罗布麻和大叶白麻黄酮类成分的比较研究

邓翻云，吴敏言，尹传华，石秋梅，*

（1.新疆大学生命科学与技术学院，新疆乌鲁木齐830046；2.荒漠与绿洲生态国家重点实验室，中国科学院新疆生态与地理研究所，新疆乌鲁木齐830011）

罗布麻和大叶白麻黄酮类成分的比较研究

邓翻云1，吴敏言1，尹传华2，石秋梅1，*

（1.新疆大学生命科学与技术学院，新疆乌鲁木齐830046；2.荒漠与绿洲生态国家重点实验室，中国科学院新疆生态与地理研究所，新疆乌鲁木齐830011）

以罗布麻和大叶白麻为实验材料。以NaAc-A1C13体系为显色剂，以金丝桃苷为对照品，用分光光度法于400nm处测定了它们的总黄酮含量；采用高效液相色谱法（HPLC），测定了它们的金丝桃苷含量。结果表明：罗布麻叶片中的金丝桃苷含量较大叶白麻叶片中的高，前者为0.1%左右，后者含量很低，几乎检测不出，大叶白麻花中的含量亦很低；罗布麻叶片和大叶白麻叶片中的总黄酮含量分别为2.6%和2.2%，大叶白麻花中的含量较叶片的低，为0.5%。

罗布麻；大叶白麻；总黄酮；金丝桃苷

Abstract:In this study,the hyperoside contents in Apocynum venetum Linn.and Poacynum hendersonii(Hook.f.)Woodson were measured by HPLC,and the total flavonoid were determined by spectrophotometry with UV absorption wave at 400 nm using hyperoside as a reference substance.Results showed the hypreoside content of leaves in Apocynum venetum Linn.was highest,which was 0.1%,and those of leaves and flower in Poacynum hendersonii(Hook.f.)Woodson were very little,nearly undetectable.The total flavonoid content of leaves in Apocynum venetum Linn.and Poacynum hendersonii(Hook.f.)Woodson was 2.6%and 2.2%,respectively,however that of flowers was significantly lower than that of leaves,which was approximately 0.5%.

Key words：Apocynum venetum Linn.;Poacynum hendersonii(Hook.f.)Woodson;flavonoids;hyperoside

据《中国植物志》记载，我国罗布麻种类主要有3种：罗布麻（又称红麻，小花罗布麻，罗布麻属罗布麻Apocynum venetum Linn.），大叶白麻（又称白麻，大花罗布麻，白麻属大叶白麻Poacynum hendersonii（Hook.f.）Woodson）和白麻（又称紫斑麻、中花罗布麻，白麻属白麻Poaynum pictum Schrenk）。人们习惯把罗布麻、大叶白麻和白麻统称为“罗布麻”。但现在白麻（Poaynum pictum Schrenk）的分布和数量很少，很难采集到，因此真正有生产价值的是前两种（罗布麻和大叶白麻）[1]。

在我国民间，罗布麻和大叶白麻两种植物的叶片均有被制作罗布麻茶饮的。但在我国“药典”和其他药学文献中，“罗布麻”一词，实际是指红麻Apocynum venetum L。目前已生产的复方罗布麻片、罗布麻茶和罗布麻烟亦多以红麻叶为原料[2-3]。因此有些学者认为，罗布麻Apocynum venetum L不能与大叶白麻A.hendersonii Hook.f.混为一谈。现在许多以大叶白麻叶充作罗布麻茶，也只能是代用品，更不应作为罗布麻叶药用。大叶白麻能否代替罗布麻作为罗布麻茶原料，关键在于它们主要有效成分有何异同。从多种纸层析和薄层层析分析的结果看，罗布白麻叶浸膏和罗布红麻叶浸膏的化学成分基本相同；两者各含氨基酸15种，种类亦基本相同，总含量红麻略高于白麻；所含的微量元素两者亦基本相同[3]。但也有人说三种罗布麻的成分有较大差异[2,4]。

