十堰地区2010年病原菌耐药性监测

张文虹 陈秀兰

湖北省十堰市妇幼保健院检验科，湖北十堰 442000

目前临床抗菌药物的滥用现象十分严重，由此引发和导致的病原菌株耐药性增加已经成为全球性问题，临床医师及时了解掌握本院病原菌耐药性的变化，对指导临床合理使用抗生素具有十分重要意义。本研究对2010年我院微生物实验室病分离的病原菌构成、药物耐药率及来源进行了回顾性分析，现总结报道如下：

1 资料与方法

1.1 菌株来源

2010年1月1日～12月31日我院微生物实验室共分离病原菌2 294株，去除同一患者相同部位分离的重复菌株后，共1 891株，其中，住院患者分离1 671株，占88.4%，门诊患者分离220株，占11.6%。

1.2 试剂

不同标本分离病原菌所需培养基干粉、M-H药敏琼脂培养基干粉，为英国OXOID公司产品，除含万古霉素巧克力平皿及科玛嘉真菌显色培养皿外，其他培养基及药敏培养基自配。细菌药敏纸片为英国OXOID公司产品。

1.3 方法

所有送检标本按照《全国临床检验操作规程》（第3版）进行分离和鉴定[1]；细菌药敏试验采用 CLSI（2009）[2]药敏纸片扩散法。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC35218、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853。采用 Nitrocephin纸片法（英国OXOID公司）检测是否产β-内酰胺酶；肺炎链球菌用1 μg苯唑西林药敏纸片预测青霉素是否敏感[2]；青霉素耐药株用E-test法确证；用CLSI推荐的纸片筛选和酶抑制剂增强纸片确认法测定菌中产ESBLs株。

1.4 统计学方法

应用WHONET 5.5软件统计病原菌和药敏结果，描叙性分析病原菌对不同抗菌药物的耐药性。

2 结果

2.1 病原菌标本的来源

本研究共检出病原菌1 891株，其中，分离病原菌最多的是痰液标本（854株），其次为尿液标本（276株）。见表1。

2.2 病原菌的分布情况

我院共分离病原菌1 891株，其中，革兰阴性杆菌占76.6%，革兰阳性球菌占23.4%，革兰阴性杆菌中检出最多的常见病原菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌；检出非发酵菌539株，主要为不动杆菌属（245株）、铜绿假单胞菌（241株）和嗜麦芽窄食单胞菌（62株）；不动杆菌属主要以鲍曼不动杆菌为主，共检出220株，占所有不动杆菌属的89.8%（220/245）。见表2。

表2 病原菌构成及分布情况（株）

2.3 常见革兰阴性杆菌对各种抗菌药物的耐药率

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs率分别为64.2%、51.8%，但二者对亚胺培南和美罗培南均无耐药。见表3。

2.4 常见革兰阳性球菌对各种抗菌药物的耐药率

我院检出革兰阳性球菌443株，其中，凝固酶阴性的葡萄球菌（CNS）160株，粪肠球菌48株，肺炎链球菌20株，金黄色葡萄球菌共检出155株，占葡萄球菌属的49.2%（155/315），其中，抗药性金黄色葡萄球菌（MRSA）达73株，占金黄色葡萄球菌的47.1%（73/155）；耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）占 CNS 的 86.2%（138/160）。 见表4。

表3 常见革兰阴性杆菌对各种抗菌药物的耐药率（%）

3 讨论

本研究结果显示，革兰阴性杆菌是2010年十堰地区感染性疾病的主要致病菌，与王勇等[3]报道基本一致。革兰阴性杆菌中检出最多的是大肠埃希菌，其次为肺炎克雷伯菌，高于张秀珍等[4]的报道，与本院往年相比，检出率有逐年增加的趋势。肠杆菌科细菌中，产ESBLs菌株主要为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，所有肠杆菌科细菌除对碳青霉烯类100%敏感，对β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合物和氨基糖苷类90%以上敏感外，对其他药物平均耐药率高达60%以上，表明碳青霉烯类、β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合物及氨基糖苷类仍为目前临床治疗肠杆菌科细菌感染最敏感的药物。我国肠杆菌科细菌产生的ESBLs主要是CTX-M型酶和少量SHV型酶[5]。CTX-M酶主要水解头孢噻肟，因此，肠杆菌科细菌对头孢噻肟的耐药率明显高于头孢他啶。我院监测结果显示，产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟及氨曲南的耐药率差异不明显，推测可能是其产ESBLs基因型已发生变化，需进一步研究。

表4 常见革兰阳性球菌对各种抗菌药物的耐药率（%）

本研究革兰阳性病原菌中，MRSA占金黄色葡萄球菌的49.2%，低于其他医院报道[6]；MRCNS占CNS的86.2%，与其他医院报道结果接近[6]。本研究未发现万古霉素和利奈唑胺耐药株，无论是否为MRSA菌株，氯霉素敏感性达89%以上。提示尽管临床上极少使用氯霉素，但仍有必要将其作为金葡菌的常规药敏。肠球菌属细菌主要以粪肠球菌为主，共检出48株，占肠球菌属的54.5%（48/88），所有肠球菌均未发现万古霉素和利奈唑胺耐药株。链球菌属细菌主要以肺炎链球菌为主，主要分离自婴儿肺炎痰液标本，共检出20株，占链球菌属的50.0%（20/40），所有链球菌属细菌对万古霉素和利奈唑胺100.0%敏感，对苯唑西林的耐药率仅为5.0%，对其他药物均存在不同程度耐药。

革兰阴性杆菌中，本院共检出220株鲍曼不动杆菌，占不动杆菌属的89.8%（220/245），绝大多数分离自痰液标本，且ICU、神经外科等使用人工呼吸机最频繁的科室分离的菌株数远高于其他科室，推测人工呼吸机可能是感染的重要途径。鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率高达75.4%，高于近期的文献报道[7-8]。

综上所述，抗生素耐药性问题已成为全球关注的焦点，而我国是世界上滥用抗生素最为严重的国家之一[9-10]。因此，加强细菌耐药监测，以及时发现临床分离细菌耐药性变化的特点；临床药师与临床医师应密切合作，以指导临床合理选用抗生素，保障患者健康。

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