气相色谱法测定丁酸丙酸氢化可的松的残留溶剂*

刘 霞

(南开大学附属口腔医院，天津 300041)

丁酸丙酸氢化可的松是糖皮质激素类药物，外用有抗炎、抗过敏、止痒及减少渗出的作用，可经皮肤吸收，在皮肤破损处吸收很快，现己收入药典。本品在化学合成过程中由于使用了乙酸乙酯和氯仿，在质量控制中必须考查该原料药有机溶剂残留量问题。笔者参照《中国药典》2005 版(一部)［1］和有关文献［2-4］，采用气相色谱法对这两种有机溶剂进行测定和验证，方法简便，精密度较高，可有效对丁酸丙酸氢化可的松中残留的有机溶剂进行控制，为药品质量标准的制定和生产工艺改进提供依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器安捷伦7890 气相色谱仪，METTLER AE240 分析天平。

1.2 试药 乙酸乙酯和氯仿均为国产分析纯试剂，二甲基亚砜为国产色谱纯试剂。丁酸丙酸氢化可的松样品(湖北恒安药业有限公司，批号091201、091202、091203)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱:DB -624石英毛细管柱(6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷，30 mm ×0.32 mm，1.8 μm);柱温:40 ℃保持3 min，以2 ℃/min 的速度升至75 ℃，再以80 ℃/min 的速度升至230 ℃，保持10 min;气化室:200 ℃;检测器:FID，250 ℃;载气:氮气;分流比:10∶ 1;流速:0.6 ml/min;进样量:1 μl。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照溶液的制备 精密量取乙酸乙酯1 111 μl(相当于1 000 mg)和氯仿8.2 μl(相当于12 mg)，置200 ml 量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照贮备溶液。精密量取5 ml，置50 ml 量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品约0.5 g，精密称定，置5 ml 量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.3 专属性试验 分别精密量取对照溶液和供试品溶液，按上述色谱条件进样测定，出样顺序为乙酸乙酯、氯仿。两个成分之间分离度均＞3.0，且理论塔板数均大于10 000，对称性好，见图1。

图1 对照品(A)供试品(B)气相色谱图

2.4 标准曲线的建立 精密量取对照贮备溶液0.5、2、3、5、7 和10 ml 分别置于50 ml 量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，制成一系列浓度的对照溶液;分别精密量取上述对照溶液1 μl，注入气相色谱仪，依“2.1”项下方法测定，以对照溶液浓度为横坐标(X)，对照峰面积为纵坐标(Y)，进行线性回归。结果显示乙酸乙酯在50 ～1 000 μg/ml、氯仿在0.6 ～12 μg/ml的范围内线性关系良好，线性方程分别为Y =7.81 ×10-1X+20.79 (r=0.999 3);Y=6.76 ×10-1X+0.16(r=0.999 6)。

2.5 重现性试验 精密量取对照溶液5 ml 置50 ml量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，配制6 份溶液，各精密量取1 μl，连续进样，考查重复性。乙酸乙酯和氯仿峰面积的RSD 分别为1.4%和1.8%。

2.6 稳定性试验 取对照溶液每间隔4 h 进样，考查溶液的稳定性。经检验，对照溶液在24 h 内，各物质的峰面积基本不变，表明24 h 内稳定，乙酸乙酯和氯仿峰面积的RSD 分别为1.8%和0.6%。

2.7 最小检出限 精密量取对照贮备溶液0.5 ml 置于50 ml 量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，再进行逐步稀释。分别精密量取1 μl 注入气相色谱仪，乙酸乙酯的最低检出限为2.5 μg/ml，氯仿的最低检出限为0.6 μg/ml。

2.8 回收率试验 精密量取对照贮备溶液0.4、0.5和0.6 ml 各3 份，分别置于已加入0.5 g 样品的5 ml量瓶中，加二甲基亚砜使溶解并稀释至刻度，摇匀，制成含对照相当于检查限度80%、100%及120%的样品溶液。另取本品约0.5 g，精密称定，置5 ml 量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，作为回收率测定的空白溶液。同时配制相应浓度的对照溶液。依“2.1”项下方法测定，按外标法计算回收率，结果见表1，乙酸乙酯和氯仿的平均回收率分别为101.6%和102.2%;RSD 分别为1.1%和1.5%。

2.9 样品中乙酸乙酯、氯仿残留量的检查精密量取对照溶液及供试品溶液各1 μl，注入气相色谱仪，照残留溶剂测定法［1］，依法测定。按外标法以峰面积计算，含乙酸乙酯和氯仿分别不得超过0.5%和0.006%。实验结果表明，3 批样品均未检出待测残留溶剂。

表1 乙酸乙酯和氯仿回收率试验结果(n=9)

3 讨论

本次方法学实验采用直接进样的方式。二甲基亚砜对样品溶解良好，因此确定其作为溶剂。由于恒温实验分离效果不佳，因此采用程序升温进行实验。根据上述项目的验证，表明本方法具有良好的专属性、精密度、准确性，验证范围内线性关系良好。采用外标法直接进样，方便快捷，能很好地控制样品中残留溶剂的检测。因此，本法适用于丁酸丙酸氢化可的松残留溶剂的测定。

1 中国药典.一部.2005:附录35

2 赵海桥，付建，刘存领，等.顶空气相色谱法测定硫酸氢氯吡格雷中有机溶剂残留量.齐鲁药事，2011，30(8):455

3 逯素珍，戴淑琴，宋敏.气相色谱法测定葛根素衍生物有机溶剂残留量.天津药学，2011，23(4):20

4 张秋菊，裴付军，郭毅.GC 法测定盐酸索他洛尔中有机溶剂残留量.齐鲁药事，2011，30(7):392