紫叶矮樱组培快繁技术的研究

杨 燕，杨亚平

（1.晋中职业技术学院，山西 晋中 030600；2.山西潞安矿业集团公司林业处，山西 长治 046204）

紫叶矮樱组培快繁技术的研究

杨 燕1，杨亚平2

（1.晋中职业技术学院，山西 晋中 030600；2.山西潞安矿业集团公司林业处，山西 长治 046204）

以紫叶矮樱的带芽茎段为外植体进行研究，结果表明，外植体消毒采用5%NaClO处理20min，效果最好，3月下旬到4月中旬为最适取材季节，启动培养以1/2MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.05mg/L为最佳组合培养基配方，生根培养最佳培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L+IAA1.0mg/L,其次为1/2MS+NAA1.5mg/L.

紫叶矮樱；组织培养；离体快繁

紫叶矮樱（Prunus×cistena‘Pissardii'）系紫叶李和矮樱杂交种，蔷薇科（Rosaceae）,李属（Prunus），是世界著名的观赏树种，在园林绿化中占有重要位置.进行紫叶矮樱的组织培养，选择适宜的培养条件和培养方法，为紫叶矮樱的大批量快速繁殖提供理论依据，指导生产具有重要意义.

1 试验材料与方法

1.1 材料及条件

供试材料为山西太谷龙岗庄园经济林基地的二年生紫叶矮樱嫁接苗(山桃为砧木)，取紫叶矮樱带芽茎段为外植体，以MS、1/2MS、B5、WPM为基本培养基.该实验在山西农大林学院实验苗圃组培室进行.

1.2 试验步骤及方法

1.3 试验数据统计分析

采用SAS for windows统计分析软件包对实验观测数据进行方差分析,LSD检验.

2 试验结果与分析

2.1 不同消毒方法对外植体启动的影响

试验中对NaClO灭菌设计了 3%、5%、7%、10%四个浓度梯度，4种消毒处理方法对外植体的启动结果有较大差异.5%NaClO（有效CL%≥0.5%）消毒液处理后的污染率为6.67%，死亡率为0，启动率为93.33%，整体表现为消毒效果最好.这与Found[1]等（1995）的研究结果一致.

表1 启动培养正交试验设计方案

2.2 不同取材季节对外植体启动的影响

本试验分别在2006年3月下旬、4月中旬、5月下旬、7月上旬、9月中旬取材，进行重复试验，3月下旬到4月中旬所取材料的污染率在5-8%，死亡率在10%左右，启动率在81-85%，整体优于其它几个时间段.F.Enjalric等(1988)在对三叶胶初级培养污染的研究中发现高温、多雨的环境更有利于污染的发生，而且随着植物材料年龄的增长，植物材料的健康状况不断恶化，组培污染也会更加严重[2].由此可见，3月下旬到4月中旬为紫叶矮樱外植体最适取材季节.

2.3 不同培养基对紫叶矮樱分化芽及启动率的影响

外植体接入培养基后，生长情况各异，试验中，变化最明显的是1/2MS培养基添加不同激素配比的组合，于7月14号下午接种，18号观察芽长和茎高已经见长，具体结果见表2.

对表2中启动率的结果进行方差分析，结果见表3.

表2 启动培养结果

表3 启动率的方差分析

由表3知，因素A（培养基）对启动率的影响极显著，因素B（6-BA）对启动率的影响显著，分别对其进行多重比较，采用LSD检验，结果见表4.

表4 培养基和6-BA 4水平显著性检验(0.05)

由表4可得出，因素A（培养基）1/2MS和MS、WPM差异不显著，MS、WPM可以替换1/2MS，根据均值大小，选取1水平，即培养基为1/2MS时，对启动率的作用效果最好.这三者均和B5差异显著.因素 B（6-BA）4 水平和 3、2、1 水平间差异显著，3、2、1三水平间差异不显著，即6-BA2.0mg/L为最适合的6-BA浓度.

本试验方差分析表明，最优处理组合应为A1B4,因素C（NAA）F检测不显著，其水平可任取.

对表2中分化芽平均长的结果进行方差分析，因素A（培养基）、因素B(6-BA)对分化芽长的影响作用极显著，因素C（NAA）的影响作用显著，分别对其进行多重比较，可得出，因素A（培养基）1、2、3水平间差异不显著，和4水平差异显著，从均值来分析，1/2MS培养基为最好的基本培养基.因素B(6-BA)3水平和4水平、1水平差异显著，从均值来分析，3水平效果最好，即6-BA1.5mg/L.浓度过高过低都不利于芽子生长.因素C（NAA）4水平间差异显著，1水平和3、4水平及显著，和2水平差异显著，2水平和3、4水平差异极显著.从均值来分析，1水平效果最好，即NAA0.05mg/L.

本试验方差分析表明，最优组合为A1B3C1，即最优组合为 1/2MS，6-BA1.5mg/L，NAA0.05mg/L.

综合以上分析，在紫叶矮樱启功培养中，最适合的培养基配方为1/2MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.05mg/L.

2.2 生根培养基的筛选

将高、壮的紫叶矮樱无根苗接种于生根培养基上，一周后开始出现乳白色根芽，20d时观察生根情况，统计平均生根数，计算生根率，其结果见表5.

表5 不同培养基生根结果

对表5的每组数据进行方差分析和LSD检验，综合平均生根数、生根率、根生长情况三方面因素，认为1/2MS+IBA1.0mg/L+IAA1.0mg/L最适于紫叶矮樱生根，IBA具有很好的诱发根原基形成的能力，IBA和IAA又具有不同的生理活性，二者配合使用，可以达到很好的生根效果，但浓度过高过低均对根的形成、生长不利，浓度范围在1.0～1.5mg/L时利于紫叶矮樱生根.其次，利于紫叶矮樱生根的培养基组合为1/2MS+NAA1.5mg/L.

3 小结

综合上述试验结果和分析，紫叶矮樱快速繁殖技术体系要点如下:

3.1 外植体启动情况

1.外植体的消毒以5%的NaClO消毒20min处理效果最佳.

2.外植体取材以3月下旬到4月中旬效果最佳.此时外植体积累了较丰富的内源激素，抵抗病菌的能力强或有些病菌还没有活跃起来，污染率低，启动率高.

3.以 1/2MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.05mg/L为最优启动培养基组合.

3.2 生根培养

最佳生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L+IAA1.0mg/L，其次为 1/2MS+NAA1.5mg/L.一周后 1/2MS+IBA1.0mg/L+IAA1.0mg/L中有根长出，20d后平均生根数为2～5.4条，生根率为48.6～94.7%.

〔1〕Found M M,Gomaa A H,El Zaher M H A,et al.Factors influencing in vitro establishentand multiplications stages of peach[J].Acta Horticulture,1995,(409):191-196.

〔2〕Enjalric,F，Carron,M.P.＆.Lardet,L.Contamination of primary cultures in tropical areas：The case of Hevea brasiliensis.Acta Horticulturae，1988,225:57-65.

〔3〕陈振光.园艺植物离体培养学[M].北京:中国农业出版社,1996.

S687

A

1673-260X（2012）02-0047-03