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景宁3个野生灵芝菌株的评比试验

2012-08-02叶丽敏1许元科1宁2刘卫荣1

浙江林业科技 2012年4期
关键词:母种景宁原种

叶丽敏1,许元科1,刘 宁2,刘卫荣1

景宁3个野生灵芝菌株的评比试验

叶丽敏,许元科,刘 宁,刘卫荣

(1. 浙江省景宁畲族自治县林业局,浙江 景宁 323500;2. 浙江博士园生物技术有限公司,浙江 景宁 323500)

对采自景宁畲族自治县的BL09、BL11、BL12三个野生灵芝菌株与当前景宁畲族自治县主栽品种韩芝进行子实体、生物学效率比较,结果表明,4个菌株在母种培养基上,BL09、BL11、BL12之间生长速度差异不显著,而韩芝生长较慢,并与其它菌株存在极显著的差异;BL09和BL11菌丝生长浓密洁白,气生菌丝量大,菌丝边缘整齐,BL12和韩芝则相对较差;4个菌株在原种培养基上的生长速度,BL09和BL11之间差异不显著,BL09、BL11与BL12、韩芝之间存在极显著差异,BL12和韩芝之间差异不显著;菌盖大小为BL09 > BL11 > BL12 > 韩芝,产孢量大小为BL09 > BL11 > 韩芝 > BL12;BL09和BL11产量较高,它们与韩芝和BL12之间存在显著差异,BL12产量最低,评比结果表明,BL09无论在菌丝生长方面还是在子实体生长方面,均优于其它菌株,都表现出良好的长式,是较适宜于景宁生产推广的优良菌株。

灵芝;野生菌株;品比试验;初报

灵芝()属担子菌纲多孔菌目多孔菌科灵芝属,是一种名贵的药用真菌,在我国已有2 000多年的药用历史。《神农本草经》、《本草纲目》等医药著作中记载灵芝有扶正固本、滋补、健脑、强壮、消炎、利尿等功效。经临床实验证明,灵芝有调节免疫、抗肿瘤、抗癌和预防艾滋病的作用。灵芝的药理活性与灵芝中含有丰富的有机锗、各种矿物质、高分子多糖、三萜类化合物、甾醇等活性成份有关。景宁畲族自治县土壤肥沃,水、气、温等气候条件十分适宜灵芝的栽培,灵芝栽培种植的优势突出,灵芝野生资源较为丰富。为筛选出适合景宁当地栽培推广的优良菌株,特对采自景宁畲族自治县的L09、BL11、BL12三个野生灵芝菌株与当前景宁畲族自治县主栽品种韩芝进行比较试验。

1 试验材料与方法

1.1 供试菌株

BL09、BL11、BL12自景宁畲族自治县鹤溪镇、渤海镇、草鱼塘林场等地野生灵芝菌株分离而得,韩芝来自浙江博士园生物技术有限公司,为目前景宁县普遍采用的灵芝栽培菌种。

1.2 培养基配方

母种培养基:马铃薯200 g、葡萄糖20 g、磷酸二氢钾3 g、硫酸镁1.5 g、维生素B110 g、琼脂20 g。

原种培养基:木屑78%,麦麸20%,石膏1%,白砂糖1%。

栽培料配方:木屑78%,麦麸20%,石膏1%,白砂糖1%或采用段木培养基。

1.3 母种制作

称取200 g去皮马铃薯,切成薄片,冲洗,放入水1 100 ~ 1 200 mL烧煮,水开后再煮15 min,以马铃薯酥而不烂为度,用8层纱布过滤取滤液。如滤液不足1 000 mL则补足,然后加入琼脂,烧至琼脂完全融化,再用4 ~ 6层纱布过滤。在滤液中加入葡萄糖等,充分搅拌,使葡萄糖迅速融化,趁热分装试管。用吊桶或漏斗分装,将3种培养基分别装入18 mm×180 mm试管中。装入量为试管高度的1/5 ~ 1/4。注意培养基不要沾着试管口,塞上硅胶塞,包扎成捆,装入高压灭菌锅内,压力升至0.12 kPa,保持30 min,待压力表指针降至0后,打开锅盖,取出试管后斜放。在超净工作台内定量接入平板尖端菌丝,每个菌株接20支,25℃恒温培养。

1.4 原种制作

木屑78%,麦麸20%,石膏1%,蔗糖1%混匀,按料:水 = 1:1.5加水拌匀后装入30 cm×15 cm×0.05 cm,每瓶装折合干料0.25 kg,用塑料环套口,121℃灭菌1.5 h,冷却后在超净工作台内定量接入平板尖端菌丝,每个菌株接20袋,25℃恒温培养。

1.5 栽培方法

拌料同原种,拌好后分装到55 cm×15 cm×0.05 cm的聚乙烯塑料袋中,每袋装折合干料0.75 kg,121℃灭菌2 h,自然冷却后在超净工作台内定量接入原种,每个菌株接20袋,25℃恒温培养。菌丝满袋后移入塑料大棚,菌袋脱去袋膜进行覆土栽培,菌棒间留3 ~ 5 cm间隙,用含腐殖质的园田土填实,浇透水后覆3 cm细土,出芝期温度控制在25 ~ 28℃并保持空间湿度在80% ~ 90%,定期通风。

