HPLC测定灵丹草合剂中洋艾素的含量

2012-11-01邓忠峻

亚太传统医药 2012年2期

高丽，邓忠峻

（云南盘龙云海药业有限公司，云南楚雄 675000）

臭灵丹草为菊科植物翼齿六棱菊属Laggera pterodonta（DC.）Benth.的干燥地上部分［1］，民间广用其水煎剂治疗上呼吸道感染、扁桃腺炎、口腔炎，防治流感等［2］。

药理试验亦证明臭灵丹草具有治疗急性支气管炎，祛痰、抗肿瘤作用［3］，灵丹草合剂是由臭灵丹草药材经提取挥发油、煮提、浓缩，加入挥发油及橙皮酊等辅料制剂而成，具有清热疏风，解毒利咽，止咳祛痰的功效，用于风热邪毒，咽喉肿痛，肺热咳嗽；急性咽炎，扁桃体炎，上呼吸道感染见上述症候者［4］。该制剂质量标准［4］中含量测定方法为标准曲线法，为了提高该制剂的质量控制，我们以从臭灵丹草水煎浓缩液中提取分离得到的洋艾素（C20H20O8）［5-6］为对照品，采用高效液相色谱法对灵丹草合剂中洋艾素的含量进行测定。结果表明，此方法更为简便、快速、准确，可用于该制剂的质量控制。

1 仪器与试药

安捷伦HP-1100型高效液相色谱仪；洋艾素对照品（由中国科学院昆明植物研究所提供，采用面积归一法测定，其纯度达99.4%以上）；灵丹草合剂（云南盘龙云海药业有限公司自制样品，批号060301、060302、060603）；乙腈为色谱纯，水为二次蒸馏水，其余试剂试药均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱采用大连依利特 C18（Hypersil ODS2，5μm，4.6 mm×200mm）；以乙腈-1%甲酸溶液（35：65）为流动相，检测波长350nm，流速为1.0mLomin-1，柱温30℃，进样量为10μL。

2.2 对照品溶液的制备

取洋艾素对照品适量，精密称定，加乙腈制成每1mL含20μg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

取本品，摇匀，精密量取5mL，置25mL量瓶中，加乙腈至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）过滤，取续滤液，即得。

2.4 阴性对照溶液的制备

按灵丹草合剂处方比例及制备工艺制备不含臭灵丹草药材的阴性样品，按上述供试品溶液制备方法制备，即得。

2.5 系统适用性试验

在上述色谱条件下分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10μL，注入液相色谱仪，得色谱图1；结果供试品色谱图中呈现与洋艾素对照品保留时间相一致的色谱峰，阴性对照在此处未见色谱峰，说明阴性对照无干扰，理论塔板数按洋艾素峰计算不低于4000。

图1 样品HPLC色谱

2.6 线性关系考察

精密称取洋艾素对照品适量，制成浓度为252.8 μg·mL-1的对照品贮备液，再加乙腈分别稀释成每1mL含3.16、6.32、12.64、25.28、37.92、50.56、63.20μg的溶液，分别精密吸取各溶液10μL，注入液相色谱仪，进行测定，以洋艾素进样浓度对峰面积值作标准曲线，计算得回归方程为Y＝32.42979X-0.187644（r＝0.99995），表明洋艾素在3.16～63.20μg·mL-1范围内呈良好线性关系。