猪瘟(HC)、口蹄疫(FMD)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗同时分点免疫的效果分析

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(1.浙江大学动物科学学院，浙江杭州 310058；2.嘉兴市畜牧兽医局，浙江嘉兴 314050)

目前，猪瘟(HC)、口蹄疫(FMD)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)仍是威胁养猪业最严重的传染病，为国家规定强制免疫的生猪病种[1]。按照传统免疫程序，一般采用首免注射猪繁殖与呼吸综合征疫苗，7～10 d后注射猪瘟、口蹄疫疫苗，2个月后二免。这种程序比较复杂，特别是反复捕捉和注射，造成人力浪费，而且会对猪只造成很大应激反应，免疫效果不佳。为提高免疫工作效率和HC、FMD、PRRS三种疫苗同时分点免疫的免疫效果，特进行本试验。

1 材料与方法

1.1试验动物 试验在嘉兴市某自繁自养规模猪场进行，该猪场常年存栏母猪300头，经检测供试仔猪均为HC、FMD、PRRS抗体阴性。

1.2试验疫苗 HC活疫苗(细胞苗，由杭州荐量生物药厂生产，批号201004108)；FMD油乳剂灭活苗(中牧兰州生物药厂生产，批号201101002)；PRRS油乳剂灭活疫苗(由中牧公司生产，批号201006002)。

1.3检测试剂 HC和FMD O型正向血凝抗原检测试剂和稀释剂均由中国农业科学院兰州兽医研究所生产(批号分别为20110515和20110520)，PRRS抗体检测ELISA试剂盒由法国LSI公司生产(批号2-VETPRA-008)。

1.4检测方法 采用正向间接血凝试验和ELISA[2-3]。

1.5安全试验 随机选择健康状况良好、饲养条件一致、体重15～25 kg断奶仔猪20头，分为A、B两组，每组10头，A组注射HC、FMD和PRRS疫苗，B组注射HC、FMD疫苗。严格按疫苗说明书操作，注苗后每1 h测量一次体温，共测3～4次，同时观察注射局部的反应和全身反应。供试疫苗均顺利通过安全试验。

1.6试验设计

试验一：选择日龄相近、饲养条件一致，健康状况良好的断奶仔猪150头，分成A、B、C三组，每组50头。A组按照传统免疫程序注射HC和FMD疫苗；B组按照传统的免疫程序分别注射HC、FMD、PRRS疫苗；C组按照同时分点注射HC、FMD、PRRS疫苗，具体免疫程序详见表1。

免疫注射后20～30 d采集血液分离血清，进行抗体检测。HCV、FMDV抗体用正向间接血凝试验法检测；PRRSV抗体用ELISA法检测(PRRSV抗体效价≥1∶32，HCV抗体效价≥1∶32为免疫合格，ELISA法合格率见试剂盒说明书)。

试验二：猪场PRRSV感染情况监测：随机选择3头未经PRRS疫苗免疫母猪所产仔猪15头(日龄为50日龄)进行PRRSV感染情况检测。

表1 仔猪接种不同疫苗的免疫程序

1.7饲养管理 按试验设计，各组单独一圈，隔离饲养。饲养管理程序按常规进行，临床观察记录不同试验时期试验猪群的母猪繁殖障碍(返情、流产、早产、死胎、木乃伊)和仔猪成活、死亡、淘汰等情况。

2 结果与分析

2.1试验期间各组试验猪只均未见明显免疫副作用 该项结果与相关文献报道[4-5]基本一致。

2.2试验A组、B组50～60日龄HC、FMD 2种疫苗同时免疫后28 d猪瘟抗体检测结果 详见表2。

表2 HC疫苗二免后28 d抗体检测结果

由表2可见，HC二免后28 d，免疫注射过FMD疫苗的B组HC抗体水平明显高于A组(未注射PRRS疫苗的猪瘟抗体水平)，免疫抗体的合格率达到90.0%，与A组(合格率24.0%)相比，差异显著(P<0.05)。

2.3C组HC、FMD、PRRS三种疫苗同时分点免疫后的抗体检测结果 详见表3、表4、表5。

表3 三种疫苗同时分点免疫后HCV抗体检测结果

由表3可见，C组HC、FMD、PRRS三种疫苗同时分点注射后，对HC抗体水平未见明显抑制作用，首免20 d后抗体合格率达到68.0%，平均抗体滴度为25.4，二免28 d后抗体合格率达到91.7%，平均抗体滴度为28.9，具有良好的免疫保护作用。

