红花配方颗粒质量标准研究

2012-11-01胡昌江戴德蓉

亚太传统医药 2012年2期

周维，胡昌江，杨丽，戴德蓉

（四川新绿色药业科技发展股份有限公司，四川彭州 611930）

红花配方颗粒是由红花单味中药经过提取、浓缩、干燥、制粒而成。其性味、归经、功效与原饮片基本一致。红花药材质量标准目前收载于2010年版中国药典一部［1］中，而红花配方颗粒却缺乏有效的质量标准，在全国范围内各生产企业皆用其内控标准进行质量控制。为有效地控制红花配方颗粒的质量，保证用药安全、有效、可控，笔者按照国家食品药品监督管理局颁发的《中药配方颗粒管理暂行规定》通知要求，参考有关的文献［2］，采用薄层色谱法对红花配方颗粒进行定性鉴别，采用高效液相色谱法对红花配方颗粒中的羟基红花黄色素A进行含量测定。

1 实验部分

1.1 仪器与试药

CAMAG Lionmat-5半自动薄层点样仪，CAMAG TLC Visualizer薄层成像系统；Waters 2695-2996高效液相色谱仪；empower色谱工作站；BP211D（Sautoris，德国）电子天平；KQ3200B型超声波清洗器；硅胶G板（青岛海浪硅胶干燥剂制造厂）。

羟基红花黄色素A（批号：111637-200905，供含量测定用，以91.8%计算，购于中国药品生物制品检定所）；红花（批号：120907-201010，TLC法鉴定，购于中国药品生物制品检定所）；红花配方颗粒（批号：0806047，0807095，0812028，0901091，四川新绿色药业科技发展股份有限公司）。

甲醇（迪马公司，色谱纯）、乙腈（迪马公司，色谱纯）、水为重蒸水，其余试剂均为分析纯。

1.2 定性鉴别实验

1.2.1 供试品溶液的制备

取本品（批号为0806047）约0.5g，加80%丙酮溶液5mL，密塞，振摇15min，静置，吸取上清液，即为供试品溶液。

1.2.2 对照药材的制备

取红花对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。

1.2.3 薄层层析

吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸-甲醇（3∶7∶1∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点，见图1。

图1 红花配方颗粒TLC（365nm）

1.3 含量测定

1.3.1 色谱条件

色谱柱：迪马 Diamonsil C18（5μm，250mm×4.6mm）；流动相：乙腈-甲醇-0.2%磷酸（2∶26∶72）；检测波长：403nm；流速：1mL·min-1；柱温：35℃。此色谱条件下，供试品中羟基红花黄色素A色谱峰与相邻的色谱峰达到了基线分离，见图2。

1.3.2 供试品溶液的制备

取本品适量，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理40min，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

1.3.3 对照品溶液的制备

取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25%甲醇制成每1mL含0.15mg的溶液，即得对照品溶液。

图2 羟基红花黄色素A（A）和红花配方颗粒（B）的HPLC

1.3.4 线性关系

精密称取羟基红花黄色素A对照品4.55mg，置25mL量瓶中，加25%甲醇溶解，稀释至刻度，摇匀，分别进样0.5 μL、6μL、10μL、15μL、20μL，测定峰面积，以进样量（X，μg）为横坐标，以峰面积值（Y）为纵坐标进行线性回归计算，得回归方程为Y ＝2×106X+201471（r＝0.9998），表明羟基红花黄色素A进样量在0.091～3.64μg／mL范围内线性关系良好。

1.3.5 精密度试验

精密吸取“1.3.3”项下的对照品溶液连续进样6次，每次10μL，测得羟基红花黄色素A峰面积的RSD为0.37%，表明仪器精密度良好。

1.3.6 重复性试验

取同一批样品（批号为0806047）适量，按“1.3.2”项下方法分别制备6份供试品溶液，分别测定羟基红花黄色素A峰面积积分值，结果RSD为0.23% ，表明方法重复性良好。

1.3.7 稳定性试验

取红花配方颗粒（批号为0806047）适量，按“1.3.2”项下方法制备供试品溶液，室温下保存，分别于0h、2h、4h、6h、8h各进样10μL，测定羟基红花黄色素A的峰面积，结果RSD为0.23% ，表明供试品溶液在8h内稳定。

1.3.8 回收率试验

取已知含量的红花配方颗粒（批号为0806047）6份各约0.5g，精密称定，分别精密加入羟基红花黄色素A对照品适量，按“1.3.2”项下方法制备，测定羟基红花黄色素A的含量，计算回收率，结果见表1。