1.6 试验结果观测

母种萌发后每天划线、测量并记录菌丝生长速度,记录菌丝长满试管的时间以及菌丝的浓密程度、气生菌丝量等情况。原种待菌丝长到瓶肩部时开始沿菌丝生长边缘划线,测量并记录菌丝生长速度、满瓶时间以及菌丝的浓密程度等。栽培中观察记录原基形成时间、采收时间、观察子实体的生物学性状,包括菌盖颜色、菌盖直径、菌柄长度,并记录每潮芝产量,计算生物学效率等数据,本试验共出3潮灵芝。

2 结果与分析

2.1 不同菌株母种试验结果

各菌株母种生长情况见表1。

由表1可见,4个菌株在母种培养基上菌丝的生长速度平均为6.2 mm/d,种间差异显著性比较(q检验)结果显示,BL09、BL11、BL12之间生长速度差异不显著,而韩芝生长较慢并与其它菌株存在极显著的差异。从菌丝生长的形态上看,BL09和BL11浓密洁白,气生菌丝量大,菌丝边缘整齐,BL12和韩芝则相对较差。

表1 各菌株母种生长情况

2.2 不同菌株原种试验结果

各菌株原种生长情况见表2。

表2 各菌株原种生长情况

由表2可见,4个菌株在原种培养基上的生长速度平均为5.8 mm/d,种间差异显著性比较(q检验)结果显示,BL09和BL11之间差异不显著,BL09、BL11与BL12、韩芝之间存在极显著差异,BL12和韩芝之间差异不显著。

2.3 菌株栽培试验结果

2.3.1 不同菌株子实体生物学性状比较 由表3可见,韩芝原基形成较早,BL12较晚且原基形成率较低。BL09和BL12为单生,BL11和韩芝为丛生;BL11和韩芝菌柄较长,BL09最短但较粗;菌盖大小为BL09 > BL11 > BL12 > 韩芝,BL09和韩芝为圆形紫芝为肾形,除BL11号较薄外其它均较厚。子实体颜色BL12较深为紫色,其它为红褐色和橙红色,韩芝颜色最浅。从整体形状来看,BL09、BL12和韩芝较规整,BL12形状不规则趋光性较强。产孢量多少为BL09 > BL11 > 韩芝 > BL12。

表3 各菌株生物学形状比较

2.3.2 不同菌株生物学效率比较 由表4可见,BL09和BL11产量较高二者之间无显著差异,它们与韩芝和BL12存在显著差异,BL12产量最低。

表4 各菌株产量比较

3 小结

不同菌株生物学效率与菌丝生长速度和密度存在一定的相关性。4个菌株的综合评比试验表明,BL09无论在菌丝生长方面还是在子实体生长方面,均优于其它菌株,都表现出良好的长势,菌丝洁白浓密,气生菌丝量较多不易发生污染现象,原基出现较早,原基形成率高,菌盖大、形状好,菌柄粗壮,生物学效率高。BL11号菌柄弯曲,菌盖不规则,适于做灵芝盆景。BL12菌丝生长速度慢,菌丝较细弱,栽培时有污染发生产量低,综上所述BL09是较适宜于生产推广的优良菌株。

[1] 林志彬. 灵芝的现代研究[M]. 北京:北京医科大学出版社,2001.

[2] 章灵华,王会贤,王立为,等. 灵芝孢子粉提取物在体内外的免疫效应[J]. 中国免疫学杂志,1994,10(3):169-172.

[3] 赵东旭,王利波,杨新林,等. 灵芝子实体抗肿瘤成分提取的研究[J]. 北京理工大学学报,1999,19(6):782.

[4] 蔺丽,方能虎,吴旦. 灵芝的主要生物活性研究概况[J]. 中国食用菌,2002,21(3):38-40.

Variety Comparative Test of 3Strains in Jingning

YE Li-min,XU Yuan-ke,LIU Ning,LIU Wei-rong

()

Comparative tests were conducted on fruitbody and biological efficiency of three wild strains(BL09, BL11, BL12) ofand, the main cultivar in Jingning, Zhejiang province. The result showed that growth ofHG was the slowest and had great difference with the other tested 3 strains cultivated on stock culture. The growth of BL09 had not evident difference with that of BL11, similar as the relation of BL12 with HG, but the first two strains had great difference with the later two ones. The size of pileus was ordered by BL09>BL11>BL12>HG, and yield of conidia production by BL09>BL11>HG>BL12. The test demonstrated that BL09 had advantages of white and abundant mycelium, more aerial mycelium, earlier primordium growth with higher survival rate, larger pileus, etc. The test resulted that BL09 was the best in the tested strains in the views of mycelial and fruitbody growth, and recommended to be cultivated in Jingning.

; wild strain; variety comparative test

1001-3776(2012)04-0061-03

S567.31

B

2012-04-18;

2012-06-11

叶丽敏(1970-),女,浙江景宁人,工程师,从事林业生产与技术推广工作。

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