瑞芬太尼在妊娠大鼠应用后对新生小鼠运动感觉及学习功能影响的研究

高 勇 郭志强

山西省汾阳医院麻醉科，山西 汾阳 032200

瑞芬太尼作为新型止痛药，是一种特异性的μ受体激动剂，脂溶性高，与μ受体结合力强，与κ、δ受体结合力弱，具有良好的血流动力学稳定性，目前已经在产科麻醉中有较多应用［1]。但瑞芬太尼对子代的影响则鲜有报道，因此笔者在受孕大鼠应用瑞芬太尼后对新生小鼠运动感觉学习功能进行实验，以期对临床应用瑞芬太尼提供一定的帮助。

1 材料与方法

1.1 妊娠SD大鼠30只，由山西医科大学汾阳学院实验中心提供，体重200～250g，屏障环境下饲养，30只妊娠SD大鼠随机分为对照组 (A组)、孕中期使用组孕 (10～13天)(B组)、孕晚期使用组 (C组)，每组各10只，分娩后每组取子鼠20只。瑞芬太尼注射液 (批号：1101232，湖北宜昌人福药业有限公司)。Y型迷宫 (MG-3型，江苏张家港生物医学仪器厂)。

1.2 实验方法 A组观察妊娠至分娩。B组在妊娠中期(妊10～13天)经尾静脉注射瑞芬太尼1μg/kg· min，共4分钟。清醒后观察至分娩。C组于妊娠晚期 (妊19～21天)经尾静脉注射舒芬太尼1μg/kg/min，共4分钟。清醒后观察至分娩。分娩后各组动物于常温下和母鼠同笼饲养，自由进食饮水。各组大鼠在21日龄断母乳饲养。随机留取每只母鼠的两只子鼠 (每组20只子鼠)继续屏障环境下饲养。

1.2.1 感觉运动功能测试 当新生大鼠长到6周龄时，采用握力实验和转杆实验对各组新生大鼠的肌力和运动协调能力进行测试。

1.2.1.1 握力试验 (Grip Traction test) 将大鼠放置在一根悬空的 (高度50 cm)水平不锈钢条 (直径为0.15 cm)上，大鼠将会用四只爪子抓紧钢条，记录大鼠由放置到掉下来的时间 (s)。最长记录时间为300 S，每只动物非连续测试5次，1次/d，取其平均值作为该大鼠的最后成绩。

1.2.1.2 转杆试验 (Rota Rod test) 将大鼠放置在水平高度为50cm，直径为6 cm的转杆上，转杆以匀速转动 (15 r/min)，记录大鼠由放置到掉下来的时间 (s)。最长记录时间为300 S，每只动物非连续测试5次，1次/d。

1.2.3 大鼠学习记忆功能测试 当大鼠长到8周龄时对大鼠进行学习记忆功能测试。测试在安静的暗室中进行，测试时间选择下午2点至5点。进行学习测试时先将大鼠放入迷宫中适应5 min，然后才开始正式实验。刺激电压以让动物刚好跑动的强度为该动物行为训练过程中的固定强度，延时5 S，按Ⅰ-Ⅱ-Ⅲ-Ⅰ臂轮流作为安全区。大鼠受电击后逃到安全区后，灯光继续作用15 S，熄灯后结束一次测试，大鼠所在支臂就作为下一次测试的起点，休息40 S后再予以第2次测试，依次重复，以连续10次中有9次或以上正确反应 (正确反应率≥90%)定为学会标准，测试至达连续9/lO标准为止。观察总反应时间 (Total Reac—tion Time，TRT)以及达标所需的学习次数。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0软件分析，建立SPSS数据库，统计分析，进行t检验，P＜0.05，则认为有统计学差异。P＞0.05，无统计学差异。

2 结果

2.1.1 握力试验结果显示，三组之间两两比较无统计学差异。见表1。

表1 各组大鼠的抓握时间 (±SD)

表1 各组大鼠的抓握时间 (±SD)

A、B组比较P＞0.05，B、C组比较 P＞0.05，A、C组比较 P＞0.05

组别 例数 (子鼠) 抓握时间 (min)A组 (对照组)20 224.17 ±26.54 20 217.85 ±31.22 B 组 (孕中期使用组) 20 186.33±27.81 C组 (孕晚期使用组)

