老年人群载脂蛋白E基因多态性与脑梗死遗传易感性的关系

李学军 郭大英 曾碧映 (益阳医学高等专科学校，湖南 益阳 413000)

动脉粥样硬化性脑梗死约占全部脑卒中的70%，是影响生活质量、乃至引起死亡的一大主要原因。现代研究认为人载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与脂质代谢、动脉粥样硬化、脑梗死发生发展有密切关系〔1〕。ApoE参与神经系统的许多病理生理过程，与神经系统变性疾病、脑血管疾病、水肿性损伤等多种临床常见疾病有关〔2〕。ApoE结构基因具有遗传多态性特点〔3〕。为了明确ApoE基因多态性与老年动脉粥样硬化脑梗死之间的关系，本研究采用基因芯片技术测定ApoE基因多态性，探讨其与动脉粥样硬化脑梗死病人脑动脉粥样硬化之间的关系。

1 对象与方法

1.1 对象 经我院伦理委员会批准通过，于2009年1月至2012年6月选择我院住院治疗的老年脑梗死患者150例作为观察组。入选标准:年龄≥60岁;均通过头颅CT或者MRI检查确诊动脉粥样硬化性脑梗死。同时选取我院门诊体检健康年龄≥60岁的老年人群240例作为对照组。合并家族性高胆固醇血症、脂肪肝、糖尿病、甲状腺疾病、慢性肝肾疾病、周围血管疾病、血液系统疾病、恶性肿瘤及入院前1 w内使用降脂药物者均不纳入本研究。观察组240例，男132例，女108例，平均年龄(69.4±9.7)岁;对照组240例，其中包括男128例，女112例，平均年龄(68.7±10.1)岁。两组的性别、年龄构成差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。研究开始前均已取得患者或者家属的知情同意，并签署同意书。

1.2 ApoE基因多态性及血脂水平检测 所有受试者均空腹10 h后清晨抽取静脉血。自然凝集血5 ml在常温下2 000 r/min离心5 min，小心吸取血清置于-8O℃超低温冰箱保存备用。人血液基因组DNA的提取采用碱裂解法，基因组DNA提取系统(DP319-01)试剂由天根生化科技(北京)有限公司生产提供。ApoE基因多态性采用高通量的基因芯片检测。所有操作均严格按照试剂盒说明书进行操作。ApoE基因型检测试剂盒由珠海赛乐奇生物科技有限公司生产提供。所有受试者的血脂水平〔总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)〕均经Olympus AU400全自动生化分析仪进行检测。

1.3 统计学方法 应用SPSS17.0统计软件进行分析，计量数据采用±s的方式表示，组间均数比较用t检验;计数资料采用χ2检验。

2 结果

2.1 老年脑梗死患者与健康体检者血脂水平比较 观察组患者血清TC、TG水平高于对照组，差异具有统计学意义(TC:t=19.125，P=0.003;TG:t=13.412，P=0.001);HDL-c 水平低于对照组，差异亦有统计学意义(t=8.532，P=0.007)。见表1。

表1 两组血脂水平比较(±s，mmol/L)

表1 两组血脂水平比较(±s，mmol/L)

与对照组比较:1)P＜0.05;下表同

组别 n TC TG LDL-c HDL-c观察组 150 5.21±0.921)1.94±0.321)2.49±0.78 1.27±0.351)对照组240 4.72±0.87 1.45±0.51 2.35±0.65 1.68±0.47

2.2 老年脑梗死患者与健康体检者之间的ApoE基因多态性比较 在老年脑梗死患者与健康体检者中皆以ε3/3型频率最高，ε3/4、ε3/2 次之，ε4/4、ε2/4、ε2/2 型频率很低，两组人群ApoE基因型频率均符合 Hardy-Weinberg平衡;两组受试者ApoE ε4等位基因频率存在明显差异，差异具有统计学意义(χ2=3.972，P=0.030)。见表 2。