新疆的大叶白麻资源丰富，该地区市场上出售的罗布麻茶原料几乎都是大叶白麻叶。因此，为更好地开发利用大叶白麻资源，弄清两者主要有效成分的异同显得尤为重要。黄酮类物质，尤其金丝桃苷和异槲皮苷物质，是其主要的活性成分。本文比较测定了罗布麻和大叶白麻叶片、花中的总黄酮和金丝桃苷含量，该研究对新疆大叶白麻这一重要资源植物的开发利用有重要意义。

1 试验材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器

LC-201OA-VP高效液相色谱仪：日本岛津；紫外分光光度仪：上海棱光技术有限公司；BS200S电子天平：北京赛利斯天平有限公司；水浴锅：上海苏达实验仪器有限公司；索氏提取器；研钵。

1.1.2 试剂

石油醚、乙醇等有机溶剂均为分析纯。

1.1.3 原料

金丝桃苷对照品纯度99%，购买于天津一方科技有限公司。实验材料罗布麻和大叶白麻叶、花由新疆绿康罗布麻有限公司提供，新疆大学生物科学系鉴定。

1.2 样品供试液制备

参考石秋梅等（2009）中方法[5]，将干燥的大叶白麻叶、罗布麻叶和大叶白麻花碾磨后，精密称取约1 g样品，用滤纸包裹好，置于索氏提取器中，加石油醚50mL，提取至近无色，弃去石油醚，取出滤纸包，将滤纸敞开，挥干溶剂，将脱脂后的样品转移置索氏提取器中，加70%乙醇40 mL，回流提取2 h，提取液放冷，过滤，再加70%乙醇40 mL，回流提取2 h，过滤。收集两次的滤液，用70%乙醇定容至100 mL，摇匀备用。每个样做3个重复。

1.3 对照品溶液制备

精密称取金丝桃苷对照品4.9mg，用70%乙醇溶解并定容于100mL容量瓶中，制成含金丝桃苷0.049mg/mL的溶液，保存于4℃冰箱备用。

1.4 总黄酮含量的测定

1.4.1 显色方法（AlCl3-NaAc显色法）

精密量取样品供试液1.0 mL，置10 mL容量瓶中，加 0.5 mL 0.6 mol/L AlCl3，再加 1.5 mL 1 mol/L NaAc,摇匀，放置20 min，加70%乙醇至刻度。以零号管（不加样品供试液）为空白，400 nm处测吸光值A[5]。

1.4.2 标准曲线的制备

精密量取金丝桃苷对照品溶液 0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mL，分别置10 mL容量瓶中，按上述显色方法（1.4.1）测吸光值A。以A值（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标，进行线性回归。其回归方程（n=6）为：y=0.0337x，R2=0.9975。

1.4.3 样品中总黄酮含量的测定

精密量取样品供试液1.0 mL，按上述显色方法（1.4.1）在400 nm处测吸光值A，根据回归方程，计算出样品中总黄酮含量。

1.5 金丝桃苷含量的测定

1.5.1 色谱条件

主要参考中华人们共和国药典贯叶金丝桃中金丝桃苷含量的测定方法[6]。具体条件如下：填充柱为十八烷基硅烷键合硅酸，流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（体积比 16∶84），检测波长 360 nm，流速 1.0 mL/min，柱温40℃。

1.5.2 标准曲线的制备

精密量取对照品溶液 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 与7.0 mL，分别置于10 mL容量瓶中，各加70%乙醇至刻度。按上述色谱条件各取10 μL进样。以浓度C（μg/mL）为横坐标，峰面积A为纵坐标进行线性回归，得峰面积─浓度标准曲线，其回归方程（n=7）为：y=18489x-1492.9，R2=0.9987。

