黄瑞香有效成分的提取研究
2012-10-13杨晓燕
杨晓燕 ，闫 君
（1.山西医科大学 药学院，山西 太原 030001；2.山西生物应用职业技术学院，山西 太原 030001）
黄瑞香有效成分的提取研究
杨晓燕1，2，闫 君2
（1.山西医科大学 药学院，山西 太原 030001；2.山西生物应用职业技术学院，山西 太原 030001）
方法:采用 L9(34)正交试验,以瑞香素含量为评价指标,用反相高效液相色谱法测定,观察浸润水量、浸润时间、乙醇浓度对瑞香素超声提取的最佳工艺条件.结果:瑞香素标准曲线的回归方程为Y=44.914，X-24（r=0.9992，n=6）.最佳提取工艺为 A3B3C2D1，即 10 倍量浸润水量，浸润时间为 10h，每次1.0h.结论:该工艺合理、简单、可靠、有效成份提取率高.
瑞香素提取；工艺条件
1 材料与仪器
1.1 材料
甲醇（色谱纯）：天津市四友精细化学品有限公司
乙腈（色谱纯）：天津市四友精细化学品有限公司
瑞香素对照品：中国药品生物制品检定所（0900-200001）
所用水为娃哈哈蒸馏水
祖师麻药材：山西康意制药有限公司提供
1.2 仪器
高效液相色谱仪：Agilent Technologies 1200 series
电子天平：上海精科天平
中草药粉碎机：北京环亚设备有限公司MH-1000型调温电热套：
2 方法与结果
2.1 检测波长的选择
取瑞香素对照品约2mg，精密称定，置于10ml棕色容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.2mg·ml-1的黄瑞香溶液.在200nm-400nm波长范围内扫描，发现在280nm处有最大吸收，故选择280nm为检测波长.
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件
色谱住：SinoChrom ODS-BP柱（4.6mm×250mm,5μl）；流动相：乙腈：0.2%磷酸水溶液 =10：90；检测波长：327nm;柱温：25℃；进样量：20μl.
2.2.2 对照品溶液的制备
取瑞香素对照品约2mg，精密称定，置于10ml棕色容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.2mg·ml-1的对照品溶液.
2.2.3 供试品溶液的制备
取祖师麻药材40g,经中草药粉碎机粉碎,按超声提取.提取液经0.45μm微孔滤膜过滤,取续滤液，即得供试品溶液.
2.2.4 黄瑞香标准曲线的建立
取上述对照品溶液 0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml分别置 10ml容量瓶中，得 10μg·ml-1、20μg·ml-1、30μg·ml-1、40μg·ml-1、50μg·ml-1、60μg·ml-1的溶液，分别吸取20μl进液相色谱，得回归方程为 Y=44.914 X-24（r=0.9992，n=6）.
2.2.5 测定
分别精密吸取黄瑞香对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入高效液相色谱仪，即得色谱图.
图2 黄瑞香对照品液相色谱图
图3 黄瑞香供试品液相色谱图
2.2.6 多因素提取工艺考察实验
取粉碎黄瑞香药材9份，每份45g,置1000ml烧瓶中，按正交实验要求进行.实验采用L9(34)正交设计表对浸润水量（A）、浸润时间（B）、提取时间（C）、空项（D）四个因素进行考查，选定的因素进行考查，选定的因素水平见表1.
表1 正交实验因素水平
从表2、表3可以看出，影响提取工艺因素大小顺序为A>B>C>D,即影响最显著的因素为浸润时间，其次为浸润水量，而提取时间影响不显著.由分析结果可知，最佳提取工艺为A3B3C2D1.即10倍量浸润水量，浸润时间为24h，每次1.0h.
2.3 讨论
本研究通过正交试验设计,优化出最佳的最佳提取工艺为A3B3C2D1，即10倍量浸润水量，浸润时间为10h，每次1.0h.
表2 正交实验结果
表3 正交实验结果
本研究提取过程采用了水浸润的预处理方法,通过渗透作用逐渐通过细胞壁透入到细胞内,再经过10倍浸润水量、浸润时间24h，提取1h，比传统方法节省能源,且提取效率高,该方案提取工艺科学合理、先进、耗时短、成本低,为黄瑞香的提取提供了一种新的工业化方法和实验依据.
〔1〕丁健桦,郝丽,乐长高,王宁.阿司匹林的合成条件研究[J].东华理工学院学报(自然科学版),2005(01).
〔2〕Canton,G.;Barbieri,C.L.;Iacomini,M.;Gorin,P.A.L.;Travassos,L.R Biochem.J.1993,289,155.
〔3〕Wang,S.-H.Course of Ionganic Chemistry,Science Press,Beijing,2000,P 114(in Chinese）.
R284
A
1673-260X（2012）05-0021-02
