车前子及其易混伪品的扫描电镜鉴别

龚卉卉，汪 娟，孙 莉，陆 叶

(苏州大学药学院中药鉴定研究室，江苏苏州 215123)

车前子为常用中药材，来源为车前科植物车前(Plantago asiatica L.)或平车前(Plantago depressssa Wiltd.)的干燥成熟种子。具有清热利尿通淋，渗湿止泻，明目，祛痰的功效［1］。但是由于车前子细小色深，伪品多及掺伪现象严重［2］。并且车前子肉眼难辨真伪。常见的伪品有荆芥子［3］、炒葶苈子［4－5］、夏枯草子、青葙子、茺蔚子、菟丝子［6］等。近年来关于车前子的鉴别研究多从来源［7］角度、外观研究其性状特征［8］、显微鉴别研究其内部构造的区别、粉末组织构造以及从理化角度(颜色反应、紫外吸收光谱、薄层层析)研究成分的区别等。

近年来随着现代科学技术的发展，新设备、新技术的应用，透射电镜、扫描电镜、X射线能谱分析等也都用在药材的微观鉴别上。其中应用最多的是扫描电子显微镜。它能使物质的图像呈现显著的表面立体结构特征，放大倍数变化范围大，样品制备简单，不需超薄切片，有的粉末和某些新鲜材料可直接观察。在中药材鉴别方面，对于很难区别的同属多种药材的表面细微特征，如种皮和果皮的纹饰，茎、叶表皮组织及附属的毛茸等结构，个别组织、细胞以及后含物中晶体等都有应用［9－12］。尤其对于细小的果实、种子类药材，传统的性状鉴别、显微鉴别难以区分真伪、控制其质量。因为果实、种子细小，性状鉴别和内部构造的组织切片都有一定的困难，因而应用扫描电子显微镜技术可以解决传统方法难以准确区分辨别的难题。本文分别通过扫描电镜和体视显微镜来观察这三种药材的特征，三种药材种皮表面特征以及大小可进行区别，为保障车前子药材的质量提供鉴别依据。尤其药材车前子与葶苈子、菟丝子三种药材的功效差别很大。葶苈子具有泻肺平喘，行水消肿的功效;菟丝子具有补益肝肾，固精缩尿，安胎，明目，止泻的功效。一旦混用对治疗疾病非常不利，还可能导致严重的副作用。

1 实验材料

三种药材分别购自江苏省内一些药店，具体时间地点见表一。以上种子标本保存于本院中药标本室。

表1 3种药材购买或采集地点及时间

2 方法

2.1 扫描电镜法

样品经50%乙醇超声清洗2 min，依次经60%、70%、85%、90%、100%乙醇逐级脱水，干燥后用双面胶固定在样品台上，真空喷镀金膜，用日本日立公司的S－4700型扫描电镜观察拍照。每种药材随机取三粒进行观察及测量长短径。

2.2 体视显微镜法

直接将药材种子XTL－340体视显微镜(上海长方光仪器有限公司)载物台上，调整合适视野进行观察并拍照。

3 结果

3.1 体视显微镜观察结果

3.1.1 车前子 车前种子呈长圆形稍扁，或类三角形。边缘较薄，表面棕黑色至棕色，略粗糙不平。体视显微镜镜下可见背面微隆起，腹面略平坦，中央或一端有灰白色类圆形凹陷的种脐。平车前种子呈扁的长椭圆形，少数呈类三角形，可见四边形或五边形。表面黑棕色或棕色，背面略隆起，腹面较平坦，中央有明显的白色凹点状种脐。(图1AB)

3.1.2 葶苈子 南葶苈子呈长圆形略扁，表面棕色或红棕色，微有光泽，具纵沟2条，其中1条长且较明显。一端钝圆，另端微凹或较平截，种脐类白色，位于凹入端或平截处。北葶苈子呈扁卵形，一端钝圆，另端尖而微凹，种脐位于凹入端。(图1C)。

3.1.3 菟丝子 呈类球形，有的可见种皮一侧下延成鼻状突起。表面灰棕色至棕褐色，粗糙，种脐线形或扁圆形微凹。(图1D)。

图1 3种药材的体视显微镜观察结果

3.2 扫描电镜观察特征结果

3.2.1 车前子 车前子呈类长圆形，或类三角形。种皮表面皱缩不平，呈波浪状。长1.05～2.31 mm，宽0.871～1.17 mm。平车前种子呈扁的长椭圆形，少数呈类三角形，可见四边形或五边形。种皮表面波浪状明显。长 1.17 ～1.72 mm，宽0.732 ～1.11 mm。(图2AB)

