普洱茶调节高脂血症大鼠血脂水平的研究

江新凤 邵宛芳 刘彩霞

(1.江西省蚕桑茶叶研究所 330202; 2.云南农业大学龙润普洱茶学院 650201)

普洱茶是我国历史悠久的特种茶，民间饮用普洱茶的人认为普洱茶具有消食、去腻、减肥、降血脂等功效，先人的茶药总结，往往是凭感官、经验而得，多数是知其然而不知其所以然。而如今随着科学技术的进步，普洱茶药效引起了国内外专家、学者们的特别关注，到目前为止，研究者们已对茶叶的降血脂、抗氧化、抗癌及防治心脑血管疾病、减肥、消炎、健齿护牙等功效开展了一系列的研究，但用普洱茶茶汤灌胃的研究报道较少。本研究旨在初步探讨普洱茶调节血脂和预防脂肪肝作用，为进一步研究和探讨普洱茶的保健作用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1)茶叶原料:普洱茶(生茶)、普洱茶(熟茶):由云县天龙生态茶叶有限责任公司生产;生产时间:2007年6月。经检测:普洱生茶的水分含量9.08%＜13%，总灰分4.98% ＜7.5%，水浸出物质48.83%＞35.0% ，茶多酚33.7% ＞20%;普洱熟茶的水分含量9.97 % ＜14.0%，总灰分8.12% ＜8.5%，水浸出物质30.82% ＞28.0%，茶多酚11.8% ＜15%，成分符合《地理标志产品普洱茶》国家标准(GB/T22111 －2008)的规定，说明受试茶样品质合格，并具有一定的代表性。

2)对照药品:调节血脂中药(XZK)，药店购买。

3)实验动物:SD 雄性大鼠100 只，购于昆明医学院实验动物中心，许可证号:SYXK(滇)2005 －0008，饲养于昆明医学院天然药物研究所SPF 级重点实验室。

1.2 实验试剂

总胆固醇(TCHO)、甘油三脂(TG)购于北京中生生物工程技术公司;低密度脂蛋白胆固醇(LDL －C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL－C)。

1.3 主要仪器

RE－52AA 旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂;TMS－1024 全自动生化分析仪，日本京都;Leica RM－2145 石蜡包埋切片机，德国制造;Leica EG1160包埋机:德国制造;Leica APS200 组织脱水机，德国制造。

1.4 茶汤及药的制备

1.4.1 茶汤制备方法［1］

普洱茶100g→沸水浸提三次(各次茶水比为1:20;1 :20;1:10;浸提时间分别为20min、20min、10min)→脱脂棉过滤→合并三次浸提茶汤→滤液减压浓缩至100mL(浓缩温度60℃)→装瓶灭菌备用。(其茶汤浓度为1 g 茶/mL)。茶汤一周浓缩一次，浓缩后的茶汤低温冷藏(4℃)，灌胃前充分摇匀，现配现用。

1.4.2 药的制备

准确称取2g 市售降脂药研钵内研细，放入烧杯中，加入蒸馏水搅拌溶解后定容至50mL，即为4%市售对照药溶液，现配现用。

1.5 动物饲料的制备

鼠用营养颗粒饲料，高压灭菌，常温贮存。自制高脂饲料其比例为:基础饲料788 g/kg，猪油100g/kg，蛋黄粉100g/kg，胆固醇10g/kg，胆盐2g/kg［2］。

