去马兜铃朱砂莲提取物对小鼠伤害性疼痛的影响

张金芝 高晓红 张敏 陈冬雪 范新田

朱砂莲为马兜铃科马兜铃属植物，性味苦、辛、寒。其主要功能清热解毒，消肿止痛［1］。但其化学成分马兜铃酸可直接损伤肾小管及间质，致近端肾小管刷状缘脱落、坏死［2］。有报道广西朱砂莲药材水提物和醇提物均能明显的抑制小鼠巴豆油致耳廓肿胀、腹腔毛细血管通透性亢进;且能明显减少醋酸致小鼠扭体次数及延长热板致病的潜伏期有镇痛作用［3］。本课题旨在利用现代工艺技术进行提取、萃取、去除朱砂莲中有害成分马兜铃酸，并观察其对光热疼痛模型小鼠的影响，以期开发安全有效的中药镇痛剂。

1 资料与方法

1.1 一般资料 实验动物:昆明种小鼠(♀♂兼用，由长春高新医学动物实验研究中心提供)。药品与试剂:朱砂莲(购于长春中药材批发市场);哌替啶(沈阳第一制药厂，011108);阿司匹林(华北制药厂，990208)。实验仪器:光热尾痛仪(SW-200，成都泰盟科技有限公司)。

1.2 实验方法 本实验应用小鼠光热尾痛仪。将小鼠固定在特制的塑料筒中，令其尾部暴露在外并自然下垂，待动物安静20 min后再予测定。辐射热源照射相当于尾部中、下三分之一交界处的皮肤，当照射开始同时启动秒表，待动物尾部出现明显逃避反应时，关闭光源并同时停止计时［4］。预选痛阈4～6 s昆明种小鼠50只，♀♂各半，体重18～22 g，随机分5组，分别为对照组(NS，生理盐水0.1 ml·10 g-1)、阿司匹林组(ASP，0.3 g/kg)、哌替啶组(Pethidine，50 mg/kg)、去马兜铃酸朱砂莲醇提物低剂量组(ZhSL-L，50 mg/kg)、朱砂莲醇提物中剂量组(ZhSL-M，100 mg/kg)、朱砂莲醇提物高剂量组(ZhSL-H，200 mg/kg)，各组均ig给药，分别测定30 min、60 min、90 min、120 min、180 min、240 min 小鼠痛阈值。甩尾反应潜伏期(Tail-Flick Latency，TFL)。每5 min测定一次，取三次测定的平均值作为基础伤害性感受阈。若动物在镇痛作用下TFL延长至超过15s，则停止照射并以15 s作为甩尾潜伏期的上限，以免照射过久灼伤皮肤。

2 实验结果

实验结果如表1所示。

表1 去马兜铃朱砂莲提取物对小鼠光热刺激甩尾实验的影响(±s)

表1 去马兜铃朱砂莲提取物对小鼠光热刺激甩尾实验的影响(±s)

注:与NS组比较:*P＜0.05，＊＊P＜0.01，＊＊＊P＜0.001;与基础痛阈比较:P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001

3±0.82 3.73±0.80 3.58±0.87 ASP 200 3.51±0.75 4.30±1.05* 5.45±1.20* 5.21±1.14* 4.56±0.84* 4.25±0.58 4.13±1.08 Pethidine 25 3.32±0.66 6.37±1.25＊＊＊ 5.99±1.35＊＊ 4.87±1.15* 4.61±1.15* 3.87±0.70 3.70±1.05 ZhSL-L 50 3.38±0.83 3.99±0.71 5.42±0.89＊＊ 4.29±0.95 4.28±0.53 3.87±0.77 3.75±0.78 ZhSL-M 100 3.20±0.59 4.04±0.67 5.64±1.36＊＊ 5.52±1.01＊＊ 4.48±0.60* 4.10±0.58 4.09±0.72 ZhSL-H 200 3.21±0.85 4.26±0.78 5.83±1.32＊＊＊ 5.79±1.08＊＊ 4.28±0.66*30 min 60 min 90 min 120 min 180 min 240 min NS 0.1 ml·10 g-1 3.29±0.79 3.49±0.75 3.98±0.88 3.74±1.15 3.6剂量(mg/kg) 基础痛阈(s) 给药后痛阈(s)4.07±1.06 4.70±1.54

3 讨论

目前国家食品药品管理机构已经决定加强对一些有含马兜铃酸的中药材及其制剂的监督管理，因为服用含马兜铃酸的中药可引起肾脏损害给患者带来生命危险。含有马兜铃酸的中草药种类很多包括青木香、朱砂莲等等，由含有马兜铃酸药材的中成药也有很多。有报道引起马兜铃酸肾病的药物为冠心苏合丸、龙胆泻肝丸，其中女性占69.49%，平均年龄为64.4岁，平均服用药物史为8年，通常认为临床滥用中药及对中药毒性认识不足而是引起的肾损害的主要原因［5］。利用现代工艺技术进行提取、萃取、去除朱砂莲中有害成分马兜铃酸是使朱砂莲更大的发挥镇痛治疗作用而对人体危害减少的重要方法。本研究结果表明，与给药前和对照组比较，小鼠一次性灌胃给去马兜铃朱砂莲提取物50、100、200 mg/kg后与基础痛阈值比较，明显延长缩尾反应潜伏期;与阴性对照组比较也明显延长缩尾反应潜伏期。给药后60 min开始显效，60、90、120 min时较明显，提示去马兜铃朱砂莲提取物具有显著的镇痛作用，且其中、高剂量组的作用强度与阿司匹林相似。

［1］ 刘凡，吴家荣，李林，等.贵州朱砂莲药材的生药鉴定.贵州医药，1999，23(3):157-159.

［2］ 赵辉，张健夫.马兜铃酸的结构分析和性质研究.周口师范学院报，2003，20(2):34-36.

［3］ 白景玲，饶光宇，陈秀芬，等.血苕与广西朱砂莲抗炎镇痛作用的比较研究中药药理与临床，2007，23(2):43-44

［4］ 李兴富，淤泽溥，李秀芳，等.香藤胶囊对小鼠的镇痛作用.中国药物依赖杂志，2003，12(4):270-271.

［5］ 史文慧，郭蓉，罗朝利，等.59例马兜铃酸肾病的报道.药物流行病学杂志，2008，17(2):101-102.