图2 3种药材扫描电镜观察结果

3.2.2 葶苈子 南葶苈子，长椭圆形。长约0.872～1.01 mm，宽 0.352 ～0.586 mm。种皮表面呈浅网眼状，种脐在一侧呈不规则凹陷。两端网眼略深。北葶苈子，卵形。长0.947 ～1.15 mm，宽0.512 ～0.623 mm。(图2CD)

3.2.3 菟丝子 类圆形，种皮表面呈深网眼状。长1.14 ～1.75 mm，宽0.884 ～1.425 mm(图 3E)

3.3 三种药材大小

扫描电镜下直接测量三种药材各三粒的长径、短径。根据长短径及种皮表面特征鉴定药材的来源，结果见表2。

表2 车前子及混伪品长短径测量及来源鉴定

4 讨论

通过扫描电镜观察，三种药材可以完全根据种皮特征进行区分。并且可以鉴定出具体的来源。这与1992年刘君哲［13］用扫描电镜研究了车前属植物种子的形态，并认为种子的形状和种皮的纹饰可以作为分类依据之一的观点相同。我们的研究结果表明药材菟丝子中有伪品。例如，如皋春天大药房菟丝子中掺有土粒较多，盐城市东方红大药房菟丝子中也有土粒，但较少。车前子有车前与平车前种子混在一起的现象，苏州万春堂大药房，盐城健康之家大药房的药材车前子中两种车前的来源都有。葶苈子也有南、北葶苈子混在一起的现象，盐城市东方红大药房的两种葶苈子也都有。

另外，也有文章报道可以通过菟丝子药材种脐来区分［14］，但是因为把车前子固定在样品台上后不一定能观察到种脐，所以未能以此特征来鉴别。车前子及平车前子的种皮纹饰为波浪状，也不能进行定量鉴别。而葶苈子和菟丝子的网眼状纹饰可以用单位面积的网眼数来定量区分。

而且，通过本文的研究基本对江苏省部分药店的车前子、葶苈子、菟丝子三种药材的来源情况有了了解，可以指导省内对这三种药材的使用。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典［M］.北京:中国医药科技出版社，2010:63

［2］俞作仁，陈立德，周印锁.车前子及其混伪品的鉴别研究［J］.中医药学报，2000，5:36－37.

［3］付桂萍.车前子与伪品荆芥子的鉴别研究［J］.青海医药杂志，2000，30(8):51－52.

［4］岑淑姬.车前子与其伪品播娘蒿种子的鉴别［J］.中药材，1999，22(8)396.

［5］马梅芳，吕伟，高宇源.现代分析手段在葶苈子鉴别中的应用［J］.江西中医学院学报，2005，17(1)50－51.

［6］孙桂芳.中药车前子与菟丝子的伪品鉴别［J］.中华临床医学研究，2006，12(3)387.

［7］陈政威，金朝阳.车前子样品中混伪品来源鉴定［J］.时珍国医国药，2001，12(11)1000.

［8］邱静帆，殷颖.车前子的药学研究及其应用［J］.浙江中西医结合杂志，2002，12(1)55.

［9］邹联新，杨崇仁，郑汉臣.扫描电镜技术在九里香属植物生药学和分类学鉴定中的意义［J］.中国中药杂志，1999，24(12)711.

［10］马艳.蒙药鹅绒藤扫描电镜的观察研究［J］.电子显微学报，2011，30(3):253－256.

［11］张珂，王德群.安徽9种悬钩子属植物叶表面结构扫描电镜观察［J］.中药材，2011，34(9)1362－1366.

［12］李洪宇，周艳菊，王明科，等.青葙子与其混淆品的超微指纹特征［J］.时珍国医国药，2011，22(7)1700－1701.

［13］刘君哲，张清敏，郭淑华，等.中国车前属种子形态及其分类意义［J］.植物分类学报，1992，30(2)118－125.

［14］董建中，李扬汉，章毓英.检疫性寄生杂草菟丝子的研究［J］.杂草学报，1991，5(2):24－30.