1.6 动物分组及试验方法

SD 大鼠100 只适应性饲养一周后，10 只饲喂基础饲料，其余饲喂高脂饲料，饲喂28 天，高脂模型建成后，挑选80 只高脂血症大鼠按血清TC 水平和体重随机分为8 组，10 只/组。试验处理9 个:空白对照组，高脂模型组，药物对照组，生茶低剂量组，生茶中剂量组，生茶高剂量组，熟茶低剂量组，熟茶中剂量组，熟茶高剂量组。低、中、高剂量分别为0.5g/kg·bw，1.0g/kg·bw，2.0g/kg·bw，经口灌胃，空白对照组、高脂模型组灌胃蒸馏水。灌胃量为10mL/kg·bw。受试物30 天后，SD 大鼠禁食12h，股动脉采血，收集血样，分离血清，分装待测。参照试剂盒说明书进行TCHO、TG、LDL －C、HDL －C 含量测定，同时观察腹腔各脏器外观并摘取肝组织进行常规HE 染色，以观察其病理变化。

1.7 肝脏病理诊断标准

根据2006年2月中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组制定的《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》［3］，依据肝细胞脂肪变性占据所获取肝组织标本量的范围，可将肝细胞脂肪变性程度分为4 度(F0 －F4):F0 ＜5%肝细胞脂肪变性;Fl 为5%～30%肝细胞脂肪变性;F2 为31% ～50%肝细胞脂肪变性;F3 为51% ～75%肝细胞脂肪变性;F4 为75%以上肝细胞脂肪变性。炎症程度可分3 级(G0－G3);GO 为无炎症;G1 灶状肝细胞炎症或点状肝细胞坏死;G2 小片状肝细胞炎症或坏死;G3 为大片状肝细胞炎症或坏死。

1.8 统计分析方法

2 结果与分析

2.1 对大鼠体重的影响

表1 普洱茶对高脂血症SD 大鼠体重的影响(X ±SE)

给药前(T0)，各给药组体重明显高于阴性对照组，与模型组相当。表明造模结束后根据TC 随机分组，体重间无明显差异，给药前的分组科学。从统计表1 中可以看出高脂模型组体重增长最为迅速，而灌胃普洱茶生茶和熟茶的各剂量组大鼠体重均有一定程度的抑制。

2.2 普洱茶对SD 大鼠血脂水平的影响

由表2 可见大鼠血清中总胆固醇(TC)普洱茶熟茶各剂量组与正常大鼠组水平接近，其余各组与高脂模型组相近;甘油三脂(TG)含量各给茶组明显低于高脂模型组，其中XZK 对照组与模型组相当;高密度脂蛋白(HDL－C)各给茶组均高于模型组和XZK 对照组;低密度脂蛋白(LDL －C)均低于高脂模型组。

2.3 普洱茶对SD 大鼠AI 值的影响

如图1，普洱茶茶组AI 值与高脂模型组AI 值(为0.64 ±0.07)相比，茶组的动脉粥硬化指数(AI值)明显偏低，且具有显著性差异。与阴性对照组相比，给茶组稍高于阴性对照组;其中XZK 对照组AI 系数明显高于其他各组。说明普洱茶能很好的抑制动脉粥样硬化的产生，其中熟茶作用更明显，其作用明显优于XZK 降脂药。

表2 大鼠血清TC、TG 、HDL－C 及LDL－C 水平(mmol/L)的影响( ±SE)

表2 大鼠血清TC、TG 、HDL－C 及LDL－C 水平(mmol/L)的影响( ±SE)

组别TCTGHDL－CLDL－C阴性对照1.61 ±0.05BC0.31 ±0.03BC1.41 ±0.01BC0.15 ±0.06 BC高脂模型2.42 ±0.08A0.83 ±0.09A1.30 ±0.08A1.05 ±0.21A XZK 对照组2.36 ±0.16A0.80 ±0.14A1.33 ±0.14A0.85 ±0.41A生茶低剂量2.40 ±0.16A0.24 ±0.04BC1.60 ±0.12ABC0.96 ±0.33A生茶中剂量2.29 ±0.15bA0.24 ±0.36BC1.69 ±0.13ABC0.78 ±0.36A生茶高剂量2.32 ±0.15bA0.28 ±0.05BC1.70 ±0.16ABC0.42 ±0.34BC熟茶低剂量1.92 ±0.07bA0.11 ±0.02aBC1.42 ±0.08bc0.63 ±0.43AB熟茶中剂量1.96 ±0.07Bc0.20 ±0.04BC1.45 ±0.07bC0.32 ±0.19BC熟茶高剂量1.84 ±0.05BC0.22 ±0.03BC1.49 ±0.04bC0.33 ±0.12 BC

