老枞水仙和奇兰不同提取方法的茶多酚含量

林和,叶冰莹,黄鹭强,林清强,何文锦,符永乐,陈由强

（1.福建师范大学生命科学学院,福建福州 350108；2.福建武夷山欣怡生态茶叶园,福建武夷山 354306）

老枞水仙和奇兰不同提取方法的茶多酚含量

林和1,叶冰莹1,黄鹭强1,林清强1,何文锦1,符永乐2,陈由强1

（1.福建师范大学生命科学学院,福建福州 350108；2.福建武夷山欣怡生态茶叶园,福建武夷山 354306）

以老枞水仙鲜叶、奇兰鲜叶为试验材料,采用恒温水浴法与超声波法测定其茶多酚含量,结合2种成品茶进行测定比较.结果表明：采用恒温水浴法与超声波法提取,老枞水仙鲜叶茶多酚含量分别为18.0%和17.8%,奇兰鲜叶茶多酚含量分别为14.4%和14.6%；老枞水仙成品茶茶多酚含量分别为42.18%和42.98%,奇兰成品茶茶多酚含量分别为34.18%和37.12%.研究结果可为老枞水仙品质分析和综合开发利用提供科学依据.

老枞水仙；奇兰；茶多酚；测定

老枞水仙（old fir narcissus）作为武夷岩茶的当家品种名枞之一,其茶叶质绵软,养生成分丰富,是武夷岩茶之望族,栽培历史数百年之久.老枞水仙茶汤味极浓醇且厚重,岩韵突出,滋味甘醇且具有特殊香气,汤水顺滑又兼具有陈年茶之味[1].奇兰（chelan）比较浑厚和醇爽,口感清新,茶性温和,香气馥郁,有隐隐兰香味,含有丰富的茶多酚（tea polyphenol,TP）,具有防癌、抗辐射、强化神经系统的作用,栽培历史也有百年之久.茶多酚是茶叶中的主要活性成分,在茶叶中含量很高,性质极其活泼,能在酶的作用下发生酶促氧化作用,是一种新型的天然抗氧化剂.目前,老枞水仙的茶多酚研究国内外尚未见相关报道,奇兰的成分研究还处于基础阶段.因此,本文对老枞水仙和奇兰的茶多酚含量进行研究,以期为老枞水仙和奇兰的综合开发利用提供科学依据.

1 材料与方法

1.1 试验材料

老枞水仙均为60~80 a树龄,奇兰为20~30 a树龄,鲜茶叶采摘1芽2~3叶,均采于武夷山仙店园区欣怡生态茶叶园,成品茶由福建武夷山欣怡生态茶叶园提供.

1.2 仪器与试剂

HH-4型恒温水浴锅；SHB-Ⅲ型循环水式抽滤装置；722型分光光度计；Thermo D-37520冷冻高速离心机；梅特勒AL104型电子天平,感量0.000 1 g；恒温干燥箱.无水碳酸钠、甲醇、福林酚试剂（均为AR）；没食子酸.

1.3 试验方法

1.3.1 没食子酸标准曲线绘制精确称取没食子酸标样0.110 g（100℃干燥至恒重）置100mL容量瓶中溶解并定容至刻度,摇均；再精确量取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL分别置100mL容量瓶中定容至刻度,其相应质量浓度分别为10、20、30、40、50μg/mL；分别精确量取1mL、水（作空白参照）于20mL刻度试管内,各加入5.0mL福林酚试剂,摇均,反应5min后各加入4.0mL质量分数为7.5%的Na2CO3溶液,加水稀释至刻度,摇均.室温下置60min后于765 nm波长处测定吸光度.实验重复3次,取其均值绘制标准曲线[2]. 1.3.2鲜茶叶样品处理将采集并保存完好的鲜茶叶,分别取100 g于相同条件经100℃恒温烘干1 h称其干物质质量,试验重复3次.计算失水率.

1.3.3 提取液制备分别称取样品干物质经磨粹试样0.5 g于10mL离心管中,加入在70℃水中预热过的体积分数为70%的甲醇溶液5mL,用玻璃棒充分搅拌均匀湿润.采用2种方法提取茶多酚：①立即移入70℃水浴中,浸提10min（隔5min搅拌1次）[3]；②立即移入250W 60℃超声波振荡器中[4-5].两种方法浸提后分别冷却至室温,用高速冷冻离心机（恒温4℃）以3500 r/min离心10min,取上清液转移至10mL容量瓶,残渣再用5mL体积分数为的70%的甲醇溶液提取1次,重复以上操作,合并提取液定容至10mL,摇均,过0.45μm滤膜抽滤.

1.3.4 测试液制备用移液管分别移取1mL过滤后的提取液于100mL容量瓶中,用重蒸溜水定容至刻度,即为测试液.

