趋化因子CCL20及其受体CCR6在胰腺癌组织中的表达及意义

初祯 陈少夫

趋化因子CCL20及其受体CCR6在胰腺癌组织中的表达及意义

初祯 陈少夫

越来越多的数据表明，趋化因子及其受体在胰腺癌[1-3]的肿瘤生物学中起着重要作用。本研究检测趋化因子CCL20及其受体CCR6在胰腺癌中的表达，分析两者的相关性，探讨其在胰腺癌发生、发展中的作用。

一、材料与方法

1．材料：收集42例中国医科大学附属盛京医院病理科2005年至2008年间诊断为胰腺导管腺癌(PADC)的组织蜡块。同时选取十二指肠肿物切除术所获得的10例正常胰腺组织为对照。

2．方法：采用快捷免疫组化MaxVision两步法检测CCL20及CCR6的表达。兔抗人CCL20和CCR6多抗购自北京博奥森生物技术有限公司，工作浓度1∶100。即用型快捷免疫组化MaxVision试剂盒(鼠/兔)及Max007TM原位微信号(DAB)放大试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司，按说明书操作。胞质或胞膜中出现黄色或褐色颗粒者为阳性。每张切片随机选取4个高倍视野，分别根据染色强度和阳性细胞比例进行评分。染色强度：无着色0分，淡黄色1分，黄色2分，棕黄色或褐色3分；阳性细胞比例：≤5% 0分， 5%～25% 1分，25%～50% 2分，50%～75% 3分，>75% 4分。两者乘积0为阴性，≥1分为阳性。

3．统计学处理：采用SPSS13.0软件分析。阳性率的比较采用χ2检验，相关性的分析采用Spearman等级相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。

二、结果

1．CCL20和CCR6阳性表达率：CCL20主要表达于肿瘤细胞的胞质或胞膜中(图1)，正常细胞的胰岛或胰腺导管上皮细胞亦有少量表达。42例胰腺癌组织中，30例(71.4%)表达阳性，10例正常胰腺组织中，2例(20%)表达阳性，两者差异具有统计学意义(P<0.05)。CCR6主要表达于肿瘤细胞的胞质或胞膜中，42例胰腺癌组织中，32例(76.2%)表达阳性，10例正常胰腺组织中，3例(30%)表达阳性，两者差异亦具有统计学意义(P<0.05)。胰腺癌组织中CCL20与CCR6表达呈正相关(r=0.352，P=0.022)。

2．CCL20和CCR6表达与胰腺癌临床病理特征的关系：CCL20蛋白表达与肿瘤分化程度相关(P<0.05)，与年龄、性别、肿瘤临床分期及淋巴结转移等无相关性；CCR6的表达与肿瘤病理特征均无相关性(表1)。

图1胰腺癌组织CCL20(a)、CCR6(b)的表达(免疫组化 ×400)

表1CCL20和CCR6表达与胰腺癌临床病理特征的关系

讨论趋化因子是一族具有趋化作用的细胞因子，分子量较小，对白细胞迁移起关键作用，通过与靶细胞膜上相应的趋化因子受体结合发挥作用[4-5]。趋化因子受体属G蛋白耦联的7次跨膜受体超家族，其N末端与配体结合，胞内区与G蛋白耦联，C末端含丝氨酸/苏氨酸，可磷酸化，参与信号转导。趋化因子与其受体结合后在调节白细胞定向移动、细胞生长、发育、分化、凋亡、组织损伤、淋巴细胞归巢、免疫应答、HIV感染和血管生成等众多生理、病理过程中起着非常重要的作用 。近来，越来越多的证据表明，趋化因子与肿瘤的侵袭、转移密切相关。肿瘤细胞分泌的趋化因子与相应受体结合后能促进癌间质炎性细胞浸润、肿瘤血管生成、基质蛋白降解等，但其确切机制仍需进一步研究。

目前已经发现几十种趋化因子，根据半胱氨酸残基位置的不同，趋化因子分为4个亚族，即C、CC、CXC与CX3C，相应的受体称为XCR、CCR、CXCR与CX3C[6-7]。CCL20是近年来发现的一种CC亚族的趋化因子，它在白血病、淋巴瘤、黑色素瘤、肝癌、前列腺癌、大肠癌、肺癌及口腔鳞状细胞癌[8-11]等癌组织中高表达。Kleeff等[12]报道，胰腺癌组织存在CC类趋化因子CCL20/Mip-3α及其受体CCR6 mRNA高表达。本研究结果显示，CCL20及CCR6在胰腺癌中均高表达，同时CCL20表达与胰腺癌分化程度有关，与Kleeff等结果一致，但其作用机制有待深入研究。

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10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2012.02.022

110004 沈阳，中国医科大学附属盛京医院消化内科

陈少夫，Email:csf196211@yahoo.com.cn

2011-05-03)

(本文编辑：吕芳萍)