心悦胶囊对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响

肖 寒 付雯雯 周小涵 曲绍春 于晓风 睢大筼 (吉林大学药学院药理教研室，吉林 长春 3002)

心悦胶囊是以西洋参(Panax Quinquefolium Linn)茎叶总皂苷为原料研制的国家中药二类新药，具有益气养心、和血功能，主要用于冠心病心绞痛属于气阴两虚证者。药理研究表明，西洋参茎叶总皂苷能明显改善急性心肌梗死犬心脏血流动力学，降低心肌耗氧量〔1〕，缩小心肌缺血大鼠的心肌梗死面积，降低血清肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶活性〔2〕。由于心脑血管缺血缺氧疾病与中医的“血瘀证”密切相关，而目前有关心悦胶囊防治血瘀证及其辨证分型的研究尚未见报道。本文拟评价心悦胶囊的活血化瘀作用。

1 材料与方法

1.1 动物 清洁级Wistar大鼠，雌雄各半，210～240 g，合格证号SCXK-(吉)2007-0003，由吉林大学实验动物中心提供。

1.2 实验药品及仪器 心悦胶囊由吉林省集安益盛药业股份有限公司提供，批号:20111015，规格:每粒装0.3 g(相当于西洋参茎叶总皂苷50 mg)，用法用量:口服，2粒/次，3次/d，以0.5%羧甲基纤维素钠配制成混悬液。复方丹参片由上海雷允上药业有限公司生产，每片280 mg，批号:20111202，以0.5%羧甲基纤维素钠配制成混悬液。0.1%盐酸肾上腺素注射液，1 mg/ml，北京永康制药厂出品，批号:2009103029。LBY-N6A旋转式血液黏度计，LBY-NJ2型血小板聚集仪:北京普利生集团产品;XN3型红细胞电泳计时器:上海第一医学院产品。

1.3 实验方法 60只大鼠随机分为对照组、模型组、复方丹参组及心悦胶囊150、300、600 mg/kg组，每组10只。药物组每天灌胃给药1次，连续6 d，对照组及模型组给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠2 ml/kg。除对照组外，其他各组大鼠均皮下注射0.1%肾上腺素0.8 ml/kg，2 h后将大鼠浸入冰水中5 min，2 h后再按0.1%肾上腺素0.6 m/kg注射一次以复制急性血瘀模型〔3〕。大鼠复制急性血瘀模型后禁食不禁水12 h，第7天给药后1 h，每组动物以戊巴比妥钠30 mg/kg腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，肝素抗凝。从加有抗凝剂的4 ml全血中取出1 ml加入LBY-N6A旋转式血液黏度计，分别测定全血低切(10/s)、中切(80/s)及高切(160/s)黏度，余下 3 ml全血以3 000 r/min离心10 min，取上层血浆1 ml加入黏度计测定血浆黏度(160/s)。以微量热沉淀法〔4〕测定血浆纤维蛋白原(Fib)浓度;腹主动脉取血 1.5 ml，109 mmol/L枸橼酸钠抗凝。1 500 r/min离心5 min，取上层富血小板血浆(PRP)，余血3 000 r/min离心10 min，取贫血小板血浆(PPP)，用PPP调PRP至血小板数6×1011/L～7×1011/L。以LBY-NJ2型血小板聚集仪按比浊法〔5〕测定血小板聚集活性，求出1、3、5 min的血小板聚集率(PAG)及最大血小板聚集率(MPAG);以微量毛细管法〔6〕测定红细胞压积(Hct);通过XN3型红细胞电泳计时器测定红细胞电泳时间(RCET);测血沉(ESR);进一步推算出红细胞聚集指数(EAI)及红细胞刚性指数(ERI)。

2 结果

2.1 心悦胶囊对大鼠急性血瘀模型全血及血浆黏度的影响模型组大鼠全血低、中、高切黏度及血浆黏度均明显增加，与对照组比较具有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。心悦胶囊300、600 mg/kg组可使全血低、中、高切及血浆黏度均明显降低，与模型组比较具有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)，其作用效果与复方丹参片200 mg/kg相当。心悦胶囊150 mg/kg组对全血低、中、高切黏度及血浆黏度均无明显影响(P＞0.05)。见表1。

2.2 心悦胶囊对急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能的影响模型组大鼠1、3、5 min PAG及MPAG均明显升高，与对照组比较具有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。心悦胶囊 300、600 mg/kg组均可使1、3、5 min PAG及MPAG明显降低，与模型组比较具有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)，其作用效果与复方丹参片200 mg/kg相当。心悦胶囊 150 mg/kg组对1、3、5 min PAG及MPAG均无明显影响(P＞0.05)。见表2。

2.3 心悦胶囊对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响 模型组大鼠血浆 Fib、ESR、Hct、EAI及 ERI均明显增加，RCET 明显延长，与对照组比较具有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。心悦胶囊600 mg/kg组可使大鼠血浆Fib、ESR及Hct明显降低，与模型组比较具有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)，对EAI、ERI及RCET均无明显影响(P＞0.05)。心悦胶囊 150、300 mg/kg组对上述血液流变学的异常变化均无明显改善作用(P＞0.05)。见表3。

表1 心悦胶囊对急性血瘀模型大鼠血液黏度的影响(±s，n=10)

