紫花杜鹃片中杜鹃素的HPLC法测定

李淑如 罗杰 李兰芳

广州白云山和记黄埔中药有限公司现代中药研究院，广东 广州 510515

紫花杜鹃片中杜鹃素的HPLC法测定

李淑如 罗杰 李兰芳

广州白云山和记黄埔中药有限公司现代中药研究院，广东 广州 510515

目的：建立了HPLC法测定紫花杜鹃片中杜鹃素的含量。方法：采用Agilent C18色谱柱，以甲醇-0.1%磷酸溶液（57：43）为流动相，检测波长为297nm。结果：杜鹃素在0.0334 ～1.002μg范围内线性关系良好。回收率为 96.7% ,RSD=1.8%。结论：该方法结果准确，重现性好，可用于测定紫花杜鹃片中杜鹃素含量。

紫花杜鹃片；杜鹃素；含量测定；高效液相色谱

Absract

Objective: To establish the farrerol in Rhododendron maria hance tablets by HPLC.. Method:Applying HPLC, Agilent C18 was used for column, methanol-0.1%phosphoric acid solutions（57：43）for mobile phase,detective wave 297nm. Results: The calibration cruve for farrerol was linear within 0.0334 ～1.002μg.The average recovery rate was 96.7%,with RSD=1.8%. Conclusion: The method is accurate and reproducible, and can be used for the quality control of farrerol in Rhododendron maria hance tablets.

rhododendron maria hance tablets; farrerol; content assaying; HPLC

紫花杜鹃片为紫花杜鹃药材单方制剂，该处方组方简单，疗效确切，其功能主治为止咳，祛痰。用于气管炎。紫花杜鹃中的有效成分杜鹃素能明显促进小鼠呼吸道排出酚红，提示杜鹃素可能直接作用于呼吸道黏膜，而大鼠气管引流法表明，杜鹃素有一定的促进呼吸道液体分泌的作用[1]。现依据本品的功能，采用高效液相色谱法测定紫花杜鹃片中杜鹃素的含量。

1 材料与方法

1.1 仪器

Waters2695高效液相色谱仪（四元梯度泵， Waters 2996二极管阵列检测器Waters Empower 2 色谱管理软件）。

1.2 试药

杜鹃素（批号：110850-200604 中国药品生物制品检定所）。紫花杜鹃片（广州白云山和记黄埔中药有限公司）。甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

Agilent C18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）；流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（57：43）；检测波长：297nm。流速：1 mL/min；进样量：10 μL

2.2 对照品溶液的溶液制备

取杜鹃素对照品，加甲醇配制成每mL含30ug的溶液，即得。

2.3 供试品溶液制备

取本品，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率：频率：）20分钟，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 线性试验

取杜鹃素对照品溶液（0.0334mg/ml），分别进样1μl、3μl、5μl、10μ l、20μl、30μl按试验方法项下的色谱条件测定。

以杜鹃素进样量（μg）为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，结果表明见图1，杜鹃素在0.0334～1.002μg的范围内，其进样量与色谱峰面积呈良好的线性关系。回归方程：Y＝3×10-7X+0.0072，R=0.999。

图1 杜鹃素对照品HPLC图谱

图2 样品HPLC图谱

2.5 精密度试验

取杜鹃素对照品溶液（0.0334mg/ml），连续进样6次，杜鹃素峰面积的平均值为：1100256， RSD为0.32%，说明仪器精密度较高。

2.6 稳定性试验

取同一供试品溶液，在0、2、4、6、8、12h连续测定峰面积，计算杜鹃素峰面积积分值的RSD=1.2 %，表明室温下供试品溶液中12h内稳定。

2.7 重复性试验

取同一批号的紫花杜鹃片，制备6份供试品溶液，按上述色谱条件进样，计算杜鹃素含量的RSD= 1.8%，结果表明本方法重现性好，见图2。

2.8 加样回收率

试验取已知含量（0.92mg/g）供试品6份，每份0.5g，精密称定，分别精密加入杜鹃素（浓度为 0.161mg/ml ）对照品溶液3 mL，按供试品溶液制备方法制备并测定，结果见表1。

表1 杜鹃素回收率试验

2.9 样品测定

取3批紫花杜鹃片样品，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，在上述色谱条件测定，结果见表2。

表2 3批样品含量测定

3 讨论

3.1 原标准采用分光光度法测定制剂中芦丁含量，该方法重现性、精密度、专属性较差，而且黄酮类成分芦丁广泛存在植物药材中，采用高效液相色谱法测定杜鹃素，重现性好、精密高、专属性强。

3.2 测定杜鹃素的流动性经优化实验后，选定为甲醇-0.1%磷酸溶液（57：43），参照流动相甲醇-0.2%磷酸溶液（58：42）[2]，甲醇-0.4%磷酸溶液（52：48）[3],本方法流动相使用0.1%磷酸溶液，较0.2%磷酸溶液酸性低，有利于保护色谱柱、减少磷酸的使用，减少环境污染，同时也降低了使用成本。

[1]中药大辞典.下册( 第二版）.上海科学技术出版社

[2]张朝阳，张振秋.HPLC波长切换法测定满山红中杜鹃素和槲皮素的含量[J].中国实用医药杂志，2008，1（3）：59～60

[3]黄齐林，高小莹，等.高效液相色谱法快速测定满山红中槲皮素和杜鹃素的研究.[J].分析科学学报,2006,22(4),162～163

Determination of Farrerol in Rhododendron Maria Hance Tablets Bby HPLC

Li Shuru Luoi Jie Li Lanfang
(Hutchison Whampoa Guangzhou Baiyunshan Chinese Medicine Co., Guangzhou, 510515, Guangdong, China)

10.3969/j.issn.1001-8972.2012.02.025

李淑如，中级工程师，研究方向：中药质量控制及政策法规研究。