川厚灵片改善糖耐量作用的实验研究

程 敏 叶小弟 郑高利 浙江省医学科学院 杭州 310013

朱选文 浙江大学医学院附属第一医院

改善淀粉耐量，降低餐后血糖水平是糖尿病和糖耐量异常患者重要治疗方法。阿卡波糖通过抑制淀粉消化酶活性可显著降低餐后血糖水平。研究报道一些中药成分也可通过相似途径改善糖耐量，降低餐后血糖。川厚灵片由黄芪、桑叶和苦瓜等中药组成，根据浙江湖州已故国家级名老中医朱古亭主任医师经验方改良而成，临床用于治疗糖尿病。本实验观察川厚灵片对正常和四氧嘧啶糖尿病模型小鼠淀粉耐量的改善作用。

1 实验材料

1.1 药品与试剂 川厚灵片（干浸膏），深棕色粉末，由湖州中草医药开发应用研究所提供。阿卡波糖片，拜耳医药保健有限公司生产，批号116789。葡萄糖测定试剂盒（GOP-PAP法），宁波赛克生物技术有限公司。四氧嘧啶，SIGMA生产，Lot 12k1460。血清蛋白沉淀剂（配方：Na2HPO410g、Na2WO410g、Na⁃Cl 9g、1N HCl 125mL蒸馏水配制1000mL），自配。

1.2 仪 器 BA-815型半自动生化分析仪，上海三科仪器有限公司生产。

1.3 动 物 ICR小鼠，雄性，清洁级，由浙江省实验动物中心提供，动物合格证：SCXK（浙）2008-0033。

1.4 血糖测定 剪鼠尾尖采全血50μL，加到150μL血清蛋白沉淀剂中，混匀，离心分离无蛋白血滤液，葡萄糖测定试剂盒测血糖含量。

统计学方法：采用组间t检验。

2 实验方法与结果

2.1 川厚灵片对正常小鼠淀粉负荷糖耐量的影响ICR小鼠50只，雄性，体质量24～28g，禁食6h后断尾采血测血糖浓度，随机分为正常对照组、阿卡波糖组、川厚灵片大、中、小剂量组，每组10只。即日起按正常对照组给予自来水，阿卡波糖组给予阿卡波糖100mg/kg，川厚灵片大、中、小剂量组分别给予10mL/kg川厚灵供试液10、5和2.5g/kg灌胃，连续给药7天。末次给药后24h，空腹（禁食6h）断尾采血测血糖浓度，再灌胃给药1次，0.5h后各组均给予淀粉2.5g/kg灌胃，在给淀粉后0.5、1、2和3h分别尾静脉采血测血糖，计算血糖曲线下面积AUC（1/4A+1/2B+3/4C+D+1/2E mmol·h/L，A、B、C、D、E分别为给淀粉后0、0.5、1.0、2.0和3.0h血糖值）和增加的AUC（ΔAUC=AUC-C淀粉负荷前×3h）[1]。

表1 川厚灵片对正常小鼠淀粉负荷糖耐量的影响（） mmol/L

表1 川厚灵片对正常小鼠淀粉负荷糖耐量的影响（） mmol/L

注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组 别正常对照组阿卡波糖组川厚灵组n/只10 10 10剂量/（g/kg）给淀粉后给淀粉前5.51±0.58 5.45±0.61 5.58±0.83 5.53±0.86 5.37±0.42 0.1 10 5 2.5 0.5h 9.49±1.49 5.92±0.73**5.45±0.74**5.90±0.99**6.69±1.21**1.0h 9.22±1.64 6.10±0.78**6.07±0.61**6.90±0.97**7.92±1.53 2.0h 6.70±0.67 5.73±0.62**6.72±0.52 6.41±1.00 6.49±1.15 3.0h 5.05±0.66 5..7±0.58 5.76±0.90 4.35±0.91 4.46±0.72

图1 川厚灵片对正常小鼠淀粉负荷血糖曲线下面积的影响（n=10）

表1和图1结果显示，川厚灵片能明显降低正常小鼠给淀粉后0.5和1.0h的血糖水平，降低血糖峰值、推迟达峰时间，降低血糖曲线下面积AUC和因淀粉负荷后增加的血糖曲线下面积ΔAUC，剂量关系明确。

