睾丸或附睾精子ICSI治疗无精子症

王 丽， 陈家仙， 胡雪梅， 杨智敏

(遵义医学院附属医院 生殖中心， 贵州 遵义 563000)

睾丸或附睾精子ICSI治疗无精子症

王 丽， 陈家仙， 胡雪梅， 杨智敏

(遵义医学院附属医院 生殖中心， 贵州 遵义 563000)

目的比较睾丸和附睾精子ICSI治疗无精子症的临床效果。方法分别用睾丸或附睾来源的精子进行ICSI， 对其受精率、优质胚胎率、胚胎种植率和临床妊娠率等指标进行评价。结果睾丸精子的受精率明显低于附睾精子的受精率(P<0.001)，两者的优质胚胎率、胚胎种植率和临床妊娠率差异无显著性(P>0.05)。结论附睾精子较睾丸精子有更强的受精能力，但不影响治疗结局。

无精子症;精子;卵胞浆内单精子注射;手术取精

无精子症是指育龄男性三次射出的精液经离心沉淀后镜检均未发现精子。在男性不育群体中，无精子症的发病率为10%～15%，是男性不育最严重的病因[1]。1992年，卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection，ICSI)技术的诞生,为无精子症患者的治疗提供了新的方法，并在临床应用取得成功，从而彻底终结了无精子症患者不能拥有亲子后代的历史[2]。本文就我院生殖中心采用睾丸和附睾精子进行 ICSI治疗无精子症的临床结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 2008年1月至2010年12月到我院生殖中心行ICSI治疗的无精子症患者45例(45个周期)。入选病例均满足以下条件：男方三次射出的精液经离心沉淀后镜检均未发现精子；夫妻双方均无染色体异常；女方无不孕因素；首次接受ICSI助孕。按照精子来源不同分为2组，A组为经皮附睾穿刺取精(percutaneous epididymal sperm aspiration，PESA)的梗阻性无精子症患者，B组为附睾穿刺取精失败而行睾丸穿刺取精(testicular sperm extraction，TESE)的梗阻性无精子症患者。

1.2 方法 ① 超促排卵及卵子获取。超促排卵均采用我中心常规方案[3]；当卵泡发育成熟肌注人绒毛膜促性腺激素(HCG)5000IU或10000IU，36h后行超声引导下穿刺取卵术；②精子获取与处理。采用经皮附睾穿刺精子抽吸术(PESA)、睾丸穿刺精子获取术(TESE)和开放性睾丸取精。

1.3 ICSI、胚胎培养、胚胎移植及妊娠结局评价。选取MⅡ期卵子行ICSI，ICSI后第1天观察卵子受精情况，以双原核(2PN)卵子作为正常受精卵。胚胎培养、胚胎质量评价、胚胎移植及妊娠结局评价参见本中心常规[4]。

2 结果

2.1 两组患者基本资料的比较。两组患者平均年龄，平均不孕年限比较差异无显著性(P>0.05)，(见表1)。

组 别n男方年龄女方年龄不孕年限PESA组3131.74±5.3127.57±4.424.54±3.41TESE组1431.36±5.2628.07±4.744.32±3.27

两组卵子受精与胚胎发育情况的比较。PESA组的正常受精率明显高于TESE组，差异具有显著性(P<0.001)，两组的优质胚胎率无明显差异(P>0.05),(见表2)。

表2两组卵子正常受精率与优质胚胎率的比较(%)

组 别受精率优质胚胎率PESA组90.29(251/278)69.89(130/186)TESE组75.51(111/147)*70.27(52/74)

注：*PESA组与TESE组比较，(P<0.001)。

2.2 两组妊娠结局的比较。两组胚胎种植率、临床妊娠率和流产率比较，差异无显著性(P>0.05),(见表3)。

表3两组妊娠结局的比较(%)

组 别胚胎种植率临床妊娠率流产率PESA组37.50(24/64)54.84(17/31)11.76(2/17)TESE组19.35(6/31)46.15(6/13)16.67(1/6)

3 讨论

由于无精子症患者射出的精液中不含有精子，因此ICSI技术所需的精子必需从附睾或睾丸获得，由此相继出现了多种从附睾及睾丸获取精子的方法，包括显微外科附睾精子抽吸术(MESA)、经皮附睾穿刺精子抽吸术(PESA)和睾丸穿刺精子获取术(TESE)，其中PESA/TESE技术简单易行，创伤小，并发症少，可重复操作，易被患者接受。本研究共行PESA/TESE取精45个周期，无1例发生术后感染，阴囊血肿及性功能障碍等术后并发症，提示 PESA /TESE技术是安全有效的取精方式。

随着ICSI技术不断应用于无精子症的治疗，不同来源精子ICSI的受精率是否存在差异越来越引起人们的关注。已有的研究表明，采用不同来源的精子进行ICSI 治疗可获得相似的受精率[5-7]。本研究结果显示睾丸精子的受精率明显低于附睾精子的受精率，我们推测睾丸精子ICSI操作的困难程度较附睾精子高可能是导致受精率差异的原因之一，是否还与睾丸精子的成熟度较低有关尚不清楚，值得进一步研究。

