冷沉淀凝血因子制备方法的改进

张湘 段逢时

冷沉淀凝血因子制备方法的改进

张湘 段逢时

目的通过冷沉淀凝血因子制备方法的改变提高了产品质量。方法1将新鲜冰冻血浆置于4±2摄氏度水浴箱内融化后，虹吸出血浆，袋内剩余40～50 ml冷沉淀凝血因子2将新鲜冰冻血浆置于(4±2)℃冰箱中过夜融化，经离心后分离出冷沉淀凝血因子20～30 ml。结果离心法优于虹吸法。结论本文对比离心法和虹吸法两种方法制备冷沉淀凝血酶因子，得出离心法制备冷沉淀凝血因子质量优于虹吸法，将冷沉淀凝血因子制备方法进行改进。

新鲜冰冻血浆;离心法;制备;冷沉淀凝血因子

冷沉淀是由保存期内的新鲜冰冻血浆(FFP)。在1℃～6℃的条件下融化后，分离出沉淀在血浆中的冷不溶解物质，冻结而成的制品。其中主要含有丰富的凝血因子Ⅷ(FⅧ)、纤维蛋白原(Fib)、血管性假血友病因子(vWF)纤维结合蛋白(Fn)等。临床上主要用于甲型血友病，纤维蛋白原及凝血因子缺乏所致的出血性疾病的治疗，以及手术、创伤引起的凝血机制障碍的治疗。近年来，冷沉淀在深度烧伤、肿瘤手术、皮肤、黏膜疾病、角膜疾病、弥散性血管内凝血、多发伤和手术创伤、自发性气胸等医学领域里得到广泛应用［1］。

1 制备方法

多年来，我站沿用虹吸法制备方法如下:留取200 ml全血采集时间小于7 min，400 ml全血采集时间小于13 min的血液，采集后6 h内分离出带有联袋的新鲜冰冻血浆，并且即刻放入-50℃冰箱快速冰冻后，放入-20℃以下冰箱保存。冷冻24 h以上的新鲜冰冻血浆用于制备冷沉淀凝血因子。将新鲜冰冻血浆袋置于(4±2)℃水浴装置中，另一空袋悬于水浴箱外，位置低于血浆袋，两袋之间形成一定的高度落差。血浆融化后，随时被虹吸至空袋中，当融化至剩下40～50 ml血浆与沉淀物时，闭合导管，阻断虹吸。将血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝成凝血因子［2］。将其快速置于低温速冻冰箱中冻结。制备过程中，由于我站没有专用的水浴装置，需要用冰块将水浴箱内水温降至4℃左右，而后将新鲜冰冻血浆放入水浴箱，制备过程中水温调控不恒定。血浆融化速度慢，导致制备时间长。水浴虹吸法在FFP溶解的过程中，冷沉淀凝血因子有时不能形成大的凝聚团块，或成絮状，不能聚集吸附在中央未融化的冰块上或袋壁上，有部分往往由于虹吸作用而流到另一转移空袋中，降低了FⅧ的含量［3］。

依据《血站技术操作规范》(2012版)将制备方法改进为离心法，现将方法介绍如下:1.取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆，置(4±2)℃冰箱中过夜融化(时间约为12～15 h);次日，当血浆中尚有部分冰核时即从冰箱中取出。2.将带有冰核的血浆配平后放入温度已调至(4±2)℃的离心机中，3000 g，离心8 min。3.离心后取出血浆放入分浆夹上挤出上清血浆部分。底部可见白色冷不溶物质即为冷沉淀凝血因子。将袋内留有20～30 ml血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子。将其快速置于低温速冻冰箱中冻结。制备后经质控科检验，由200 ml新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀凝血因子1u:FⅧ含量＞80IU/袋，Fib＞150 mg/袋，容量:20～30 ml。符合GB18469-2001《全血及成分血质量要求》。应用此方法制备过程中，血浆在(4±2)℃冰箱中过夜融化，温度控制恒定。同时血浆过夜融化节约了人为加速其融化时间。带有冰核的血浆经离心后血袋底部附着有白色片状沉淀物质。经分浆夹分离血浆过程中，冷沉淀流失少，大大提高了产品质量。

2 讨论

《血站技术操作规程》(2012版)中规定出冷沉淀凝血因子制备方法分为虹吸法和离心法。两种方法都能制备出符合国家标准的冷沉淀凝血因子。结合我站实际，使用新鲜冰冻血浆置于(4±2)℃冰箱中过夜融化，离心法制备冷沉淀凝血因子优于虹吸法。离心法制备提高了冷沉淀凝血因子的含量，新鲜冰冻血浆置于(4±2)℃冰箱中过夜融化节省了手工融化血浆的时间。同时也避免了购置专用的水浴装置，符合我站目前经济状况。在提高冷沉淀凝血因子产品质量上，除了选择合适的制备方法外，还应严格控制血液采集到成分制备的整个过程，200 ml全血采集时间＞7 min，或400 ml全血采集时间＞13 min，所采集的全血不可用于制备新鲜冰冻血浆。采集后的血液应加强整个过程的冷链控制，改进从采集到制备成成品的流程，尽量缩短其时间，确保在采集全血后6 h内分离出新鲜冰冻血浆。应当将新鲜冰冻血浆和冷沉淀凝血因子快速冻结，最好在60 min内将血浆中心温度将至-30℃以下等，才能保证冷沉淀凝血因子的质量。

［1］雷千红，叶东，栾建凤.冷沉淀临床应用的新进展.医学研究生学报，2004，17(1):81-82．

［2］中华人民共和国卫生部.血站技术操作规程，2012．

［3］杨文萍，关亮.浅谈冷沉淀制备有效性的质量保证.中国预防医学杂志，2009，10(8):774-775．

136200 辽源市中心血站(张湘);辽源市妇婴医院(段逢时)