肇东苜蓿田海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG残留高效液相色谱分析试验研究

2012-08-15陈效杰勇孙睿邵朱德全

科技视界 2012年29期

陈效杰薛勇孙睿邵红姜成朱德全

（1.黑龙江农业职业技术学院黑龙江佳木斯 154007；2.佳木斯大学生命科学学院黑龙江佳木斯 154007）

啶嘧磺隆属磺酰脲类除草剂，主要抑制产生侧链氨基酸、亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸的前驱物乙酰乳酸合成酶的反应。海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG为内吸性传导型除草剂，可被杂草茎叶和根部吸收，并传导至整株杂草发挥作用[1]。

1 试剂与仪器

甲醇：色谱纯甲醇（HPLC级试剂）；蒸馏水：新蒸二次蒸馏水；磷酸、磷酸二氢钾：分析纯；啶嘧磺隆标准品:≥98.8%；过滤器:滤膜孔径为0.45μm；微量进样器:10μL；色谱工作站：N2000色谱工作站（浙江大学智达信息有限公司）；超声波清洗器：超声波清洗器（杭州赛智科技有限公司）；高效液相色谱仪：LC-10Tvp等度高效液相色谱仪（杭州赛智科技有限公司）；海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG。

2 LC-10Tvp等度高效液相色谱仪操作条件

流动相：甲醇-水(pH值4.0，用磷酸二氢钾、磷酸调节)(体积比75：25)，流量：1.0mL/min，柱温：室温，检测波长：228nm，进样体积：20mL，保留时间：海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG 4.208min。

3 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG残留高效液相色谱分析测定

3.1 高效液相色谱标样溶液的配制

称海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG0.07g(精确至0.0002g)，标样置于100mL容量瓶中，加入适量甲醇溶解，置此容量瓶于超声波浴槽中约10min，取出降至室温用甲醇定容，摇匀，再用0.45μm滤膜过滤,滤液待测[2]。

3.2 高效液相色谱试样溶液的配制

称海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG0.02g(准确至0.0002g)试样置于50mL容量瓶中,加入适量甲醇溶解,容量瓶置于超声波浴槽中约10min，取出降至室温用甲醇定容，摇匀，再用0.45μm滤膜过滤,滤液待测。

3.3 高效液相色谱试样溶液的测定

LC-10Tvp等度高效液相色谱仪操作条件下，LC-10Tvp等度高效液相色谱仪待基线稳定后，连续注入数针标准溶液,计算各针相对响应值，直至相邻两针海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG的峰面积变化小于1.5%，按标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进行测定[3]。

3.4 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG计算

海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG残留高效液相色谱分析测定，将测得的两针试样溶液和试样溶液前后两针标准溶液中的海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG的峰面积分别进行平均。以质量分数表示的海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG的含量(X)按下式计算:

X（%）=(A2×m1×P)/(A1×m2) 式中：

A1—标准溶液中海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG峰面积的平均值；

A2—试样溶液中海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG峰面积的平均值；

m1—海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG标样的质量（g）；

m2—海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG试样的质量（g）；

P—标准品中海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG的质量分数（%）[4]。

4 结果与讨论

4.1 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG流动相的选择

4.1.1 流动相的选择原则

①由强到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。②三倍规则：每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中，注意观察各个峰的分离情况。③粗调转微调：当分离达到一定程度，应将有机溶剂10%的改变量调整为5%，并据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情况不再改变[5]。

4.1.2 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG流动相的选择

海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG分析过程中，遵守流动相的选择原则能得到好的峰形且简便快捷，通过海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG多次配比试验，最后发现甲醇：水=70：30(V/V)的体积比为流动相，流速为1.0mL/min时,海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG分析时间短，出峰尖锐对称保留时间适合要求，样品中加入磷酸二氢钾、磷酸可使海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG有效成分及其杂质完全分开。