温度对糖原染色积分的影响

周建中

（江西省赣州市人民医院血液科 341000）

糖原染色对鉴别诊断急性白血病、骨髓增生异常综合征及某些肿瘤疾病具有重要价值[1]。但糖原染色关键步骤——标本浸入Schiff液后，大多未指明作用（反应）温度[1－4]，有的选择室温[5－6]，有的选择37℃[7]。故确实有必要探讨温度对糖原染色积分的影响，以努力提高细胞化学染色灵敏度。

1 资料与方法

1.1 一般资料 再生障碍性贫血（AA）、慢性嗜酸粒细胞白血病（CEL）、慢性粒细胞白血病（CML）、溶血性贫血（HA）、缺铁性贫血（IDA）、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、急性淋巴细胞白血病L1型（L1）或L2型（L2）、急性粒细胞白血病未分化型（M1）或部分分化型（M2）、急性早幼粒细胞白血病（M3）、急性粒－单核细胞白血病（M4）、急性单核细胞白血病（M5）、巨幼细胞贫血（MA）、骨髓增生异常综合征（MDS）、多发性骨髓瘤（MM）、非霍奇金淋巴瘤（NHL）及白细胞减少症（白减）等患者30例。CR、PR分别为完全缓解、部分缓解的缩写。

1.2 方法 严格按照文献[2]方法配制Schiff液。取每例患者骨髓片5张，均用乙醇甲醛液固定10 min[3，8]并水洗后，均用10 g／L过碘酸22℃氧化20 min[2－3，7，9]，水洗并晾干后，分别浸入4℃（1组）、10℃（2组）、20℃（3组）、30℃（4组）及37℃（5组）等5种温度Schiff液中反应60 min[7]，水洗后，用苏木素液复染。均以中性杆状核粒细胞、中性分叶核粒细胞判断阳性程度及计算积分[7]。

1.3 统计学处理 用PEMS 3.1统计软件分析。对积分结果进行双因素方差分析及LSD－t检验。

2 结 果

1～5组糖原染色积分依次升高，分别为（216.2±43.4）、（228.9±48.7）、（245.7±44.3）、（266.4±43.9）、（280.5±42.2）分，见表1。F处理＝70.294，P＜0.001；F配伍＝29.511，P＜0.001，即不同温度及不同患者之间差异有统计学意义。LSD－t检验示4℃组与37℃组比较，t＝14.478，P＜0.001；10℃组与37℃组比较，t＝11.605，P＜0.001；20℃组与37℃组比较，t＝7.832，P＜0.001；30℃组与37℃组比较，t＝3.173，P＜0.002。

表1 不同温度糖原染色积分比较

续表1 不同温度糖原染色积分比较

3 讨 论

化学反应速度大多随温度升高而加快，这是由于温度升高时活化分子增加，分子运动加快，反应物分子间的有效碰撞机会增加。糖原染色积分均数随温度升高呈依次增加，说明多糖类或糖原的乙二醇经过碘酸氧化成双醛基后，后者与Schiff液作用由无色品红变成紫红色化合物速度也加快。反应60 min后，4℃组与37℃组相差不是太大，说明低温时反应也较充分。如反应时间减至30 min[2]、20 min[1，3]或10 min[4]，可能4℃组与37℃组积分差异将会增加。随温度升高，铁染色、特异性酯酶染色也呈类似增强反应[10－11]。

总之，糖原染色有效温度广泛，选用37℃可提高糖原染色反应强度；温度确实为糖原染色反应强度的重要影响因素。

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