表4 三种疫苗同时分点免疫后FMDV抗体水平

由表4可见，HC、FMD、PRRS三种疫苗同时分点注射后，对FMDV抗体水平未见明显抑制作用，首免20 d后抗体合格率达到80.0%，平均抗体滴度为27.2，二免28 d后抗体合格率达到81.3%，平均抗体滴度为28.0，具有良好的免疫保护作用。

表5 三种疫苗同时分点免疫后PRRSV抗体水平检测结果

由表5可见，C组猪的PRRS母源抗体阳性率为16.0%，经PRRS首免、二免后的抗体阳性率虽略有提高，分别为26.0%和31.3%，但抗体水平仍然不高。通过跟踪观察，该批仔猪均未出现PRRS临床症状。

2.4猪场PRRSV感染情况监测结果 详见表6。

表6 猪场PRRSV感染情况

由表6可见，经ELISA检测，随机选择3头未经PRRS疫苗免疫母猪所产仔猪15头，经PRRSV感染情况检测，PRRS阳性率达到60.0%。

2.5免疫前后PRRS发病情况比较 根据猪场2008～2011年的连续跟踪调查，进行HC、FMD、PRRS三种疫苗同时分点免疫后，乳猪PRRS发病率由2008年的18.7%降至2009年0.4%，2010年和2011年则未见发病；断奶仔猪发病率则由2008年的21.8%降至2009年的1.5%和2010年的0.7%，死亡率由原来的17.2%降至2009年的0.9%和2010年的0.2%，2011年则未见发病死亡。PRRS得到了有效控制(详见表7)。

表7 三种疫苗免疫前后PRRS发病情况调查

3 小结与讨论

3.1经本次试验，HC、FMD、PRRS三种疫苗同时分点免疫注射后，未见产生相互间的抑制和干扰作用。仔猪30～35日龄、60～65日龄两次同时接种PRRS、HC、FMD三种疫苗，抗体检测均超过免疫合格水平，表明三种疫苗同时分点免疫注射是可行的，这与国内其他相关报道基本一致[6]。

3.2本次试验PRRS母源抗体阳性率达到16.0%，说明该猪场还存在隐性感染情况，总体抗体阳性率普遍较低,原因可能与目前采用的PRRS抗体检测ELISA试剂盒只对猪血清中抗PRRSV的N蛋白敏感有关。且不能定性定量检测PRRS免疫抗体，故检测方法有待进一步改进[7]。

3.3PRRS感染猪对呼吸系统和淋巴系统影响较大[8，9]，对HC等疫苗的免疫效果可产生抑制作用，可能引起HC免疫失败情况。从试验情况看，已感染PRRSV的仔猪，不接种PRRS疫苗，HC二免后28 d，平均抗体水平为22.8，只有24.0%的仔猪免疫抗体滴度达到有效免疫保护水平；而接种PRRS疫苗，HC二免后28 d，平均抗体水平为27.5，仔猪免疫抗体滴度超过有效免疫保护水平，HC免疫抗体合格率达90.0%。

3.4检测结果显示，HC和FMD二免后抗体水平普遍高于一免后抗体水平，并能达到国家规定的群体合格率在70%以上的要求。因此，HC和FMD严格实施二次免疫能有效提高机体的抵抗力，防止重大疫病发生。

3.5在实际生产中，原来三种疫苗分别免疫注射，必须多次抓猪给猪只造成反复应激；本试验采用三种疫苗同时分点免疫，省工省力，可减少不良应激。根据相关文献报道，已有部分地区将此种免疫程序运用到生产实践，效果良好[10-11]。

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[3]农业部.农业部关于印发《高致病性禽流感防治技术规范》等14种动物疫病防治技术规范的通知[Z].农医发[2007]12号.北京：农业部，2007.

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[7]任宇斓，于厚军，蒋文生，等.猪口蹄疫、猪瘟、高致病性蓝耳病三种疫苗不同组合同时分点免疫效果观察与分析[J]．中国动物检疫，2011，28(5)：67-71.

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[11]李敏玲，王俊玲，郑红霞.猪瘟疫苗(兔源)猪O型口蹄疫疫苗、猪蓝耳病疫苗不同组合免疫的效果[J]．畜禽业，2009(1)：55-56.