2.1.2 转杆试验结果显示，三组之间两两比较无统计学差异。见表2。

表2 各组大鼠在转杆的停留时间 (±SD)

表2 各组大鼠在转杆的停留时间 (±SD)

组别 例数 (子鼠) 停留时间 (min)A组 (对照组)20 179.17 ±15.79 B 组 (孕中期使用组) 20 152.21±18.63 C组 (孕晚期使用组)20 161.23 ±19.22

2.1.3 大鼠学习记忆功能测试的迷宫测试，三组之间两两比较无统计学差异。见表3。

表3 各组大鼠的学习次数和TRT(±SD)

表3 各组大鼠的学习次数和TRT(±SD)

A、B组比较 P＞0.05，B、C组比较 P＞0.05，A、C组比较P＞0.05

组别 例数 (子鼠) 学习次数 TRT(min)A组 (对照组)20 25.25 ±5.20 31.46 ±8.12 B 组 (孕中期使用组) 20 28.75 ±7.10 35.27 ±7.95 C组 (孕晚期使用组)20 26.40 ±6.25 30.48 ±6.21

3 讨论

在分娩镇痛、剖宫产麻醉、胎儿宫内手术以及其他妊娠期内的非产科手术中，麻醉的实行和各种麻醉镇痛类药物的合理使用是手术顺利安全进行必不可少的重要前提。理想的麻醉药物既要有良好的麻醉镇痛作用，又要对母儿无明显影响，尤其是对子代的远期高级神经系统功能无明显影响。阿片类药物广泛应用于分娩镇痛、剖宫产麻醉。在硬膜外分娩镇痛中加入阿片类药物可以减少局麻药的应用，改善镇痛效果，延长镇痛时间，应用于剖宫产和妊娠期非产科手术麻醉中能减少应激使血流动力学更加平稳，增加母儿的安全性［2]。近年来，不少学者对瑞芬太尼进行了进一步研究，Missant等［3]将瑞芬太尼0.1μg/kg/min 应用于腰硬联合麻醉下行胎儿镜手术，发现母体的呼吸频率虽然减少，但血氧饱和度正常，胎儿状态良好。但在其他研究中，对子代的运动感觉和学习方面的研究较少。本实验中，在大鼠母体妊娠中期和妊娠晚期使用瑞芬太尼后，子代的抓握时间，转杠停留时间三组之间无统计学差异;大鼠学习记忆试验中，学习次数以及总反应时间 (Total Reac—tion Time，TRT)三组之间无统计学差异。本实验表明在大鼠孕中期和孕晚期使用瑞芬太尼后，对于子代神经系统的高级功能，如运动感觉学习记忆方面均无明显影响。Evron等［4]也曾报道瑞芬太尼可以通过胎盘，但能被胎儿血和组织中的非特异性酯酶快速代谢和重新分布，清除迅速，因此对胎儿影响较小。综合相关报道表明瑞芬太尼在产科麻醉和镇痛会有广泛的使用前景。不过我们也发现，三组实验中虽然数据无统计学差异，但是抓握时间，转杠停留时间，学习次数以及总反应时间中，孕中期使用组较孕晚期组均略有差距，但未达到统计学差异。我们在以后的研究中准备进一步扩大样本量和增加试验方法来获得更多的验证，为更安全有效地使用瑞芬太尼提供更多的证据。

［1]张洁，周仁龙，王珊娟.瑞芬太尼在产科麻醉中的应用［J].上海医学，2011，34(8)：638-639.

［2]Dresner MR，Freeman JM.Anesthesia for caesarean section［J].Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol.2001，15(1)：127-143.

［3]Missant C，Van Schoubroeck D，Deperest J，et al.Remifentanil for foetal immobilization and maternal sedation during endoscopic treatment of twin-to-twin transfusion syndrome：a preliminary dose-finding study［J].Acta Anaesthesiol Bleg.2004，55(3)：239.

［4]Evron S，Glezerman M，Sadan O，et al.Remifentanil：a novel systemic analgesic for labor pain ［J].Anesth Analg.2005，100(1)：233-238.