关于睾丸和附睾来源的精子对胚胎发育和妊娠结局的影响仍有争议。一种观点认为，睾丸精子DNA(包括线粒体DNA和核DNA)的突变率明显低于附睾精子DNA(包括线粒体DNA和核DNA)，睾丸精子ICSI所形成胚胎较附睾精子ICSI所形成胚胎具有更好的发育潜能，其妊娠率较高[8，9]，因此推荐在临床中应优先选择睾丸精子行 ICSI受精。另一种观点认为，大多数精子只有到达附睾远端后，在附睾及输精管分泌的特定物质的作用下才得以成熟并获得受精的能力[10]，因此推荐在临床中应优先选择附睾精子行 ICSI受精。本研究结果显示，采用睾丸精子和附睾精子行ICSI，其优质胚胎率，胚胎种植率和临床妊娠率没有差异，与多数文献报道结果一致[5-7]。

ICSI技术不仅解决了男性不育的问题，同时也改变了受精的自然选择过程。

ICSI是否会将有遗传缺陷(包括染色体异常、基因突变或缺失)的精子注入卵子，并遗传给下一代，是人们普遍关注并必须予以回答的问题。已有研究报告指出，ICSI可引起后代染色体非整倍体和结构异常的几率增加[11]，但大多数研究报告认为，ICSI并不会提高后代畸形率的发生[12]。由于目前的大多数研究尚处于短期的跟踪观察阶段，因此有必要对ICSI后出生的子代进行持续随访以了解其远期预后。

[1] Jarow JP，Espeland MA，Lipshultz LI. Evaluation of theazoospermic patients[J]. J Urol，1989，142(1)：62-65.

[2]Palermo G，Joris K，Devroey P，et al.Pregnancies after intracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte[J]. Lancet，1992，340(1)：17-18.

[3]谭晓珊，谭兵兵，叶贵丹，等.体外受精-胚胎移植156个治疗周期分析[J].贵州医药，2006，30(5)：402-404.

[4]谭兵兵，杨智敏，刁英.早期卵裂与胚胎形态学和生长速率联合评分预测胚胎发育潜能[J].中国妇幼保健，2007,22(19)：2670-2672.

[5]王俊霞，孙海翔，胡娅莉，等.附睾及睾丸精子行ICSI治疗无精子症妊娠结局[J].中华男科学杂志，2004，10(10)：751-754.

[6]Buffat C，Patrat C，Merlet F，et al.ICSI outcomes in obstructive azoospermia：influence of the origin of surgically retrieved spermatozoa and the cause of obstruction[J].Hum Reprod，2006， 21(4)：1018-1024.

[7]欧蕾，郭艺红，孙莹璞，等.不同来源精子行卵胞质内单精子注射临床妊娠结局分析[J].中华男科学杂志，2010，16(7)：656-659.

[8]徐志鹏，孙海翔，张宁媛.精子DNA损伤与辅助生殖技术[J].中华男科学杂志，2008，14(3)：259-263.

[9]Dozortsev D，Neme R，Diamond MP，et a l . Embryos generated using testicular spermatozoa have higher develomental potential than those obtained using epididymal spermatozoa in men with obstructive azoosperm ia[J]. Fertil Steril，2006, 86(3)：606-611.

[10]Borges E Jr， Rossi-Ferragut LM，Pasqualotto FF，et al . Testicular sperm results in elevatedm is carriage rates compared to epididymal sperm in azoospermic patients[J]. Sao Paulo Med J，2002，120(4)：122-126 .

[11] Bonduelle M，Van Assche E， Joris H，et al.Prenatal testing in ICSI pregnancies：incidence of chromosomal anomalies in 1586 karyotypes and relation to sperm parameters[J].Hum Reprod，2002，17(10)：2600-2614.

[12]Woldringh GH，Besselink1 DE，Tillema AHJ，et al.Karyotyping, congenital anomalies and follow-up of children after intracytoplasmic sperm injection with non-ejaculated sperm：a systematic review[J].Hum Reprod Update，2010，16(1)：12-19.

Intracytoplasmicsperminjectionforazoospermiabyusingepididymalortesticularsperm

Wangli，Chenjiaxian，Huxuemei，Yangzhimin

(Centre of Reproductive Medicine，The Affiliated Hospital of Zunyi Medical College，Guizhou Zunyi，563000，China)

ObjectiveTo compare the clinical results of intracytoplasmic sperm injection (ICSI) for azoospermia by using epididymal or testicular sperm.MethodsThe ICSI was performed using the sperm from epididymis or testis, respectively. The fertilization rate，the high quality embryo rate，the embryo implantation rate and the clinical pregnancy rate were evaluated.ResultsThe fertilization rate from testicular sperm was obviously lower than that from epididymal sperm (P<0.001). However, there was no significant difference for the high quality embryo rate, the embryo implantation rate and the clinical pregnancy rate between the use of epididymal and testicular sperm (P>0.05).ConclusionThe fertilization ability of epididymal sperm is better than that of testicular sperm，which couldn't change the treatment outcome.

azoospermia; sperm; intracytoplasmic sperm injection; surgical sperm retrieval

R698+2

B

1000-2715(2012)01-0066-02

[收稿2011-10-12;修回2011-11-15]

(编辑：王福军)