2.2 川厚灵片对四氧嘧啶性糖尿病模型小鼠淀粉负荷糖耐量的影响 ICR小鼠80只，雄性，体质量22～24g，其中10只尾静脉注射生理盐水，另70只尾静脉注射四氧嘧啶80mg/kg，7天后剪尾尖取血测饱腹血糖。正常动物单独成组，模型动物选取血糖值在30.0～50.0mmol/L小鼠50只并结合体质量状态随机分为模型对照组、阳性对照组、川厚灵片大、中、小剂量组。正常、模型对照组给予自来水，阳性对照组给予阿卡波糖100mg/kg，川厚灵片大、中、小剂量组给予10mL/kg川厚灵供试液10、5和2.5g/kg，灌胃，连续给药23天。末次给药后24h，空腹（禁食5h）断尾取血测血糖，再灌胃给药1次，0.5h后灌胃给予淀粉2.5g/kg，在给淀粉后0.5、1、1.5、2和3h测血糖值，同法计算血糖AUC和ΔAUC。

表2 川厚灵片对糖尿病小鼠淀粉负荷耐量的影响（） mmol/L

表2 川厚灵片对糖尿病小鼠淀粉负荷耐量的影响（） mmol/L

注：与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组 别正常对照组模型对照组阿卡波糖组川厚灵组n/只10 10 10 10剂量/（g/kg）给淀粉后0.1 10 5 2.5给淀粉前7.06±0.62 21.45±1.91 19.88±1.82 20.78±3.76 21.56±0.97 22.36±1.30 0.5h 11.52±1.51 26.46±1.84 22.79±1.88**21.43±2.73**23.63±1.26**24.26±1.71**1.0h 10.66±1.15 29.36±1.00 24.11±1.46**22.31±1.85**25.33±1.63**27.13±2.06**1.5h 10.15±1.03 30.08±1.81 26.35±1.61**23.47±2.12**26.69±1.08**28.29±2.49 2.0h 9.04±1.38 28.77±1.66 27.05±1.04 22.34±2.69**27.01±1.94 29.44±3.07 3.0h 7.71±0.96 26.71±1.92 25.08±1.79 22.08±3.25**25.69±2.77 27.24±2.85

表2和图2结果显示，与模型对照组比较，川厚灵片各剂量组均能明显降低小鼠淀粉负荷后的血糖峰值，AUC和ΔAUC也显著降低，剂量关系明确。

3 讨论

图2 川厚灵片对糖尿病小鼠淀粉负荷血糖曲线下面积的影响（n=10）

糖耐量低减（impaired glucose tolerance，IGT），是指空腹血糖正常而餐后血糖介于正常人与糖尿病患者血糖值之间的一种代谢状态，是糖耐量异常的表现形式[2]。IGT目前还不能视为一种疾病，却是一种可发展为2型糖尿病和心脑血管疾病的高危状态，其发病率与2型糖尿病相仿或更高。中国IGT人群向糖尿病转化的百分比每年达8%～11%[3]。因此，在IGT阶段进行早期干预，可最大限度减少IGT向DM发展，降低心脑血管疾病的危险性。

本实验结果显示，川厚灵片2.5、5.0和10.0g/kg剂量均能显著降低小鼠淀粉负荷后的血糖水平和血糖曲线下面积，延迟血糖达峰时间，剂量关系良好，推测其可能通过抑制淀粉分解和抑制葡萄糖吸收途径调节糖耐量。有关川厚灵片的有效成分、作用调控机制还需进一步的研究。

［1］玄光善，潘士佳，南姬.桑叶有效成分降糖作用研究［J］.食品科学，2011，32（7）:323-326.

［2］杨春花，彭巧君.糖耐量减低症干预措施的研究进展［J］.护理研究，2010，24（6）:1411-1413.

［3］刘桠，陈秋.糖调节受损的病因病机及证治研究进展［J］.辽宁中医杂志，2011，37（7）:1470-1471.