HPLC分析方法在含麻黄制剂中的应用

毛泉明 王忆勤 燕海霞 张 宁* 王松涛 李浩浩

（上海中医药大学，上海 201203）

麻黄碱与伪麻黄碱色谱分析方法众多[1-3]，本研究参考2010年版中国药典[4]，在复方宁喘颗粒剂的基础上，建立一种新型的分离分析麻黄碱与伪麻黄碱的色谱方法，并能适用于某些含量麻黄制剂的分离分析。

复方宁喘颗粒剂源于上海市名中医朱瑞群教授的临床经验方，由麻黄、黄芩、地龙等八味药材组成，经临验证本方具有良好的平喘、解痉、抗过敏等功能，并能改善微循环，控制炎症病灶及炎症反应等[5]。

1 仪器与试剂材料

仪器有安捷伦1200系列高效液相色谱仪，Satorius CP 225D 电子天平。 试剂材料是乙醚、三乙胺、磷酸、二正丁胺，分别为分析纯并购于国药集团化学试剂有限公司，甲醇（色谱纯）；麻黄碱（171241-200404）与伪麻黄碱（171237-200505）购于中国药品生物制品检定所；麻黄等中药分别购于上海药房股份有限公司徐重道中药饮片厂。小青龙合剂（110102）产于江西济民可信药业有限公司，通宣理肺丸（0015247）产于北京同仁堂股分有限公司同仁制药厂，小儿清肺化痰颗粒（11020923）产于神威药业有限公司。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱： Phenomenex 4u Polar-Rp 80A 250×4.6mm，保护柱：Phenomenex 填料同色谱柱；温度为15℃；波长是210nm；流速为1.0mL/min；流动相：0.092%磷酸水溶液，含0.04%三乙胺与0.02%二正丁胺。

2.2 供试液的配制

2.2.1 对照品

精密称取对照品麻黄碱与伪麻黄碱适量，分别用1.44%磷酸溶液定容备用，测定前用1.44%磷酸溶液稀释并配制成混合对照品溶液。

2.2.2 样品与阴性样品

样品供试液是根据复方宁喘颗粒剂处方，经水煎提取制成样品试液；同样制成相应的阴性供试液。

2.3 结果

经对色谱条件选择与优化，确定了2.1的色谱条件，进样量为10μL，并在该条件下对麻黄碱与伪麻黄碱两组分分离分析，结果麻黄碱与伪麻黄碱均达到基线分离，而且色谱峰峰形与间距较好；阴性样品无干扰（图1）。此外，应用该方法对含麻黄制剂进行色谱分析，也得到较满意的结果，证明该方法稳定可靠，快速，简便易行，具有应用价值。

3 讨 论

应用HPLC测定麻黄中的麻黄碱与伪麻黄碱的方法众多[1-3]，2010版药典规定应用新方法[5]测定单味麻黄中的麻黄碱与伪麻黄碱，该方法对于一些含麻黄的制剂可能有一定的局限性，因此本研究在该色谱条件的基础上对复方宁喘颗粒剂中麻黄的色谱条件进行探索。

3.1 不同流动相配比对分离的影响

图1

图2

当检测波长在210nm、流速为1.0mL/min，柱温30℃时，甲醇与0.092%磷酸（含0.04%三乙胺与0.02%二正丁胺）配比为1.5∶98.5（2010版药典法）及（0∶100），以处方药为供试液，分别进样，进样量10μL，进行色谱分析，结果麻黄碱与伪麻黄碱没法分离。

3.2 不同温度对分离的影响

以100%的含0.092%磷酸水溶液为流动相，波长与流速不变，分别在30、25、20、18、与15℃时分析样品，结果当温度15℃时，样品中的麻黄碱与伪麻黄碱达到基线分离，而且色谱峰峰形与间距较好（见图1中的样品图）。温度在此对分离的影响较大，因此在进行色谱分析时要严格控制柱温。

3.3 应用

本研究首次应用极性乙醚连接苯基键合硅胶为填充剂的色谱柱来分析复方中的麻黄成分，分别进行色谱分析的制剂有：小青龙合剂，通宣理肺丸，小儿清肺化痰颗粒（图2），结果较满意。该方法不仅适用于分离分析复方宁喘颗粒剂，也适用于其他一些含量有麻黄药物的制剂，具有一定的应用于价值。

[1]葛斌,罗燕梅,许爱霞,等.HPLC测定麻黄药材中麻黄碱与伪麻黄碱的含量[J].中国中药杂志,2008,43(3):173-175.

[2]周斌,郑鹏武,张铁军,等.HPLC测定麻杏石甘汤中麻黄碱和伪麻黄碱的含量[J].上海中医药杂志,2008,42(1):71-73.

[3]王宝琴,苏健,韩敏彩,等.天麻及其制剂中天麻素含量测定方法研究概述[J].中国中医药信息杂志,2004,11(3):274-275.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典,2010年版 一部[S].北京:化学工业出版社,2010:300.

[5]燕海霞,王忆勤,王广东,等.复方宁喘雾化剂提取工艺的正交实验研究[J].时珍国医国药,2008,19(10):2392-2393.