当肾小球滤过膜早期受损负电荷屏障减弱时时，TF相比于清蛋白则更容易从血浆中滤出。所以当糖尿病患者肾小球滤过膜负电荷屏障受损时，尿中的TF的增加比血清蛋白的增加出现早。实验结果也显示，在实验组与对照组的尿m A1b相近时，TF已有明显升高趋势，这也表明了TF是糖尿病肾病早期诊断的重要敏感指标之一。同时也有人把TF、NAG、m A1b及RBP合称作尿系列蛋白，对糖尿病肾病有重要的早期诊断价值。NAG的分子量较大，其在尿液中稳定，正常情况下不能从肾小球中滤过；所以NAG是反映肾小球实质性损伤的重要指标。生物毒素、免疫因子、自由基以及化学毒素等各种致病因子侵犯溶酶体靶位，并迅速诱导溶酶体酶释放。因此尿中NAG可以作为肾小球肾小管损伤的标志物之一，其量的多少和出现是时间与病情严重程度有相关性。在实验组与对照组的尿m A1b浓度无差异的情况下，尿中NAG含量已有增高；因此尿中NAG同时也是糖尿病肾损早期诊断的理想指标之一。RBP的分子量为21.2＞103u属低分子量蛋白，在从肾小球滤出后，几乎全部在近端小管处被重吸收。在实验组的尿m ALb浓度尚与对照组的相近时，尿中RBP已经明显升高并产生统计学意义。RBP的生成相对恒定，本身稳定性较好，且尿中排泄量相对稳定；故RBP也可作为肾小管功能损伤的灵敏指标之一。

同时这也表明了，糖尿病患者的RBP的明显升高是在尿中血清蛋白浓度升高之前；即糖尿病患者的肾小管损伤在早期肾小球未发生功能障碍之前已经出现。Ⅳ－C是构成细胞基底膜骨架的主要成分，即是细胞外基质的主要构成部分。其在尿中含量非常低，所以我们用PEG－400沉淀大分子蛋白测定发，实验结果同样表明在实验组Ⅳ－C有升高趋势，其在尿中m ALb含量正常时已出现增加，即在肾小球基底膜功能受损较轻时已经出现升高。且其含量与糖尿病肾病患的病情严重程度有正相关性，是糖尿病肾病病情发展的指标。最近，Kotajima等通过一种无需尿浓缩的高敏感度方法，同时加入Tris缓冲液除去干扰物，对Ⅳ－C进行测定表明，糖尿病患者的尿血清蛋白未出现异常时，尿中Ⅳ－C含量已经明显增加，同时糖化血红蛋白水平也有升高，这些都证实了尿中Ⅳ－C是糖尿病肾病的有效标志物之一。

综上所述，尿微量蛋白和Ⅳ型胶原检测对糖尿病肾病早期诊断是有帮助的，值得临床深究推广。

［1］ 姚春艳，杨沛，府伟灵等.检测尿微量蛋白和Ⅳ型胶原对糖尿病肾病早期诊断的意义［J］.第三军医大学学报，2000，22（2）：160－162

［2］ 庄贵祥.糖尿病肾病早期诊断中尿微量蛋白和Ⅳ型胶原检测的应用研究［J］.求医问药：下半月刊，2012，10（6）：712