Huntington舞蹈病一家系4例遗传分析

王艳鸽，娄 强，董 烁

（河南大学 医学院，河南 开封475004）

1 研究对象和方法

1.1 研究对象

Huntington舞蹈病家系：一个家族性Huntington舞蹈病家系由本院遗传咨询门诊提供。

1.2 研究方法

对患者家系进行家系调查和分析，观察患者症状，对患者进行医院常规检查及实验室遗传学分析。

2 家系分析及遗传学检查

2.1 先证者

先证者，男，32岁，小学教师，因近半年手部肌肉不自主震颤于2010年12月在河南大学东京医院神经内科就诊，后转入遗传咨询门诊。主诉症状：患者半年来，发现手部肌肉不自主震颤，在上课写板书时不流利，吃饭时会有夹不稳菜的情况，通过意志控制不住症状的发生，影响工作和生活，其他没有异样症状。父亲及其姐妹均有此症状，且比较严重，伴有一定痴呆和精神障碍，父母非近亲结婚。因患者家庭里有类似病例，怀疑是遗传病，担心会传递给自己的子女，所以前来就诊。

体格检查：身体健康，智力正常，发育正常，系统检查未见异常。

头颅CT及MRI检查：正常

实验室检查：血、尿、粪常规及肝、肾功能均正常。

2.2 家系调查

系谱绘制：根据先证者提供情况绘制系谱。

2.3 遗传学检查

基因诊断：按照知情同意原则抽取家系成员外周血，采用酚氯仿抽提法提取基因组DNA。参照文献［1］及NCBI，向上海英骏公司订购2条引物（上游引物：5′-CGACCCTGGAAAAGCTGATG-3′；下游引物：5′-GGCTGAGGAAGCTGAGGAG-3′），采 用两步法进行PCR扩增，95℃下进行预变性5min：然后进入循环。条件为95℃40s.68℃60s循环30次，最后72℃下延伸10min。取5μLPCR产物在含溴化乙锭的体积分数为2%琼脂糖凝胶上电泳之后在紫外灯下观察扩增片段。

2.4 诊断

Huntington舞蹈病。

3 家系分析及遗传学检查结果

3.1 系谱分析结果（见图1）

家系中无近亲结婚者，3代（第IV代咨询，除去）20人中共有4人（男2人，女2人）患有类似疾病。其中第I代中先证者的祖母和第II代中先证者的姑姑均死于本病（先证者回忆）。其他患者均得到实验室确诊。

发病年龄：I 2为45岁（先证者回忆）；II 2为45岁，II 5为42岁，II 7为43岁；III 1为42岁，III 6为32岁。

图1 Huntington舞蹈病家系图

3.2 临床检查结果（见表1）

表1 Huntington舞蹈病家系临床资料

续表1

3.3 基因诊断结果（见图2）

阴性对照Neg为和患者家族毫无关联的健康人，带有2个正常基因，在180bp左右有1条条带，提示CAG重复次数在20次左右。

患者的正常同胞II 3以及正常同胞的子女III 4、III 5都显示1条带，说明都没有携带致病基因。

患者II 5、II 7除在180bp左右显示1条带外，另外在300bp左右显示另1条带，说明有1个正常基因，1个致病基因，CAG重复次数在60次左右。

患者子女根据条带可以判断出III 1、III 2、III 6、III 8、III 9为致病基因的携带者，提示病情轻微和无症状只是延迟显性的结果。III 3、III 7、III 10、IV 1为正常基因，后代也不会再患此病。

图2 家系成员IT15基因PCR产物琼脂糖凝胶电泳图

3 讨论

Huntington舞蹈病（Huntington disease，HD）是一种以神经系统退行性改变为主要特征的常染色体显性遗传病［2］，几乎任何年龄都可发病，但通常是在35～50岁起病［3］。临床上HD主要表现为不受控制的舞蹈样动作伴认知障碍和精神异常，呈进行性加重，患者一般在症状首次出现后15～20a死亡。

本病临床症状、体征和病理改变较为典型，临床诊断较为明确，尤其对于有家族史者，本病易于诊断。但由于目前临床缺乏有效治疗方法，且患者多于成年后发病，发病前往往已经生育子女，故本病的症状前、产前及植入前诊断显得尤为重要。

HD 基因定位于 4p16.3［4－5］，被命名为IT15 基因，该基因开放阅读框5′端该基因的不稳定突变，即该基因5′端编码区（CAG）n三核苷酸的异常扩增是HD的遗传学基础［6］，因此基因诊断是HD确诊的最可靠依据，特别是对于临床上的类似症状病例的区分显得尤为重要。

本病例家族中连续3代共有4人发病，无隔代遗传现象，发病无性别差异（2男2女），符合常染色体显性遗传，这与刘娜等［7］报道的1个家系6例患者、赵育海等［8］报道的2个家系3名患者遗传方式相同。本病例报道的发病年龄在32～45岁之间，与国内目前报道的家系发病年龄一般为30～50岁基本一致。

本家系先证者父亲II 5 42岁时开始出现不自主舞蹈样动作，且随年龄增加病情加重，出现认知障碍和精神异常，而先证III 6 32岁出现症状，呈现典型的遗传早现现象。先证者的姑姑II 2 45岁出现症状，但其女儿III 1出现症状并没有提前太多（42岁），这提示有遗传印记现象发生，同样的基因通过男性和女性向下一代传递时出现了不同的表现。

本家系先证者的兄弟姐妹根据知情同意原则都做了基因诊断，确诊出3名症状前患者（III 2、III 8、III 9），表现出延迟显性，对于该家系中尚未婚育的风险者而言具有重要意义。

总之，Huntington舞蹈病的遗传学检查，不但可以获得准确的基因诊断结果，为家系成员提供科学客观的遗传咨询，还可以为相关基因的诊断项目向临床广泛推广提供技术保障，对后续HD发病机制及实验治疗研究提供重要参考。

［1］Stevanin G，Fujigasaki H，Lebre A S，et al.Huntington’s disease-like phenotype due to trinucleotide repeats expansions in the TBP and JPH3genes［J］.Brain，2003，12（6）：1 599－1 603.

［2］Xuereb J H，MacMillan J C，Snell R，et al.Neuropathological diagnosis and CAG repeat expansion in Huntington’s disease［J］.J Neurol Neurosurg Psychiatry，1996，60（1）：78－81.

［3］王晔，顾振纶，秦正红.Huntingtin聚合与 Huntington舞蹈病［J］.中国临床神经科学，2006，14（1）：106－112.

［4］Spires T L，Hannan A J.Molecular mechanisms mediating pathological plasticity in Huntington’s disease and Alzheimer＇s disease［J］.J Neurochem，2007，100（4）：874－82.

［5］Huntington’s Disease Collaborative Research Group.A novel gene containing a trinucleotide repeat that is expanded and unstable on Huntington’s disease chromosomes［J］.Cell，1993，72（4）：971－983.

［6］Ross C A，Margolis R L.Huntington’s disease［J］.Clin Neurosci Res，2001（1）：142－152.

［7］刘娜，杨志杰，樊东升，等.Huntington舞蹈病一家系六例报告［J］.中国神经免疫学和神经病学杂志，2011，18（2）：145－145.

［8］赵育海，丛琳，潘钰，等.辽宁地区Huntington舞蹈病两家系IT15基因的分子分析［J］.中国医科大学学报，2003，32（4）：355－357.