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从过敏性鼻炎模型豚鼠免疫功能的变化评价玉屏风散不同剂量配比的干预作用

2012-04-23张文风

山西中医药大学学报 2012年3期
关键词:清涕豚鼠鼻炎

粟 栗,张文风,苏 鑫

(长春中医药大学,吉林长春130117)

过敏性鼻炎属中医“鼻鼽”范围,对于鼻鼽的病因病机,历代医家虽有不同的认识,但大多认为其内因主要是脏腑功能失调,肺脾肾三脏虚损,以致气虚不能卫外,外因主要是风邪侵袭,异气之邪侵袭鼻窍。因其病位在鼻,肺开窍于鼻,故肺气虚弱,卫阳不固,风邪外袭是其关键所在。玉屏风散扶正祛邪,是益气固本之经典方,能够调节机体的免疫功能[1],治疗过敏性鼻炎[2-3],但目前玉屏风散出处较多,虽然功效相似,药物剂量比例却相差很多,比例不同则应用各异[4]。本实验通过观察玉屏风散各单味药不同剂量比例对过敏性鼻炎模型豚鼠行为学及免疫功能的影响,探寻临床应用此方治疗过敏性鼻炎的最佳配比。

1 材料与方法

1.1 实验材料

中药复方玉屏风汤剂由黄芪、白术、防风组成,由本校制剂室提供。血清IgE试剂盒由北京博奥森公司提供。

1.2 实验方法

1.2.1 实验模型的建立[5]取Strain豚鼠75只,体重(300±20)g,适应喂养1 w后,取其中10只为空白对照组,另外65只采用卵清蛋白致敏法制作过敏性鼻炎模型。每只豚鼠以卵清蛋白0.3 mg作为抗原,氢氧化铝粉末30 mg作为佐剂,加生理盐水1 mL制成混悬液,隔日灌胃1次,共7次,为基础致敏。继而以2 g/L卵清蛋白生理盐水溶液滴鼻,每侧10 μL,连续7 d。造模动物于末次鼻腔致敏30 min内,采用“量化叠加记分法”对豚鼠行为学指标进行指标评分,叠加总分≥5为造模成功。取造模成功豚鼠60只,随机分为模型组,息斯敏组,玉屏风散1组,玉屏风散2组,玉屏风散3组,玉屏风散4组6组,每组10只。玉屏风散1、2、3、4组根据比例给予玉屏风散汤剂[10 mL/(kg·d)],模型组和空白对照组给予等量生理盐水,息斯敏组给予息斯敏[0.3 mg/(kg·d)]灌胃,连续给药4 w。

1.2.2 行为学观察 药物连续胃饲4 w,给药后每隔7 d,鼻部滴卵清蛋白生理盐水,观察30 min内搔鼻次数、喷嚏次数和鼻涕程度,并对其行为学进行评分。

1.2.3 血清IgE检测 豚鼠麻醉后,腹主动脉采血,分离血清,ELISA法检测血清中IgE含量。

1.3 统计学方法

选用SPSS11.0进行统计学分析,数据以均数±标准差表示,多组均数之间的比较来用方差分析,两两比较来用q检验。

2 结果

2.1 各组豚鼠行为学评分

结果见表1。

表1 各组豚鼠行为学评分比较 (±s)

表1 各组豚鼠行为学评分比较 (±s)

注:与模型组比较,1)P<0.05

组别 0 d 7 d 14 d 21 d 28 d空白对照组 - - - - -模型组 5.3±0.48 6.1±0.73 6.3±0.48 6.5±0.70 6.8±1.03息斯敏组 5.4±0.51 5.6±0.51 4.3±0.82 2.6±0.51 2.2±0.78 1)玉屏风散 1 组 5.5±0.52 5.6±0.53 4.5±0.70 3.2±0.63 2.7±0.94 1)玉屏风散 2 组 5.3±0.48 5.7±0.48 4.9±0.56 4.1±0.73 3.9±1.10 1)玉屏风散 3 组 5.4±0.51 5.6±0.51 4.6±0.51 3.7±0.48 3.4±0.51 1)玉屏风散 4 组 5.4±0.51 5.8±0.63 5.1±0.56 4.6±0.51 4.2±0.78 1)