表1 心悦胶囊对急性血瘀模型大鼠血液黏度的影响(±s，n=10)

与对照组比较:1)P＜0.05，2)P＜0.01;与模型组比较:3)P＜0.05，4)P＜0.01;下表同

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表2 心悦胶囊对急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能的影响(±s，n=10，%)

表2 心悦胶囊对急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能的影响(±s，n=10，%)

组别 PAG 1 min 3 min 5 min MPAG对照组 25.50±8.52 37.10±8.55 17.50±8.56 38.14±9.68模型组 40.21±11.52)50.98±12.81)32.66±10.32)57.02±12.42)心悦胶囊组150 mg/kg 35.87±10.6 45.31±11.4 28.51±12.8 48.92±13.2 300 mg/kg 26.66±8.373)38.01±9.743)21.04±8.723)41.32±12.73)600 mg/kg 26.35±9.783)37.17±9.153)17.86±8.134)38.63±8.384)复方丹参组 25.88±8.644)37.22±8.423)17.72±9.034)39.01±8.544)

表3 心悦胶囊对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响(±s，n=10)

表3 心悦胶囊对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响(±s，n=10)

组别 剂量(mg/kg) Fib(%) ESR(%) Hct(%) RCET(s)EAI ERI对照组 － 1.52±0.40 3.22±0.78 40.58±9.25 18.40±4.351.55±0.68 6.15±0.87模型组 － 2.29±0.522) 4.60±1.062) 55.35±12.41) 25.16±5.181) 2.30±0.791) 7.95±1.492)心悦胶囊组 150 2.10±0.42 4.48±1.15 53.17±10.6 25.19±6.81 2.13±0.83 7.58±1.38 300 1.95±0.45 4.02±1.33 48.28±9.18 23.22±5.76 1.98±0.92 6.98±1.62 600 1.54±0.314) 3.58±0.873) 40.76±8.123) 21.02±7.68 1.85±0.95 6.87±1.85复方丹参组 200 1.56±0.254) 3.42±0.913) 40.65±9.133) 19.25±6.33 1.68±0.583) 6.43±1.053)

3 讨论

中医理论认为，“暴怒”之机多为“肝火上亢”，突遇“外寒之邪”侵袭可引发“寒凝气滞”，致使血行不畅、脉胳不通、心胸痹阻、瘀阻血脉，最终造成血瘀证。本文根据血瘀证的“暴怒”“寒邪”机制，采用大剂量肾上腺素加冰水冷浴法复制出血流变性呈黏、浓、凝、集状态的血瘀模型，符合中医活血化瘀药物的治疗原则〔7〕。

血液流变学是研究血液流动性、变形性、凝固性及心血管黏滞性的科学。最常见的检验项目为全血黏度、血浆黏度、Fib、ESR及Hct等。血液黏度是衡量血液流变性的指标，黏度越高，流动性越小，越易堵塞血管形成血栓。血液黏度主要由Hct，血浆黏度及红细胞聚集性等因素决定〔8〕。本实验结果表明，心悦胶囊可使急性血瘀模型大鼠全血黏度、血浆黏度、Fib浓度、ESR及Hct均明显降低，说明其能抑制红细胞聚集，降低红细胞脆性，增强其变形性。本实验还发现，急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能增强，符合临床上气滞血瘀证的表现，与文献报道一致〔9〕。心悦胶囊可使大鼠血小板聚集功能明显降低，表明其对气滞血瘀有良好的治疗作用。这对于防止缺血性心血管疾病时的高黏状态、预防血栓形成均具有益处。

1 吕忠智，于晓风，金 毅，等.国产西洋参茎叶总皂甙对犬心肌血流量及氧代谢的影响〔J〕.中国药学杂志，1992;27(2):272-4.

2 边 城，吕忠智.西洋参茎叶皂苷对实验性心肌坏死的保护作用〔J〕.中国药理学通报，1994;10(3):442-4.

3 陈民利，寿旗扬，潘永明，等.冠心宁片对气滞血瘀大鼠抗血小板聚集和保护血管内皮作用〔J〕.中国临床药理学与治疗学，2005;10(5):586-9.

4 肖 寒，于晓风，曲绍春，等.碟脉灵注射液对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响〔J〕.中国实用医药，2007;2(32):11-4.

5 何小溪，徐华丽，于晓风，等.人参Rb组皂苷对急性血瘀模型大鼠血小板聚集及血液流变学的影响〔J〕.中国药理学通报，2007;23(9):1259-60.

6 姜红玉，于晓风，睢大筼，等.刺五加叶皂苷对实验性脑缺血大鼠血液流变学及血小板功能的影响〔J〕.吉林大学学报(医学版)，2004;30(3):384-6.

7 瑞 香，罗致强，朱雅宜，等.冠心病血瘀血液理化特性与中医证型相关性研究〔J〕.中医杂志，2002;43(4):378-9.

8 于晓风，曲绍春，刘 巍，等.西洋参茎叶20s-原人参二醇组皂苷对实验性脑缺血大鼠血小板功能及血液流变学的影响〔J〕.中药材，2011;34(2):272-5.

9 武继彪，隋在云，许复郁.慢性血瘀证动物模型的建立及其血液流变学的变化〔J〕.中药药理与临床，2001;17(1):45-6.