用动物试验确诊1例绵羊魏氏梭菌病的报告
2012-12-10马占荣
马占荣
青海省门源县阴田乡兽医站,青海门源810300
魏氏梭菌为厌氧、革兰氏阳性、两端钝圆的大杆菌,有芽孢,无鞭毛。本菌能产生多种外毒素,根据其毒素性质不同,分为 A、B、C、D、E等型;菌型不同,其所引起的疾病亦不同,仅从临床症状上不易确诊。特别是羊肠毒血症和羊猝狙,发病急、病程短、死亡快,以致其临床症状不易被观察到。
2011年1月,阴田乡一牧户饲养的绵羊突然发病,共存栏284只,3d内连续死亡11只,发病羊只中以当年羔羊和成年母羊居多。部分患羊当晚不见任何症状,次日死于圈中;部分患羊在放牧时发病,羊只突然停草、出现神经症状、呼吸困难、心跳加快、体温不高、口吐白沫、结膜苍白、全身肌肉震颤,很快进入昏迷状态,1~8h内死亡。对症治疗疗效甚微,初步诊断为魏氏梭菌感染,为进一步确诊,进行了动物试验,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 材 料
1)供试动物。门源种马场一牧户饲养的体重、年龄相近的6只健康家兔。
2)试验用品。离心机1台(配套试管6支),10 mL无菌注射器6支,5号静脉注射针头6套,足量酒精棉球,250mL生理盐水。
1.2 方 法
无菌采集病死绵羊含内容物的小肠100cm,封住两端,备用;无菌采集健康绵羊含内容物的小肠100cm,封住两端,备用。
1)第1步试验。取备用病死绵羊的小肠内容物10g,加40mL生理盐水稀释后,2 000r/min离心30min,取上清液,标注为1号试剂;用同样的方法将健康绵羊的小肠内容物稀释、离心后制成2号试剂。随机取3只家兔,分别标记为1、2、3号;1、2号家兔分别对应静脉注射1、2号试剂各5mL,3号家兔注射生理盐水5mL,注射后让3只家兔自由活动,并观察、计时。
2)第2步试验。取静脉注射1号试剂致死的家兔的小肠内容物10g,加40mL生理盐水稀释后,2 000r/min离心30min,取上清液,标注为4号试剂。取4号试剂5mL静脉注射于备用的任意1只家兔,标为4号试验家兔,并观察、计时。
2 结果与分析
第1步试验,结果发现注射37min后1号试验家兔兴奋不安、狂奔几下后突然死亡,2、3号试验家兔生理活动正常。说明病死绵羊的小肠内有使家兔致死的毒素。第2步试验,结果发现注射后12h内,4号试验家兔生理活动正常。说明致死的1号家兔小肠内无毒素产生,致使1号家兔死亡的是病死绵羊小肠内细菌的外毒素,而不是病菌感染。
综合分析发现,引起该批绵羊死亡的原因是魏氏梭菌感染,由于条件限制未作毒素分型鉴定。确诊为魏氏梭菌感染后,立即对全群绵羊进行了羊梭菌多联苗强化免疫,1周后再无绵羊发病。
3 讨 论
应在详细的流行病学调查基础上,结合临床症状和剖检病变,初步诊断为魏氏梭菌感染后,用该试验进行确诊。应充分考虑绦虫毒素、食入性毒素等因素,以免影响试验结果。本试验成本低、实验动物易购、操作简便、器械易于筹备,适于在条件不好、载畜量大的偏远山区应用。