1.3.5 样品测定用移液管分别移取重蒸溜水（作空白对照用）及不同品种测试液各1mL于20mL刻度试管内,在每一试管内分别加入5mL的质量分数为10%的福林酚试剂（现配）摇均,反应3~5min后,加入4mL质量分数为7.5%的Na2CO3溶液,加水定容至刻度,摇均.室温下放置60min,765 nm波长条件下测定吸光度,并计算TP含量.

1.4 数据处理

试验数据采用DPS数据处理软件进行处理.

2 结果与分析

2.1 没食子酸标准曲线

所得没食子酸标准曲线方程为y=0.009 3x+0.012 6,相关系数R2=0.998 2.达到分光光度法的实验要求.

2.2 鲜茶叶样品的含水率

老枞水仙和奇兰鲜茶含水率见表1.

表1 鲜叶样品的含水率及干物质含量Tab.1 Water ratio and drymatter contentof fresh leaf%

由表1可知,老枞水仙鲜叶含水率为73.57%,奇兰鲜叶含水率为71.07%,老枞水仙鲜叶含水率略高于奇兰鲜叶,原因是老枞水仙表皮上的气孔相对大于奇兰,对水分的散失有着重要的影响[6-7]；老枞水仙干物质含量为26.43%,奇兰干物质含量为28.93%.方差分析结果表明,老枞水仙与奇兰的鲜叶含水率和干物质含量差异均不显著（P＞0.05）.

2.3 鲜茶叶样品TP含量

老枞水仙和奇兰鲜叶TP用不同方法提取时的含量见表2.

表2 恒温水浴法与超声波振荡法提取的鲜叶TP含量Tab.2 Effectof thermostaticwater-bath and ultrasonicmethod on fresh leaf TP content %

注：同列后不同大写字母表示0.01水平差异极显著,下同.

由表2可知,分别采用恒温水浴法和超声波振荡法提取,老枞水仙鲜叶TP含量均高于奇兰.方差分析结果表明,2种方法提取时老枞水仙鲜叶TP含量与奇兰相比差异均达极显著水平.

2.4 两种成品茶TP含量

老枞水仙和奇兰成品茶TP用不同方法提取时的含量见表3.

表3 恒温水浴法与超声波振荡法提取的成品茶TP含量Tab.3 Effectof thermostaticwater-bath and ultrasonicmethod on product tea TP content %

由表3可知,2种样品成茶分别用恒温水浴法和超声波振荡法提取时,其TP含量均高于鲜叶茶较多.可能原因是鲜茶叶在加工各个环节中受到机械损伤后多酚类化合物与多酚氧化酶的成分发生了变化.方差分析结果表明,2种方法提取时老枞水仙成品茶TP含量均极显著高于奇兰.

3 结论

TP是茶叶中主要风味之一,已成为区分茶叶品质高低的标准,TP又是构成茶汤浓度和收敛性的有效成分.本试验结果表明,老枞水仙与奇兰的鲜叶含水率、干物质含量差异均不显著,但分别采用恒温水浴法与超声波振荡法提取时,老枞水仙鲜叶与成品茶中TP含量均极显著高于奇兰.这与老枞水仙生长环境有着一定关系,其原因是老枞水仙根系较发达,比其他岩茶品种发根率高,且茶树叶片气孔与周围环境如松、杉、竹、岩石等为伴,直接影响茶树植株体内物质代谢和生化成分含量变化的植被生态条件明显优于奇兰[6].鲜叶经过一系列深加工后,TP含量发生明显的变化,可作为区分品种间的品质成分检测分析[8],也可作为日后综合开发利用老枞水仙提供科学依据.

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Content of tea polyphenol in old fir narcissusm and chelan extracted w ith differentmethod

Lin He1,Ye Bingying1,Huang Luqiang1,Lin Qingqiang1,HeWenjin1,Fu Yongle2,Chen Youqiang1
（1.Collegeof Life Sciences,Fujian NormalUniversity,Fuzhou 350108,China；2.FujianWuyiMoumtain XinyiEcology Tea Plantation,Wuyishan 354306,China）

Thermostatic water-bath and ultrasonic method were respectively applied to extract the tea polyphenol（TP）for content determination in fresh leaf from old fir narcissus and chelan,and two product tea was used as control sample.The results show that the TP content of the fresh leaf from old fir narcissus is 18.0%and 17.8%；the chelan,14.4%and 14.6%；the product tea old fir narcissus is 42.18%and 42.98%,and the product tea chelan is 34.18%and 37.12%respectively,based on this two kind of extraction method.This study will provide scientific basis on characteristic analyze and synthetic develop form in old fir narcissus.

old fir narcissus；chelan；tea polyphenol；determination

TQ914.1

A

1008-7516（2013）01-0041-03

10.3969/j.issn.1008-7516.2013.01.010

2012-12-20

福建省教育厅基金资助项目（JB11015,JA11043）

林和（1961-）男,福建福州人,本科,高级实验师.主要从事食品科学研究.

陈由强（1956-）,男,福建福州人,教授,博士生导师.主要从事植物生理学和植物分子生物学研究.

邓天福）