1.5.3 样品中金丝桃苷含量的测定

取已制备好的样品提取液（1.2）经0.45 μm微孔滤膜过滤后，各取10 μL上述按上述色谱条件（1.5.1）进样。

2 结果

2.1 罗布麻和大叶白麻的总黄酮含量

将样品提取液的吸光值代入回归方程，即可计算出各样品中总黄酮见图1。可知，罗布麻叶、大叶白麻叶和大叶白麻花中的总黄酮平均含量分别为2.6%、2.2%和0.5%。

2.2 罗布麻和大叶白麻样品色谱图

对照品金丝桃苷、罗布麻叶、大叶白麻叶、大叶白麻花金丝桃苷样品提取液色谱图见图2。从图2-A可知，金丝桃苷保留时间为18.1 min，3个样品中罗布麻叶的含量较高，大叶白麻叶中的含量及其微弱，几乎检查不到。

2.3 罗布麻和大叶白麻金丝桃苷含量

将各样品提取液的峰面积代入其回归方程，即可计算出各样品中金丝桃苷的含量。结果见图3。

结果表明，罗布麻叶、大叶白麻叶和大叶白麻花的金丝桃苷平均含量分别为0.12%、0.007%和0.02%。

3 结论

通过对罗布麻和大叶白麻叶和花总黄酮和金丝桃苷含量含量的测定，可得出如下结论：

1）本研究采用的色谱条件可用来检测罗布麻体内金丝桃苷含量。

2）罗布麻叶片的总黄酮含量较大叶白麻的高些，分别为2.6%和2.2%，同时，前者的金丝桃苷含量亦高于后者。由此结果可以看出，以黄酮类作为主要功效成分时，罗布麻叶的效果较大叶白麻好。但作为罗布麻茶原料，大叶白麻能否替代罗布麻，还需更深入的实验，需对其他黄酮类成分进行更系统的比较测定。

3）目前市场上出售的罗布麻茶有叶茶和花茶两种，主要是以大叶白麻叶和花作为原料的。从上述实验结果可知，大叶白麻花中总黄酮含量为0.5%左右，远远低于叶中的含量，因此，以类黄酮作为主要功效成分时，花茶的效果不如叶茶。

[1]张卫明,肖正春,顾龚平,等.罗布麻资源利用与罗布麻植物分类问题[J].中国野生植物资源,2006,25(2):15-19

[2]张云峰,魏东,郭祀远,等.大花罗布麻的化学成分研究[J].天然产物研究与开发,2006,18(6):954-957

[3]严秀珍,胡昌奇,周军良,等.白麻和红麻化学成分的测定[J].中成药研究,1987,12:27-29

[4]周丽,王效山,黄和平,等.2005.不同产地罗布麻叶总黄酮的含量测定[J].现代中药研究与实践,19(5):37-38

[5]石秋梅,帕孜来提.吐鲁洪,阿不都拉.阿巴斯.大叶白麻不同部位总黄酮和金丝桃苷含量[J].食品科学,2009,30(8):263-266

[6]国家药典委员会.中华人民共和国药典（2005年版·一部）[M].北京：化学工业出版社，2005:159

Comparative Study of the Flavonoids Component in Apocynum venetum Linn.and Poacynum hendersonii(Hook.f.)Woodson

DENG Fan-yun1,WU Min-yan1,YIN Chuan-hua2,SHI Qiu-mei1,*
(1.College of Life Science and Technology,Xinjiang University,Urumqi 830046,Xinjiang,China;2.State Key Laboratory of Desert and Oasis Ecology,Xinjiang Institute of Ecology and Geography,Chinese Academy of Sciences,Urumqi 830011,Xinjiang,China)

2011-11-10

新疆大学“国家大学生创新性实验计划”项目（编号：101075518）；荒漠与绿洲生态国家重点实验室开放基金（编号：200901-03）

邓翻云（1987—），女（汉），在读本科生，主要从事植物有效成分分析。

*通信作者：石秋梅（1976—），女（汉），副教授，博士，主要从事植物有效成分分析。