由表1可见,空白对照组始终无明显的鼻痒、喷嚏和清涕。模型组挠鼻、喷嚏的次数以及流清涕程度逐天增加。给药第14天开始,玉屏风散各组及息斯敏组豚鼠的鼻炎症状随给药时间的增加而逐渐减轻,好转率逐渐提高。至给药第21天,玉屏风散各组豚鼠的鼻炎症状好转率>70%;给药第28天时,玉屏风散各组豚鼠的鼻炎症状好转率>80%。组间方差分析结果显示,玉屏风散各组与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05),其疗效以第1组最佳,与息斯敏组比较差异无统计学意义(P>0.05),玉屏风散2、3、4、组与息斯敏组相比差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2 血清中IgE含量的变化

结果见表2。由表2可以看出,与空白对照组相比,模型组豚鼠血清IgE浓度明显增高(P<0.01)。与模型组相比,玉屏风散各组及息斯敏组豚鼠血清IgE浓度均有所减轻(P<0.05),玉屏风散1组与息斯敏组对血清IgE含量的影响作用相当。与息斯敏组相比,玉屏风2、3、4组豚鼠血清IgE浓度较高(P<0.05)。

表2 豚鼠血清中IgE浓度比较 (±s)

表2 豚鼠血清中IgE浓度比较 (±s)

注:与空白对照组比较,1)P<0.01;与模型组比较,2)P<0.05;与息斯敏组相比,3)P<0.05

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3 讨论

变应性鼻炎(Allergic Rhinitis,AR),又称过敏性鼻炎,是特应性个体接触致敏原后由IgE介导的介质释放,为开端的、有多种免疫活性细胞和细胞因子等参与的鼻黏膜慢性炎症反应性疾病,临床主要表现为打喷嚏、流清涕、鼻塞和鼻痒。鼻痒、喷嚏是变态反应性鼻炎的特征性外在临床表现,也是I型变态反应在鼻局部的集中症状,故而消除或减少局部症状是改善和调整I型变态反应的客观依据,也是构成变态反应性鼻炎的诊断和疗效评定标准的主要内容。

IgE是1966年发现的一类免疫球蛋白,又称反应素或亲细胞抗体。IgE主要由呼吸道(鼻咽、扁桃体和支气管)和消化道等处黏膜固有层中的浆细胞产生,这些部位也正是变应原易于侵入和发生变态反应的场所,因此IgE在哮喘、过敏性鼻炎以及其他变应性疾病的发生发展中起着关键的介导作用[6]。

通过实验研究发现,玉屏风散各组方给药后均可以改善过敏性鼻炎模型豚鼠的鼻痒、喷嚏、清涕等症状,降低过敏性鼻炎模型豚鼠血清中IgE浓度,证实玉屏风散对过敏性鼻炎模型豚鼠有较好的治疗作用,当黄芪∶白术∶防风为3∶1∶1时效果最佳,为临床治疗提供了依据,其作用机理值得进一步研究。

[1]粟栗.玉屏风散中补气与解表药对小鼠细胞免疫功能的影响[J].长春中医药大学学报,2008,28(5):380.

[2]顾珺,沈朝斌,陆磊.玉屏风散对过敏性鼻炎动物模型的Th1/Th2影响[J].中成药,2006,28(8):1163-1166.

[3]渠开虎,张敏敏.自拟加味玉屏风散治疗过敏性鼻炎的体会[J].现代中西医结合杂志,2005,14(16):2113.

[4]刘青,杨雪.玉屏风散不同剂量比例关系研究及治疗上呼吸道感染概况[J].云南中医学院学报,2008,31(3):61-63.

[5]刘建国,杨政,刘月辉.变应性鼻炎大鼠模型建造[J].江西医学院学报,2008,48(5):33-34.

[6]Leung,D Y.Molecular basis of allergic disease[J].Mol Genet Metab,1998,63(3):157-167.

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