表2 两组ApoE基因型与ApoE等位基因频率比较〔n(%)〕

3 讨论

最新研究表明ApoE是动脉粥样硬化、脑卒中的危险因素，与心脑血管性疾病发病相关〔4〕。ApoE是一种单链多态糖蛋白，包括299个氨基酸残基，主要在肝脏实质细胞合成，脑组织中的星形细胞也能合成一部分。ApoE是血浆重要的载脂蛋白之一，主要分布在血浆乳 糜微粒(CM)、极低密度脂蛋白(VLDL)和高密度脂蛋白(HDL)中，参与机体血脂代谢过程，起到维持胆固醇平衡的作用〔5，6〕，在动脉硬化的发生、发展过程中起着重要的作用。在不同的人群中，三个不同的ApoE等位基因分布频率存在一定差异，因而不同人群中ApoE表型分布频率也有一定程度的不同。ApoE编码基因位于第19号染色体长臂13区2带上，全长3.7 kb，包含4个外显子和3个内含子。ApoE的合成由在同一个基因位点上的三个等位基因控制，通常称为ε2、ε3和ε4，其中每一个等位基因可表达1个主要异构体，因此总共可以产生包括三种纯合子(ε2/2、ε3/3、ε4/4)和三种杂合子(ε2/3、ε2/4、ε3/4)的六种常见表型，其中 ε3/3 是最常见的基因表型。

国内外研究表明ApoE是导致动脉粥样硬化的一个重要危险因素，一般情况下血浆TC水平变化的8%左右与ApoE基因多态性存在关系〔7～9〕。我国学者研究显示颈动脉狭窄病人等位基因ε4频率升高，ε3频率降低，可能说明在某种程度上ε4是颈动脉狭窄的危险因素，而ε3是其保护因素〔10〕。本研究结果表明，老年脑梗死患者ApoE ε4等位基因频率明显高于健康对照组，与国内相关研究报道相符〔11〕。

综上所述，ApoE基因多态性与老年脑梗死血脂水平升高及其发病有关，ε4等位基因可能是脑梗死的危险因素，值得进一步研究。

1 邓 可，肖志杰，吴晓球，等.载脂蛋白E基因多态性与不同年龄段腔隙性梗死关系的研究〔J〕.心脑血管病防治，2011;11(1):15-8.

2 何杏梅.血管性痴呆载脂蛋白E基因多态性检测及其意义〔J〕.吉林医学，2012;33(12):2495-6.

3 李晓波，李 燕.老年冠心病患者载脂蛋白B基因多态性与血脂的关系〔J〕.中国老年学杂志，2011;31(9):1655-6.

4 丁家荣，谌 卫，郭志勇，.载脂蛋白E基因多态性与终末期肾病〔J〕.中国中西医结合肾病杂志，2011;12(5):457-9.

5 王 袁，吴琪俊，施 榕.糖尿病肾病与载脂蛋白E基因多态性相关性的Meta分析〔J〕.上海交通大学学报(医学版)，2011;31(5):625-31.

6 张鸿青，马 娟，田 青，等.载脂蛋白E基因多态性及超敏C-反应蛋白与冠心病相关性分析〔J〕.云南医药，2011;32(3):276-7.

7 马 娟，陈吉丽.早发冠心病与载脂蛋白B、载脂蛋白E基因多态性的关系〔J〕.当代医学，2011;17(19):27-9.

8 李卫宁，夏 勇，徐安平.载脂蛋白E基因多态性与氟伐他汀降脂疗效的关系〔J〕.检验医学与临床，2011;8(18):2181-2.

9 刘建伟，叶 玲，刘 静，等.载脂蛋白E基因多态性与原发性高血压伴周围动脉硬化闭塞症的关系〔J〕.中国老年学杂志，2011;31(19):3679-81.

10 王 雁，张见影.颈动脉狭窄与ApoE基因多态性的相关性研究〔J〕.中国老年学杂志，2008;28(16):1615-7.

11 赵志全，穆俊霞，杨丰斌，等.载脂蛋白E基因多态性与脑梗死病人脑动脉粥样硬化关系的研究〔J〕.中西医结合心脑血管病杂志，2011;9(2):175-7.