紫外分光光度法测定伊维菌注射液中伊维菌素B1的含量

孙永泰

（辽宁省辽中县北一路75号，辽中 110200）

伊维菌素为抗生素类药，含有2种有效成分，即含有高于80%的22-23-双氢埃维菌素B1a和低于20%的22-23-双氢埃维菌素B1b［1］。伊维菌素注射液对线虫、昆虫和螨均具有驱杀作用，《中国兽药典》［2］规定其含量测定采用高效液相色谱法，该方法测定结果准确，但对实验设备要求高，一般兽药厂难以达到。笔者等采用紫外分光光度法测定伊维菌素注射液中伊维菌素B1含量，操作简便、快速，结果满意。

1 仪器与试剂

美国UnicamUV-300型紫外分光光度计；伊维菌素原料、伊维菌素注射液由武汉光牧生化科技有限公司提供；伊维菌素对照品源于中国兽医药品监察所，批号KY31297；甲醇为分析纯。

2 方法与结果

2.1 伊维菌素备用溶液的制备

取伊维菌素约40mg，精密称定，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀即得。

2.2 伊维菌素吸收度测定

吸取上述备用液3 mL，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用紫外分光光度法于200～400 nm测定其吸收度，结果在238 nm和245nm处有最大吸收，其中245nm处吸收度最大。

2.3 伊维菌素紫外吸收标准曲线的绘制

取伊维菌素备用液，分别用甲醇稀释成4.0、8.0、12.0、16.0、20.0、24.0、28.0 μg/mL 溶液，用甲醇作空白，于1 cm石英比色池中，在245 nm处测定其吸收度，得标准曲线：

C＝26.5404A－0.5323，r＝0.9999

结果表明，伊维菌素 B1浓度在 4.0～28.0 μg／mL 范围内时与吸收度呈良好线性关系，符合朗伯－比尔定律。

2.4 回收率试验

加处方比例的溶剂适量，按上法操作，在245 nm处测定其吸收度，符合《中国兽药典》（2000年版）要求。

精密称取伊维菌素适量（约含伊维菌素B140 mg）与处方比例的溶剂4 mL，置50 mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀。精密吸取2 mL，用甲醇稀释至100 mL，摇匀，于245 nm处测定吸收度。另取伊维菌素对照品，按上法同样操作，根据二者吸收度比值计算伊维菌素B1含量。5次测定结果回收率在99.81%～100.31%之间，平均回收率为 100.06%，RSD 为 0.21%（n＝5）。结果见表1。

表1 回收率试验结果（n＝5）

2.5 稳定性试验

取回收试验项下溶液，在室温、暗处存放不同时间，依次于245nm处测定吸收度，结果见表2。

由表2结果可见，伊维菌素4 h内吸收度基本保持不变，4h后测各溶液吸收曲线、峰形、λmax均保持不变。

表2 稳定性试验结果

2.6 样品含量测定

2.6.1 紫外法 精密吸取伊维菌素注射液4 mL（含伊维菌素40 mg），置50 mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，精密吸取2mL置100mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，于245nm处测定吸收度。另取伊维菌素对照品，按上法同样操作，根据二者吸收度比值计算伊维菌素B1含量。

2.6.2 高效液相色谱法 精密吸取伊维菌素注射液4mL（含伊维菌素40 mg），置200 mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，按《中国兽药典》［2］伊维菌素注射液含量测定方法操作。结果见表3。

表3 紫外法与高效液相法测定结果比较%

3 小结

经与高效液相色谱法比较可知，采用紫外分光光度法测定伊维菌素注射液中伊维菌素B1含量，操作简便，快速，重现性好，结果满意。且该方法可定量检测伊维菌素B1（B1a＋B1b），适用于生产单位对该产品及中间体的含量控制。