对人结肠癌细胞株HT-29转染shRNA重组质粒后Survivin基因变化的研究

袁禧先 张爽 徐宗云 王凤荣 董慧慧

[摘要] 目的 通过对人结肠癌细胞株HT-29转染shRNA重组质粒后观察Survivin基因的变化。 方法 设计两条针对Survivin基因CDS区不同位点的siRNA片段并构建shRNA表达载体，重组质粒使用阳离子脂质体法转染结肠癌细胞株HT-29。RT-PCR，Western-blot检测转染后mRNA及蛋白表达。 结果 转染shRNA重组质粒可有效抑制HT-29细胞Survivin的表达，Survivin mRNA和蛋白表达下调，表明Survivin基因沉默效果较高；两个转染组之间相比pshRNA1组Survivin基因的表达量低于pshRNA2组。 结论 人结肠癌细胞株中的Survivin基因表达率可通过shRNA重组质粒转染而发生变化；siRNA1和siRNA2序列中Survivin基因表达量存在统计学意义，提示我们在今后有关Survivin基因靶向治疗研究中是否需要考虑到序列的选择以提高作用效果。

[关键词] Survivin；结肠癌HT-29；SiRNA；RT-PCR；Western-blot

[中图分类号] R730.2[文献标识码] A[文章编号] 1673-9701（2012）15-0001-03