老年慢性肝病患者血清肿瘤坏死因子α、瘦素的表达及临床意义

郝大林 石 宏 孔祥敏 (北华大学附属医院传染科，吉林 吉林 132011)

病毒性肝炎肝细胞损伤及发生肝纤维化的病理机制十分复杂，细胞因子表达异常在其中的作用已受到众多研究者的关注〔1〕。肿瘤坏死因子(TNF)-α在机体的炎症反应和免疫调节过程中发挥重要作用。作为一种具有抗肿瘤、抗感染等多种生物学活性的细胞因子，TNF-α可能参与了慢性肝病的病理发展过程〔2〕。瘦素(Leptin)是由肥胖基因编码的一种蛋白质产物，被发现与多种疾病密切相关。近年来研究资料显示，肝病患者血清Leptin表达水平升高，可能与肝脏的炎症、脂肪变、纤维化等可能有密切关系〔3〕。但TNF-α、Leptin在老年慢性肝病患者中的变化和意义尚未见报道。本研究旨在探讨TNF-α、Leptin在慢性肝病进展过程中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2009年5月至2011年11月我院门诊就诊及住院治疗的老年病毒性肝炎患者137例，诊断标准参考2000年9月中华医学会、传染病寄生虫学分会、肝病分会联合修订的病毒性肝炎防治方案中慢性肝炎、肝硬化的诊断标准〔4〕，排除伴有心血管疾病、糖尿病、脂肪肝以及免疫系统疾病者。其中男性58例，女性79例;年龄60～74岁，平均年龄(65.9±3.2)岁;Child-Pugh分级标准：A级40例，B级43例，C级54例;慢性乙肝患者43例，慢性丙肝患者38例，肝炎肝硬化患者56例。另选择同期健康体检者40例为对照组，男17例，女23例，年龄60～71岁，平均年龄(64.5±3.6)岁，各组年龄、性别分布无显著差异。

1.2 方法 均于清晨抽取空腹静脉血5 ml，经离心取血清，保存于－20℃冰箱统一检测。采用双抗体夹心法检测血清TNF-α、Leptin的表达水平，TNF-α检测试剂由军事医学科学院提供，Leptin检测试剂由美国 Linco公司提供，酶标仪为美国BEP2000型全自动酶标仪，严格按照试剂盒说明书进行操作。采用放射免疫分析法测定透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅳ型前胶原(C-Ⅳ)、白蛋白(ALB)。

1.3 统计学方法 应用SPSS13.0统计软件，多个样本均数之间的两两比较采用方差分析。两组计量资料之间的相关性分析用直线相关分析。

2 结果

2.1 各组血清TNF-α、Leptin表达比较 肝硬化组血清TNF-α、Leptin表达明显高于慢性乙型肝炎组、慢性丙型肝炎组和对照组(P＜0.05);慢性乙型肝炎组、慢性丙型肝炎组血清TNF-α、Leptin表达明显高于对照组(P＜0.05);慢性乙型肝炎组、慢性丙型肝炎组血清 TNF-α、Leptin水平差异无显著性(P＞0.05)，见表1。

表1 病毒性肝炎患者和对照组血清TNF-α、Leptin表达(s)

表1 病毒性肝炎患者和对照组血清TNF-α、Leptin表达(s)

与对照组相比：1)P＜0.05;与肝硬化组相比：2)P＜0.05

组别 n TNF-α(ng/ml)Leptin(ng/ml)40 0.52±0.15 2.58±1.16慢性乙肝组 43 1.34±0.241)2) 5.72±2.04慢性丙肝组 38 1.28±0.211)2) 5.58±2.13肝硬化组 56 3.65±1.681) 20.25±6.591)对照组

2.2 肝硬化患者血清 TNF-α、Leptin、HA、LN、C-Ⅳ、ALB 表达的相关性分析 肝硬化患者血清TNF-α(3.65±1.68)ng/ml、瘦素 (20.25 ±6.59)ng/ml、HA(215.42 ±51.27)ng/ml、LN(198.75 ± 92.46)ng/ml、C-Ⅳ (228.94 ± 84.58)ng/ml、ALB(28.45 ±4.28)g/L。TNF-α 水平与 HA、LN、、C-Ⅳ水平均呈正相关(r=0.447、0.546、0.681，P ＜0.05)，与血清 ALB 水平呈负相关(r= －0.398，P ＜0.05);Leptin水平与 HA、LN、C-Ⅳ水平均呈正相关(r=0.497、0.534、0.574，P ＜0.05)，与血清 ALB 水平呈负相关(r=－0.381，P＜0.05)。TNF-α与Leptin呈正相关(r=0.461，P ＜0.05)。

