龙藤筋骨片的小鼠急性毒性实验研究

2012-11-30汪涛杨大伟高永喜胡卫东曾凡波

中国疗养医学 2012年3期

汪涛杨大伟高永喜胡卫东曾凡波

(1.广州军区武汉疗养院，430074；2.华中科技大学同济医学院药学院，430030)

2009年，为确保药品使用的安全性，根据军区药检所的要求，我院对已经于2006年取得医疗单位制剂批准文号：广制字(2007)F13001的制剂“龙藤筋骨片”，进行了再申报。我院在华中科技大学同济医学院药学院的帮助下，对龙藤筋骨片进行了急性毒性实验研究，现总结如下。

1 资料与方法

1.1 药品龙藤筋骨片，批号：090413，规格：0.3 g/片，由广州军区武汉疗养院配制，临床成人用量为4.5 g/d(口服3次/d，5片/次)。实验前取龙藤筋骨片适量，用乳钵研磨，溶于蒸馏水中，调整其浓度，至其混悬液能勉强通过小鼠灌胃针头，即最大浓度为0.25 g/mL。

1.2 动物清洁级昆明种小鼠40只，体质量(20±2)g，7周龄，雌雄各半。动物及饲料均由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供，实验动物质量合格证号：SCXK(鄂)：2008-010。

1.3 实验方法

1.3.1 预实验在进行正式实验之前，进行预实验，以便为正式实验提供依据。将12只小鼠随机分为2组，雌雄各半，灌胃前禁食不禁水16 h。给药组：以可供灌胃的最大浓度(0.25 g/mL)、小鼠灌胃可承受的最大体积(每10 g体质量0.4 mL)1次灌给龙藤筋骨片混悬液。给药后常规饲养，观察3 d。空白组灌胃等量蒸馏水，方法同给药组。结果小鼠全部存活，因此，无法测出该中药制剂的LD50，提示该中药制剂药毒性很低，是较安全的，故测定本药对小鼠的最大耐受量[1]。

1.3.2 最大耐受量的测定取小鼠40只，体质量(20±2)g，雌雄各半，随机分为给药组和对照组，每组各20只；环境温度为(18±2)℃，相对湿度为(70±5)%。饲以华中科技大学同济医学院实验动物中心生产的鼠用颗粒饲料，自由饮水。根据预实验结果，于禁食不禁水16 h后灌胃给受试药物。第1组为给药组，每只小鼠按40 mL/kg[2]灌胃给予龙藤筋骨片混悬药液(约0.8 mL/只)，2次/d，每次用药剂量为10 g/kg，2次总剂量为20 g/kg；第2组为对照组，每只小鼠灌胃给予蒸馏水0.8 mL，2次/d，2次总剂量为40 mL/kg。

给药前称重，给药后立即观察动物反应情况，第1日观察3次，以后每日观察2次，连续观察14 d，记录动物皮肤、黏膜、毛色、眼睛、呼吸、中枢神经系统、自主行为等，实验结束时称取体质量，并对小鼠进行尸检[2]，解剖观察其心、肝、脾、肺、肾等主要器官的组织变化。

2 结果

2.1 毒性反应情况第1次给药后，立即观察，给药组小鼠在给药10 min后表现为活动减少、闭目，2 h后逐渐恢复正常；第2次给药后给药组小鼠表现同上，但持续时间延长至3 h恢复正常。对照组小鼠灌胃给予蒸馏水后无异常反应；给药组小鼠给药24 h后未见其他异常反应，实验小鼠的皮肤、黏膜、毛色、眼睛、呼吸、中枢神经系统、自主行为等正常，继续观察14 d，每天观察2次(08：00和20：00)。

在观察的14 d中给药组小鼠同对照组小鼠一样未出现叫声异常、震颤、惊厥、运动失调、流涎、流泪、流鼻涕、呼吸困难、心跳过强或过弱、腹泻、便秘、肠胀气等现象，未见其他异常反应，给药组小鼠的皮肤、黏膜、毛色、眼睛、呼吸、中枢神经系统、自主行为等正常；给药14 d内小鼠未出现死亡情况。

2.2 给药前后体质量及进食量变化情况对照组与给药组小鼠体质量增长比较差异无统计学意义(P＞0.05，表1)，对照组与给药组小鼠进食量变化比较，差异无统计学意义(P＞0.05，表2)，提示龙藤筋骨片对小鼠的急性毒性反应不明显。

表1 龙藤筋骨片最大给药量灌胃前、后小鼠体质量变化(n=20，)

组别给药前第2天第4天第6天第8天第10天第12天第14天对照组 ♀ 20.3±0.8 24.5±1.8 25.8±1.9 27.9±2.1 29.1±2.2 30.0±2.4 30.7±2.0 31.6±1.8♂ 21.1±1.4 23.4±1.9 24.6±1.5 25.8±1.9 26.3±1.7 27.6±1.7 28.7±1.4 30.1±1.9给药组 ♀ 18.8±1.2 20.6±1.5 21.7±1.9 23.4±1.6 24.6±2.2 25.8±2.4 26.4±2.2 26.5±2.4♂ 21.6±1.3 22.1±1.4 24.3±1.7 26.5±1.8 28.4±1.8 29.8±2.3 31.3±2.1 32.2±2.1小鼠体质量(g)