图1 普洱茶对高脂血症大鼠AI 值的影响

2.4 普洱茶对大鼠肝脏脂肪变性的影响

除阴性对照组外(见表3)，所有动物可见肝细胞脂肪空泡增多，有的泡被挤至一侧，病变程度组间有明显差别:普洱生茶、熟茶6 个剂量组肝脏脂肪变性明显轻于模型组及XZK 对照组。熟茶3 个剂量组组间病变程度无明显差异。普洱茶生茶高剂量组与普洱茶熟茶三个剂量组病变程度基本相当，变性程度轻于生茶中、低剂量组。表明普洱茶生茶、熟茶均有明显防治高脂饮食引起的SD 大鼠肝脏脂肪变性的作用，其作用优于XZK 对照组，熟茶作用优于生茶。

表3 及图1 结果显示，肝脏脂肪病变程度和血脂指标一致，即普洱茶熟茶效果优于普洱茶生茶，且与剂量成正相关。

表3 普洱茶对高脂血症大鼠肝脏脂肪病变程度

3 结论

普洱茶能很好地抑制大鼠体重增长，延缓大鼠肥胖的发生。［4］

普洱茶能改善高脂血症大鼠的血脂水平。血清生化检测结果表明，普洱茶生茶和普洱茶熟茶可降低大鼠血清TC、TG、LDL － C 水平，升高大鼠血清HDL－C 水平。降低LDL －C 效果普洱茶熟茶优于普洱茶生茶;升高大鼠血清HDL －C 水平普洱茶生茶优于普洱茶熟茶，普洱茶熟茶低、中、高剂量组分别升高7.74%、7.74%、6.43%。其原因可能是普洱茶生茶和普洱茶熟茶的内含成分差异导致。［5～6］

普洱茶能预防大鼠脂肪肝变性。试验结果表明:普洱茶生茶中、高剂量组和普洱茶熟茶低、中、高剂量组极显著降低AI 值(P ＜0.01，)，说明普洱茶能改善血管内皮功能，可减少机体对AS 和CHD 的易患性，而且具有明显的抗AS 和预防心血管疾病作用，从而达到治疗高脂血症和动脉硬化的作用，普洱茶组能很好地抑制SD 大鼠脂肪肝的变性。

［1］刘勤晋，陈文品，白文祥.普洱茶急性毒性安全性评价研究报告［J］.茶叶科学，2003，23(2):141 ～145.

［2］Yeh CW，Chen WJ，Chiang CT，et a1. Suppression of fatty acid synthase in MCF－7 breast cancer cells by tea and tea polyphenols:a possible mechanism for their hypolipidemic efects. J Pharmacogenomics，2003，3(5):267 ～276.

［3］中华医学会肝脏学分会脂肪肝和酒精肝病学组.非酒精性脂肪性肝病诊疗指南［J］.中华肝脏病杂志，2006，14(03):161 ～162.

［4］Y. Hou ，Wf. Shao，R. Xiao，et al. Pu －erh tea aqueous extracts lower atherosclerotic risk factors in a rat hyperlipidemia model［J］. Experimental Gerontology，2009 ，44:434 ～439.

［5］江新凤，邵宛芳，侯艳.普洱茶预防高脂血症及抗氧化的研究［J］. 云南农业大学校报(自然科学版)，2009，24(5):705 ～712

［6］江新凤，邵宛芳.普洱茶对高脂血症大鼠血脂、血浆中血栓B2、6 －酮前列腺素F1α 水平影响［J］.食品科学，2011，32(7):317 ～320