3 讨论

TNF-α是由周围血单核细胞和巨噬细胞产生的细胞因子，作为一种肝细胞损伤因子，TNF-α能激活T、B细胞、NK细胞和单核细胞，与肝细胞膜异常成分发生免疫应答，进而引发肝细胞坏死，肝功能改变。国外的研究表明〔5〕，TNF-α与肝病免疫病理反应、导致肝脏功能受损密切相关，但其在老年慢性肝炎、肝炎后肝硬化发生发展过程中的作用目前尚不清楚。本研究提示TNF-α与慢性肝炎的发病有关，并随肝炎病情发展、肝功能损害的加重而升高，可作为肝功能受损的指标。

Leptin是由白色脂肪组织产生的一种脂肪细胞因子，对机体许多生理系统及代谢通路都有重要影响，通过多种组织及多种形式的受体而发挥广泛的生物学效应。近年来有关慢性肝病患者血清Leptin水平变化的研究日益增多，但Leptin与慢性肝病的关系尚有一定争议。Testa等〔6〕的研究显示病毒性肝炎及肝硬化患者的血清Leptin水平降低。丁百静等〔7〕研究资料显示肝硬化患者与正常人的血清瘦素水平无显著差异。刘小红等〔8〕研究认为慢性乙型肝炎和肝硬化患者的血清Leptin水平明显升高，可能与病毒感染、肝功能损害有关。有动物实验〔9〕也为这一结论提供了有力的佐证。本研究说明Leptin可能通过不同途径、不同程度地参与了慢性肝病发生过程，并在其中起重要调节作用，但其作用机制尚需进一步探讨。

正常时细胞外基质HA、LN、C-Ⅳ在血清中含量很少，而发生肝纤维化时明显增多。国内外研究结果发现〔10〕，血清HA、LN、C-Ⅳ的含量能很好地反映肝细胞损害和肝纤维化程度，被公认为是临床对肝纤维化和肝硬化非创伤性诊断的良好指标。本研究说明肝硬化患者血清TNF-α、Leptin水平与肝细胞损害和肝纤维化程度密切相关，提示TNF-α、Leptin可能是促肝纤维化的重要因子。因此，在慢性肝病的病情发展过程中，动态测定患者血清TNF-α、Leptin水平将有利于临床监视病情，两者可作为辅助评估肝硬化病情的参考指标。

1 朱立娜，张旭谱，杨耀娴，等.血清白介素-1、白介素-6、肿瘤坏死因子-α与慢性肝病的相关性研究〔J〕.包头医学院学报，2008;24(4)：341-3.

2 殷 涛.γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶、肿瘤坏死因子检测对肝癌、慢性肝病的诊断价值〔J〕.中国疗养医学，2010;1(1)：71.

3 柯 柳，温小凤.瘦素与胰岛素抵抗在慢性肝病中的作用〔J〕.实用肝脏病杂志，2008;11(3)：209-11.

4 中华医学会传染病与寄生虫分会、肝病学会.病毒性肝炎防治方案〔J〕. 中华传染病杂志，2001;19(1)：52-6.

5 Calabrese LH，Zein N，Vassilopoulos D.Safety of antitumour necrosis factor(anti-TNF)therapy in patients with chronic viral infections：hepatitis C，hepatitis B，and HIV infection〔J〕.Ann Rheum Dis，2004;63(2)：18-24.

6 Testa R，Franceschini R，Giannini E，et al.Serum leptin levels in patients with viral chronic hepatitis or liver cirrhosis〔J〕.J Hepatol，2000;33(1)：33-7.

7 丁百静，朴云峰，李传凤，等.肝硬化患者血清leptin水平测定及其临床意义的探讨〔J〕.临床肝胆病杂志，2003;1(2)：72-3.

8 刘小红，李延辉.慢性乙型肝炎、肝硬化患者血清leptin的测定及其与胰岛素水平的相关性研究〔J〕.实用预防医学，2006;13(6)：1454-5.

9 Hajime H，Kenichi I，Miyoko H，et al.Leptin is required for fibrogenic responses induced by thioacetamide in the mufine liner〔J〕.Hepatology，2002;36：12-21.

10 王晓焕，史红丽，保建强.血清PCIII、HA与HBV-M联合检测对慢性肝病的诊断价值〔J〕.淮海医药，2009;27(4)：325-6.